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野杜F1代猪猪肉品质及肌内脂肪代谢酶发育性变化规律的研究

作　者: 王倩
导　师: 尹逊河
学　校: 山东农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 长白山野猪与杜洛克猪莱芜猪脂肪代谢酶肌内脂肪 MDH mRNA HSL mRNA
分类号: S828
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

本试验旨在研究长白山野猪与杜洛克猪杂交一代猪猪肉品质和肌内脂肪代谢酶的发育性变化规律及其对肌内脂肪沉积的影响。以5个体重组长白山野猪与杜洛克猪的杂交1代猪（简称野杜F1代猪）和山东省优良地方品种莱芜猪（各40头，公母各半）为研究对象，运用统一肉品分析方法、氨基酸自动分析仪、气相色谱—质谱联用仪、固相微萃取等先进仪器，对野杜F1代猪和莱芜猪的胴体品质、肉质性状和组织学性状、肌内脂肪含量、氨基酸和脂肪酸组成、肌肉、脂肪和肝脏组织中HSL、LPL、FAS、MDH和ICDH五种脂肪代谢酶活性随着体重的发育性变化进行了较为系统全面的测定和研究，运用荧光定量RT-PCR方法测定了肌肉中MDH和HSL mRNA表达的发育性变化。研究了不同组织中脂肪代谢酶活性的发育性变化规律与肌内脂肪含量的关系。结果表明：（1）胴体品质：野杜F1猪的背膘厚在各个体重组都要极显著低于莱芜猪（P＜0.01），在20kg、35kg、70kg和90kg时的脂肪率野杜F1猪极显著低于莱芜猪（P＜0.01），野杜F1猪的瘦肉率在20kg和35kg时极显著高于莱芜猪（P＜0.01）。野杜F1猪的骨骼率在20kg、50kg和70kg时极显著高于莱芜猪（P＜0.01），在35kg时显著高于莱芜猪（P＜0.05）。（2）肉质性状和肌肉组织学性状测定：莱芜猪猪肉的大理石纹在各个体重组均极显著高于野杜F1代猪（P＜0.01），随着体重的增加，肌纤维直径也在不断增大，在50kg和90kg时莱芜猪显著高于野杜F1猪（P＜0.05），在70kg时莱芜猪极显著高于野杜F1猪（P＜0.01），并且莱芜猪的肌纤维直径在各个体重组均高于野杜F1猪。在20kg、50kg、70kg和90kg时莱芜猪极显著高于野杜F1猪（P＜0.01），总体呈下降趋势，并且莱芜猪的肌纤维密度在各个体重阶段的数值均高于野杜F1猪。（3）肌内脂肪含量：不同体重阶段，肌内脂肪和肌肉嫩度均呈差异显著（P＜0.05）。随着体重的增加，二者都呈上升的趋势。在各个体重阶段，莱芜猪肌内脂肪含量均高于野杜F1猪。（4）氨基酸和脂肪酸含量：野杜F1代猪90kg时的17种氨基酸含量均高于莱芜猪，野杜F1代猪氨基酸总量、必需氨基酸含量和鲜味氨基酸含量均极显著高于莱芜猪（P＜0.01），除20kg时除外，其他体重阶段时，野杜F1猪饱和脂肪酸含量均极显著低于莱芜猪（P＜0.01），在20kg和35kg时，野杜F1猪体内亚油酸（C18:2）的含量极显著高于莱芜猪（P＜0.01），多不饱和脂肪酸含量方面，在35kg时野杜F1猪极显著（P＜0.01）高于莱芜猪，在50kg和90kg时也显著高于莱芜猪（P＜0.05）。而在单不饱和脂肪酸方面，除20kg时，莱芜猪均极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于野杜F1猪。（5）脂肪代谢酶活性：在肌肉组织中HSL活性随着体重增加而升高，90kg有上升趋势，并且在各个体重阶段中，野杜F1猪肌肉中的脂肪分解酶HSL活性显著高于莱芜猪，在脂肪组织中，HSL活性随着体重增加而降低，在50kg时到达最高，然后逐渐下降，在肝脏组织中，莱芜猪HSL的活性高于野杜F1猪，变化趋势也相同。肌肉组织、脂肪组织和肝脏组织中的LPL活性变化规律，在体重各个阶段均高于莱芜猪，且呈上升趋势，在生长期各体重阶段，野杜F1猪均呈极显著高于莱芜猪。野杜F1猪肌肉、背膘和肝脏中的LPL活性与肌内脂肪含量成极显著正相关。莱芜猪脂肪合成酶MDH活性显著高于野杜F1猪，野杜F1猪肌肉组织中的MDH与肌内脂肪含量呈极显著正相关。在肌肉、脂肪和肝脏组织中，莱芜猪FAS和ICDH均高于野杜F1猪，均呈逐渐上升的趋势，并且在50kg、70kg和90k时莱芜猪脂肪组织的FAS均极显著高于野杜F1猪（P<0.01），结果提示，肌内脂肪的沉积是由各个组织中的脂肪代谢酶共同调节的，可以通过调控体内脂肪代谢酶活性来调节肌内脂肪的沉积。（6）HSL和MDH mRNA表达：肌肉组织中HSL mRNA的表达量呈现先升高后降低的趋势，在50kg时达到顶峰，其后开始下降，除35kg时，其他体重组的表达量均高于莱芜猪。MDH mRNA的表达量在野杜F1猪的肌肉组织中呈现波状起伏的趋势，而在莱芜猪体内则呈逐步上升至70kg后开始下降。结果提示：野杜F1猪肌肉HSL和MDH基因表达均具有明显的体重发育性特征。

