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拘束冷应激对大鼠组织超微结构及HSP70表达的动态影响

作 者: 吴步猛
导 师: 丁艳锋
学 校: 南京农业大学
专 业: 农业推广
关键词: 大鼠 拘束 冷应激 超微结构 热休克蛋白70
分类号: S858.91
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


通过观察拘束冷应激大鼠肾脏、肝脏组织超微结构损伤的动态影响和心脏、肝脏、肾脏组织中热休克蛋白(HSP70)表达量的变化,以及血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)、肌酸激酶(CK)和谷丙转氨酶(ALT)浓度的动态变化,探讨拘束冷应激对大鼠组织超微结构的影响及其可能的机制。结果如下:1、实验组大鼠肾脏细胞随着冷束缚时间的延长,细胞的损伤呈现逐渐加深趋势,主要表现为肾小球内皮细胞部分线粒体轻微水肿,细胞核出现不同程度的固缩现象,局灶性窗孔粘连。毛细血管基底膜局部增厚,肾小球脏层上皮细胞出现不同程度的足突融合现象并伴有部分线粒体空泡变性。肾小管上皮细胞局灶性胞质溶解,微绒毛紊乱或脱落,线粒体出现浓聚或肿胀现象;细胞核不同程度固缩;质膜内褶出现不同程度的水肿现象。2、实验组的大鼠肝脏细胞随着冷束缚时间的延长,细胞的损伤也呈现逐渐加深趋势,主要表现为肝脏细胞部分线粒轻微水肿,嵴断裂。细胞核出现不同程度的固缩现象,异染色体增多,局灶性窗孔粘连。毛细胆管腔内胆汁淤积,内质网扩张,溶酶体增多,脂质颗粒明显增多,狄斯间隙微绒毛增生明显。3、心脏中HSP70表达量随着应激时间的延长而显著增加,1.5 h组较0h组有明显的增加(P<0.05),而2.0 h后有极明显的增加(P<0.01)。肝脏中HSP70表达量则随应激时间的延长缓慢增加,仅3.0 h组有较明显的增加,与0 h组、0.5 h组及1.0 h组比较有显著差异(P<0.05)。光镜下可见HSP70在肾小球毛细血管内皮细胞的胞核及肾小管上皮细胞的胞核和胞浆中均有表达;随着应激时间的延长肾脏中HSP70的表达首先呈持续增加的趋势,至1.5h时HSP70高度表达(P<0.01),之后明显下降(P<0.05)。4、大鼠血清中的ACTH浓度随着应激时间的增加呈现迅速升高的趋势,0.5 h达到最高值,之后又迅速下降,逐渐趋于平缓。血清中的CORT浓度呈现逐渐升高的趋势。1.5 h达到最高值,之后又迅速下降,逐渐趋于平缓。血清中的CK和ALT活力显著升高,且随着冷应激时间的增加而递增。大鼠胃溃疡指数在应激初期呈现迅速升高的趋势,2.5 h时达到最大值,以后逐渐趋于平缓。急性拘束冷应激对大鼠肾脏和肝脏的损伤具有一定的超微病理特征,其损伤是一个渐进式加重过程,同时加速了细胞凋亡进程。拘束冷应激可使大鼠心脏中HSP70的表达量随着时间的增加而递增,而肝脏中HSP70的表达量,只有在3.0h时才显著增加,表明心脏对拘束冷应激较敏感,而肝脏对拘束冷应激有较强的耐受性。适当强度的拘束冷应激能诱导肾脏组织中HSP70的合成,并且随着时间的延长而增加,但过度的拘束冷应激则可能降低或阻断肾脏HSP70的表达。拘束冷应激可使大鼠血清中的ACTH和CORT的浓度上升,至最高值后迅速下降;而血清中CK和ALT的浓度则随着拘束冷应激时间的增加而递增。拘束冷应激导致大鼠发生急性胃溃疡,应激2.5 h时最严重,表明拘束冷应激大鼠模型的造模时间以2.5 h为最佳。

全文目录


摘要  7-9ABSTRACT  9-12符号说明  12-13第一章 引言  13-17第二章 材料和方法  17-21  2.1 试验材料  17-18    2.1.1 实验动物  17    2.1.2 药品和试剂  17    2.1.3 主要仪器  17-18  2.2 试验方法  18-21    2.2.1 实验动物分组及拘束冷应激处理  18    2.2.2 溃疡指数测定  18    2.2.3 血清生化指标测定  18-19    2.2.4 肾脏、心脏和肝脏组织HSP70标本制作  19    2.2.5 HSP70的检测  19    2.2.6 HSP70数据采集  19    2.2.7 肾脏和肝脏组织电镜标本的制备及观察  19    2.2.8 数据分析与统计  19-21第三章 结果  21-29  3.1 胃溃疡指数(UI)  21  3.2 血清中生化指标的观察  21-22    3.2.1 血清中ACTH的含量  21    3.2.2 血清中CORT的含量  21-22    3.2.3 血清中CK的含量  22    3.2.4 血清中ALT的含量  22  3.3 肾脏组织中HSP70表达的观察  22-23    3.3.1 HSP70表达的光镜观察  22-23    3.3.2 HSP70表达量的变化  23  3.4 心脏组织中HSP70表达的观察  23-24    3.4.1 HSP70表达的光镜观察  23    3.4.2 HSP70表达量的变化  23-24  3.5 肝脏组织中HSP70表达的观察  24    3.5.1 HSP70表达的光镜观察  24    3.5.2 HSP70表达量的变化  24  3.6 肾脏组织超微结构的观察  24-26    3.6.1 对照组(0h组)  24    3.6.2 0.5h组  24-25    3.6.3 1.0h组  25    3.6.4 1.5h组  25    3.6.5 2.0h组  25    3.6.6 2.5h组  25    3.6.7 3.0h组  25-26  3.7 肝脏组织超微结构的观察  26-29    3.7.1 对照组(0h组)  26    3.7.2 0.5h组  26    3.7.3 1.0h组  26    3.7.4 1.5h组  26    3.7.5 2.0h组  26    3.7.6 2.5h组  26-27    3.7.7 3.0h组  27-29第四章 讨论  29-35  4.1 拘束冷应激对大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)的影响  29-30  4.2 拘束冷应激对大鼠血清中生化指标含量的动态影响  30    4.2.1 对大鼠血清中ACTH、CORT的影响  30    4.2.2 对大鼠血清中CK、ALT的影响  30  4.3 拘束冷应激对大鼠组织热休克蛋白表达的动态影响  30-32    4.3.1 对大鼠肾脏组织热休克蛋白表达的影响  30-31    4.3.2 对大鼠心脏组织热休克蛋白表达的影响  31-32    4.3.3 对大鼠肝脏组织热休克蛋白表达的影响  32  4.4 拘束冷应激对大鼠组织损伤的超微结构的动态影响  32-35    4.4.1 对大鼠肾脏组织超微结构的影响  32-33    4.4.2 对大鼠肝脏组织超微结构的影响  33-35第五章 结论  35-37  5.1 结论  35    5.1.1 拘束冷应激对组织超微结构造成损伤  35    5.1.2 拘束冷应激促进组织HSP70的表达  35    5.1.3 拘束冷应激对血清生化指标浓度产生不同的动态变化  35  5.2 创新点  35-37参考文献  37-41附图 拘束冷应激对大鼠组织超微结构的影响和HSP70表达的观察  41-51附录 攻读学位期间发表的学术论文  51-53致谢  53

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 各种家畜、家禽、野生动物的疾 > 野生动物疾病 > 实验用动物
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