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三叶因子3在实验性胃溃疡大鼠甲状腺中表达及作用

作 者: 魏亚伟
导 师: 任君旭
学 校: 河北北方学院
专 业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 实验性胃溃疡 大鼠 甲状腺 TFF3 免疫组织化学 RT-PCR 酶联免疫吸附实验
分类号: R573.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要


研究表明,甲状腺的组织形态变化和功能与胃溃疡关系密切。溃疡形成和修复过程是在神经、内分泌、免疫调节多方面、多因素作用下完成的。本实验旨在利用免疫组织化学、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),探讨大鼠实验性胃溃疡期间三叶因子3(trefoil factor3, TFF3)基因和蛋白水平的改变:以酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中TFF3的浓度,探讨甲状腺TFF3在大鼠实验性胃溃疡形成和愈合过程中的作用。采用胃黏膜下注射冰乙酸的方法制备大鼠实验性胃溃疡模型。雄性SD大鼠135只随机分为:实验性胃溃疡组(GU)63只,生理盐水对照组(NS)63只,正常组(N)9只。胃溃疡组和盐水组分别于造模后1、2、4、6、10、14、23d上午9:00取材,正常组择期单独取材。各实验组大鼠均取其中6只大鼠甲状腺行免疫组织化学实验,取其余3只大鼠甲状腺备做RT-PCR。以免疫组织化学SP法检测甲状腺TFF3蛋白的表达及变化;RT-PCR检测TFF3mRNA的转录情况;ELISA法检测血清TFF3蛋白的含量及变化。实验过程中动物处置符合2006年科技部《关于善待实验动物的指导性意见》中的要求。免疫组化显示:正常甲状腺TFF3阳性反应物呈棕黄色颗粒状分布于滤泡上皮细胞胞质中,阳性信号较弱,溃疡组和盐水组TFF3表达随溃疡的形成和愈合过程呈一定的变换趋势。胃溃疡不同时期甲状腺TFF3阳性信号的变化:术后1~4d溃疡组和盐水组滤泡上皮细胞形状均变低,溃疡组甲状腺TFF3阳性信号强于正常组和相应盐水组;自术后6d开始溃疡组滤泡上皮细胞较1~4d溃疡组明显增高至正常水平或略有增高;6d溃疡组TFF3表达明显增高,盐水组TFF3表达水平接近正常组;10d溃疡组TFF3阳性细胞染色强度略弱于6d溃疡组,但明显强于10d正常组和盐水组;14d溃疡组甲状腺滤泡上皮细胞呈柱状,细胞较10d溃疡组略有增高,且TFF3阳性信号强于10d溃疡组和相应盐水组;23d溃疡组TFF3阳性信号减弱,但仍高于23d盐水组。平均光密度值和灰度值的变化:1、2d溃疡组TFF3平均光密度值(averge optical degree, AOD)明显高于正常组(P<0.05),与其相应盐水组相比略有增高;4d溃疡组TFF3AOD明显高于正常组(P<0.05)和4d盐水组(P<0.01);6d溃疡组TFF3AOD达高峰明显高于正常组和6d盐水组(P<0.01);10-23d溃疡组AOD值仍高于对照组(P<0.01),但14d溃疡组AOD值高于10d溃疡组。溃疡期间TFF3平均灰度值(mean grey degree, MGD)低于正常组和相应的盐水组,变化趋势与平均光密度值变化正好相反。大鼠胃溃疡愈合不同阶段血清TFF3的变化:溃疡组于术后1d即增多,2-6d维持于较高水平,以6d含量最高,之后虽呈下降趋势,但仍高于正常组或盐水组(P<0.05或P<0.01)。盐水组TFF3含量较正常组在1、2、4d有所升高(P<0.05或P<0.01),之后与正常组相比无统计学差异(P>0.05)。大鼠甲状腺TFF3mRNA表达的变化:TFF3和GAPDH的RT-PCR产物分别为位于100~200bp和500~600bp之间的一条清晰扩增带,将所得条带进行吸光度检测:术后1~4d溃疡组OD值略高于正常组和盐水组,术后6dOD值最高,10~23d溃疡组仍高于对照组(P<0.05或P<0.01)。本课题研究表明:大鼠甲状腺滤泡上皮细胞能够表达TFF3基因和蛋白;溃疡形成及自愈期间大鼠甲状腺TFF3基因和蛋白表达发生改变,并且血清TFF3蛋白在溃疡愈合期间含量升高;甲状腺作为内分泌器官其分泌的TFF3通过血液途径参与胃溃疡愈合。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
英文缩写  10-11
前言  11-12
材料与方法  12-20
结果  20-22
附图  22-27
附表  27-29
讨论  29-34
结论  34-35
参考文献  35-38

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 消化系及腹部疾病 > 胃疾病 > 溃疡病
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