学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

疏肝健脾法促进实验性胃溃疡大鼠生长因子表达的分子机制研究

作　者: 张文天
导　师: 于文涛
学　校: 河北医科大学
专　业: 中医诊断学
关键词: 疏肝健脾实验性胃溃疡病理组织形态表皮生长因子血管内皮生长因子转化生长因子实验研究
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
下　载: 2次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：胃溃疡（GU）是一种全球性常见的消化系统疾病，多由于幽门螺杆菌（HP）、药物及饮食因素、应激精神因素等原因导致胃酸分泌过多、胃蛋白酶消化自身胃壁，致使胃黏膜组织受损而形成的疾病。据统计，约10%的人一生中患过消化性溃疡。现代医学研究认为，胃溃疡属于典型的身心疾病，不良的情绪应激可影响胃肠生理功能，是导致溃疡症状复发或加剧的重要因素。胃炎饮为全国名老中医药专家杨牧祥教授的经验方，具有疏肝健脾，和胃降逆的功效。本次研究通过观察胃炎饮对胃溃疡大鼠胃黏膜病理形态、溃疡面积和表皮生长因子（EGF）、转化生长因子（TGF）、血管内皮生长因子（VEGF）及其mRNA表达的影响，以探讨疏肝健脾法促进溃疡愈合和防止复发的作用机制。方法：参照文献，应用冰醋酸腐蚀法制作胃溃疡大鼠模型。清洁级wistar大鼠50只，雄性，体重为200-220g，购自河北医科大学实验动物中心。适应性饲养1周后，随机抽取8只大鼠作为假手术组，剩余42只参与造模。在造模完成后第3天，除去死亡大鼠，确认模型复制成功后，将存活大鼠随机抽取32只，分为模型对照组（简称“模型组”）、奥美拉唑阳性对照组（简称“对照组”）、胃炎饮高剂量组（简称“胃高组”）、胃炎饮低剂量组（简称“胃低组”），每组为8只。各治疗组大鼠按10ml/kg体重药液分别灌胃给药，胃高组灌服浓度为2.14g生药/ml的胃炎饮的药液，胃低组灌服浓度为1.07g生药/ml体重的药液，对照组灌服浓度为0.368mg/ml的奥美拉唑肠溶胶囊药液。假手术组、模型组大鼠按照10ml/kg体重灌胃生理盐水。上述各组每天灌药或生理盐水1次，共治疗14天。在给药治疗过程中，观察各组大鼠的精神状态、毛发光泽及活动、进食情况。最后一次灌胃给药后禁食24小时，断头处死，无菌操作剖腹取胃组织，沿胃大弯剪开，以冰生理盐水冲洗干净，先肉眼观察胃粘膜的大体形态，再使用游标卡尺量取溃疡的最大长径与垂直最大宽径，计算溃疡面积及溃疡抑制率。在靠近溃疡灶或愈合处周围剪取胃组织，以4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋、切片，HE染色后，在光镜下观察溃疡愈合情况。选取上述石蜡切片，采用免疫组织化学检测EGF、TGF-β1、VEGF的表达情况。在靠近溃疡灶或愈合处周围剪取胃组织，放入玻璃匀浆管中，加入等倍体积的预冷生理盐水，冰盘上匀浆，采用RT-PCR检测EGFmRNA、TGFmRNA、VEGFmRNA的表达。计量资料数据用均数±标准差（士S）表示，采用SPSS16.0统计软件统计，统计方法采用单因素方差分析，然后用LSD法进行组间两两比较，显著性差异水平以P＜0.05和P＜0.01为标准。结果：1各组大鼠的一般状态模型完成后，假手术组大鼠情况无明显变化，其毛发润泽致密，双目有神，反应灵敏，活动量大，进食正常，大便呈颗粒状。其他各组大鼠均出现不同程度的被毛蓬乱，色黄晦暗，萎靡懒动，反应迟钝，食量减少，喜拱背蜷缩，大便发粘量少。随着造模结束后时间推移和治疗给药的进行，各组大鼠上述症状逐渐好转，其中模型组好转较慢，各治疗组症状好转较快，尤以胃高组恢复最快。2各组大鼠胃黏膜病理组织形态的改变2.1大体形态观察假手术组大鼠胃黏膜呈淡红色，皱襞明显，表面未见溃疡、水肿及充血。模型组大鼠胃黏膜呈凹陷状溃疡，边缘整齐，呈圆形或椭圆形，周围黏膜环堤样水肿隆起，形如火山口，附有白色或黄色炎性渗出物和坏死物，周围黏膜皱襞消失，呈剥脱状，有的溃疡处组织还与周围组织存在粘连。其他治疗组大鼠溃疡形态接近模型组，但溃疡表浅，范围较小，渗出物和坏死物很少，周围黏膜无明显水肿充血，有的还可见新生皱襞，部分出现愈合瘢痕。2.2溃疡面积及溃疡抑制率比较同模型组相比，胃高、低组和对照组溃疡面积均显著缩小，差异都具有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）；同时分别与对照组、胃低组相比，胃高组溃疡面积均显著缩小，差异都具有统计学意义（P＜0.05）；胃高组溃疡抑制率为62.7%，高于胃低组27.2%和对照组34.7%。2.3光学显微镜观察假手术组大鼠HE染色胃壁结构正常，黏膜上皮完整，腺体排列规律，未见明显炎性细胞浸润。模型组见胃壁结构破坏，黏膜出现坏死、缺损，腺体消失，细胞排列紊乱，黏膜层有炎性细胞浸润。其他治疗组胃壁结构和黏膜恢复较好，可见胃壁厚度增加，有新生上皮覆盖，粘膜下可见肉芽组织，无明显炎性细胞浸润。胃高组病理表现趋向正常，与假手术组相似。