全文目录

摘要  8-10
ABSTRACT  10-13
1 引言  13-22
  1.1 猪肉品质  13-16
    1.1.1 胴体品质  14
    1.1.2 常规肉质性状  14-15
    1.1.3 肌肉组织学特性  15-16
  1.2 猪肉氨基酸和脂肪酸研究进展  16-17
    1.2.1 氨基酸  16
    1.2.2 脂肪酸  16-17
  1.3 脂肪代谢酶活性的研究进展  17-21
    1.3.1 脂肪的沉积  17
    1.3.2 脂肪分解酶--激素敏感脂酶  17-18
      1.3.2.1 HSL 的研究进展  18
      1.3.2.2 影响 HSL 活性的因素  18
    1.3.3 脂肪分解酶—脂蛋白脂酶  18-19
    1.3.4 脂肪合成酶苹果酸脱氢酶  19-20
    1.3.5 脂肪合成酶—脂肪酸合成酶  20
    1.3.6 脂肪酸合成酶—异柠檬酸脱氢酶  20-21
  1.4 长白山野猪的研究进展  21-22
  1.5 本研究的内容、目的和意义  22
2 材料与方法  22-36
  2.1 试验材料  22-24
    2.1.1 试验猪选择与样品采集  22-23
    2.1.2 试验猪的饲养管理  23
    2.1.3 营养水平设计及饲粮组成  23
    2.1.4 试验仪器  23
    2.1.5 试验试剂  23-24
  2.2 试验测定项目及方法  24-36
    2.2.1 胴体品质测定  24
    2.2.2 常规肉质性状测定  24-26
      2.2.2.1 肌肉颜色  24
      2.2.2.2 大理石纹  24-25
      2.2.2.3 肌肉 pH 值  25
      2.2.2.4 失水率  25-26
      2.2.2.5 滴水损失  26
      2.2.2.6 猪肉嫩度的测定  26
    2.2.3 肌肉组织学性状测定  26-28
      2.2.3.1 肌纤维直径  27
      2.2.3.2 肌纤维密度  27
      2.2.3.3 肌小节长度  27-28
    2.2.4 肌内脂肪含量的测定  28
    2.2.5 氨基酸的测定  28
    2.2.6 肌内脂肪酸组成的测定  28
    2.2.7 脂肪代谢酶活性的测定  28-34
      2.2.7.1 FAS 活性测定  28-30
      2.2.7.2 MDH 活性测定  30-31
      2.2.7.3 ICDH 活性测定  31-32
      2.2.7.4 LPL 活性测定  32-33
      2.2.7.5 HSL 活性测定  33-34
    2.2.8 HSL 和 MDH 表达量的测定  34-36
      2.2.8.1 引物设计及合成  34
      2.2.8.2 总 RNA 的提取、纯化与质量检测方法  34-35
      2.2.8.3 反转录  35
      2.2.8.4 荧光定量 RT-PCR 反应及电泳检测  35-36
    2.2.9 数据的统计分析  36
3 结果  36-48
  3.1 野杜 F1 代猪的胴体品质  36-37
  3.2 野杜 F1 代猪的肉质性状的发育性变化  37-38
  3.3 肌肉组织学性状测定  38-39
    3.3.1 野杜 F1 猪和莱芜黑猪肌纤维直径的发育性变化  38-39
    3.3.2 野杜 F1 猪和莱芜黑猪肌纤维密度的发育性变化  39
    3.3.3 野杜 F1 猪和莱芜黑猪肌小节的发育性变化  39
  3.4 野杜 F1 猪肌内脂肪和肌肉嫩度的发育性变化  39-40
  3.5 野杜 F1 代猪肉氨基酸含量  40-41
  3.6 野杜 F1 猪肌肉脂肪酸的测定  41-43
  3.7 野杜 F1 猪不同组织种脂肪代谢酶活性的发育性变化  43-46
    3.7.1 野杜 F1 猪肌肉组织种脂肪代谢酶活性的发育性变化  43-44
    3.7.2 野杜 F1 猪脂肪组织脂肪代谢酶活性的发育性变化  44-45
    3.7.3 野杜 F1 猪肝脏组织中脂肪代谢酶活性的发育性变化  45-46
  3.8 野杜 F1 猪和莱芜黑猪肌肉组织中 HSL 和 MDH mRNA 表达的发育性变化  46-47
  3.9 各组织脂肪代谢酶活性与肌内脂肪含量的相关性分析  47-48
    3.9.1 不同组织中脂肪分解酶与肌内脂肪含量的相关  47
    3.9.2 不同组织中脂肪合成酶与肌内脂肪含量的相关  47-48
4 讨论  48-51
  4.1 野杜 F1 猪的胴体品质及肉质性状  48
  4.2 野杜 F1 猪的氨基酸和脂肪酸组成和含量  48-49
  4.3 肌肉、脂肪和肝脏组织中脂肪代谢酶活性  49-51
    4.3.1 不同组织中 HSL 活性的发育性变化及其对肌内脂肪含量的影响  49
    4.3.2 不同组织中 LPL 活性的发育性变化及其对肌内脂肪含量的影响  49-50
    4.3.3 不同组织中 MDH 活性的发育性变化及其对肌内脂肪含量的影响  50-51
    4.3.4 不同组织中 FAS、ICDH 活性的发育性变化及其对肌内脂肪含量的影响  51
  4.4 肌肉组织中 HSL 和 MDH 基因表达  51
5 结论  51-53
参考文献  53-58
附图  58-62
致谢  62-63
攻读学位期间发表的论文和获得的奖励  63

野杜F1代猪猪肉品质及肌内脂肪代谢酶发育性变化规律的研究

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