3各组大鼠EGF及EGFmRNA表达的比较3.1各组大鼠EGF表达的比较模型组同假手术组相比，大鼠EGF表达平均光度显著升高，而平均灰度显著下降，差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）；经用药后，各治疗组同模型组相比，平均光度显著升高，平均灰度显著下降，差异都有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）；各治疗组间相比，胃高组比对照组的平均光度升高明显，平均灰度下降明显，差异都有统计学意义（P＜0.05），而胃高组较胃低组的平均灰度下降明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。3.2各组大鼠EGFmRNA表达的比较模型组同假手术组相比，大鼠EGFmRNA表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；经用药后，各治疗组同模型组相比，EGFmRNA表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；各治疗组间相比，胃高组EGFmRNA表达显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01），也显著高于胃低组，差异有统计学意义（P＜0.05）。4各组大鼠VEGF及VEGFmRNA表达的比较4.1各组大鼠VEGF表达的比较模型组同假手术组相比，大鼠VEGF表达的平均光度显著升高，而平均灰度显著下降，差异都有统计学意义（P＜0.01）；经用药后，各治疗组同模型组相比，平均光度显著升高，平均灰度显著下降，差异都有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）；各治疗组间相比，胃高组比对照组的平均光度升高明显，平均灰度下降明显，差异都有统计学意义（P＜0.01），而胃高组较胃低组的平均灰度下降明显，差异有统计学意义（P＜0.01）。4.2各组大鼠VEGFmRNA表达的比较模型组同假手术组相比，大鼠VEGFmRNA表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；经用药后，各治疗组同模型组相比，EGFmRNA表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；各治疗组间相比，胃高组EGFmRNA表达显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），也显著高于胃低组，差异有统计学意义（P＜0.01）。5各组大鼠TGF-β1及TGF-β1mRNA表达的比较5.1各组大鼠TGF-β1表达的比较模型组同假手术组相比，大鼠胃黏膜TGF-β1表达的平均光度显著升高，而平均灰度显著下降，差异都有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）；经用药后，各治疗组同模型组相比，平均光度显著升高，平均灰度显著下降，差异都有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）；各治疗组间相比，胃高组比对照组的平均光度升高明显，平均灰度下降明显，差异都有统计学意义（P＜0.05），而胃高组较胃低组的平均灰度下降明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。5.2各组大鼠TGF-β1mRNA表达的比较模型组同假手术组相比，大鼠TGF-β1mRNA表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；经用药后，各治疗组同模型组相比，EGFmRNA表达显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；各治疗组间相比，胃高组EGFmRNA表达显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01），也显著高于胃低组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：1疏肝健脾法能明显改善胃溃疡大鼠病理组织形态，提高溃疡抑制率，促进溃疡愈。2疏肝健脾法可增强胃溃疡大鼠胃组织EGF及EGFmRNA的表达，加强胃黏膜修复，促进溃疡愈合。3疏肝健脾法可增强胃溃疡大鼠胃组织VEGF及VEGF mRNA的表达，促进血管新生，促进溃疡愈合。4疏肝健脾法可增强胃溃疡大鼠胃组织TGF-β1及TGF-β1mRNA的表达，调节细胞生长和分化，促进溃疡愈合。

全文目录

中文摘要  4-8
英文摘要  8-15
前言  15-16
材料与方法  16-20
结果  20-23
附图  23-32
附表  32-36
讨论  36-42
结论  42
参考文献  42-45
综述  45-51
  参考文献  49-51
致谢  51-52
个人简历  52

疏肝健脾法促进实验性胃溃疡大鼠生长因子表达的分子机制研究

内容摘要

全文目录

相似论文