学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

葡萄籽原花青素分离及其对胰脂酶活性抑制功能的研究

作　者: 高德艳
导　师: 胡文效
学　校: 齐鲁工业大学
专　业: 生物化工
关键词: 葡萄籽原花青素分离胰脂肪酶非竞争性抑制
分类号: TS209
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
下　载: 1次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

葡萄籽为葡萄酒厂和葡萄饮料厂的资源副产物，约占葡萄鲜重的5%左右。葡萄籽中脂肪含量约为14%～17%，其中亚油酸的含量高达68%～76%。葡萄籽中原花青素具有较强的抗氧化作用，其抗氧化、清除自由基能力达到维生素E的50倍，维生素C的20倍，同时对多种酶如胰脂酶、络氨酸酶、α-淀粉酶具有较强的抑制作用。本文利用超临界CO2流体萃取葡萄籽油脂后的葡萄籽粉为原料，采用有机溶剂萃取法和大孔树脂进行分离葡萄籽中的原花青素，探究葡萄籽原花青素对胰脂酶活性的抑制作用，确定其抑制类型及抑制常数。对脱脂葡萄籽粉中原花青素进行初步萃取。通过正交试验探究不同因素如溶剂、料液比、提取时间、提取温度、溶剂浓度等对葡萄籽中原花青素萃取效果的影响。正交试验结果确定葡萄籽中原花青素的最佳萃取工艺方案，即料液比1:10，在70%乙醇中提取2小时，提取温度为70℃，提取三次，在该工艺条件下，提取液中原花青素的含量为4.94%。通过该工艺原花青素具有提取率高、安全性高、容易操作等优点。葡萄籽原花青素的纯化工艺研究中，利用大孔吸附树脂对原花青素的特异性吸附及解吸进行原花青素的纯化。通过静态试验从8种不同树脂中筛选出最佳树脂HPD100型树脂，实验证明HPD100树脂对葡萄籽原花青素吸附量大、解吸率高、喷干后纯度高，同时该树脂机械强度大、耐酸碱，有利于葡萄籽原花青素的工业化分离。通过吸附实验确定最佳原花青素进样浓度为8.0mg/mL，上样pH值为3.0，进样流度为3.0BV/h。水洗时水洗体积为4.0BV，解吸时用60%乙醇2.0BV/h流速进行洗脱，通过该工艺方法获得的原花青素经干燥纯度达到95%以上。在葡萄籽原花青素对胰脂酶活性的抑制实验通过改变酶反应体系不同条件，探究葡萄籽原花青素对胰脂酶活性的影响。结果表明，葡萄籽原花青素在特定条件下对胰脂酶活性具有抑制作用，通过实验确定原花青素对胰脂酶的抑制常数Ki=0.1032mg/mL，改变不同抑制剂浓度与底物浓度绘制Dixon和Weaver-line图，证明原花青素对胰脂酶活性抑制属于非竞争性抑制。

全文目录

摘要  9-10
ABSTRACT  10-12
第1章绪论  12-24
  1.1 葡萄及葡萄籽资源概述  12-13
    1.1.1 概述  12
    1.1.2 主要成分  12-13
  1.2 葡萄籽资源利用现状  13-15
    1.2.1 葡萄籽超微粉  13-14
    1.2.2 葡萄籽油脂分离及应用  14
    1.2.3 葡萄籽多肽制备及应用  14-15
    1.2.4 葡萄籽原花青素分离及应用  15
  1.3 原花青素的来源、化学结构及理化性质  15-22
    1.3.1 主要来源  15
    1.3.2 化学结构  15-17
    1.3.3 原花青素的性质  17-18
    1.3.4 原花青素的生物合成途径  18-19
    1.3.5 原花青素的生化活性  19-21
    1.3.6 原花青素的分离  21
    1.3.7 原花青素的定性与定量分析  21-22
  1.4 葡萄籽原花青素的研究现状  22-23
  1.5 研究内容  23-24
第2章葡萄籽原花青素的提取  24-36
  2.1 材料与试剂  24
  2.2 设备与仪器  24-25
  2.3 实验方法  25-28
    2.3.1 葡萄籽预处理  25
    2.3.2 葡萄籽中原花青素的萃取  25
    2.3.3 原花青素含量测定  25-26
    2.3.4 优化葡萄籽中原花青素的提取工艺  26-27
    2.3.5 正交实验设计法优化实验  27
    2.3.6 不同产地不同品种葡萄籽中原花青素含量测定与分析  27-28
  2.4 结果与讨论  28-34
    2.4.1 葡萄籽中原花青素含量的标准曲线的确定  28
    2.4.2 溶剂种类对原花青素萃取的影响  28-29
    2.4.3 萃取液 pH 值对原花青素萃取的影响  29-30
    2.4.4 葡萄籽粉碎目数对原花青素萃取的影响  30
    2.4.5 萃取温度对原花青素萃取的影响  30-31
    2.4.6 萃取时间对原花青素萃取的影响  31
    2.4.7 料液比对原花青素萃取的影响  31-32
    2.4.8 萃取次数对原花青素萃取的影响  32
    2.4.9 正交试验结果分析  32-34
    2.4.10 不同产地、品种、年份葡萄籽中原花青素含量测定与分析  34
  2.5 本章小结  34-36
第3章葡萄籽中原花青素的纯化  36-48
  3.1 材料与试剂  36-37
  3.2 仪器与设备  37
  3.3 实验方法  37-40
    3.3.1 原花青素粗提物的预处理  37-38
    3.3.2 葡萄籽中原花青素含量的测定  38
    3.3.3 大孔树脂的预处理与强化再生  38
    3.3.4 大孔树脂静态吸附、解吸实验  38-39
    3.3.5 大孔树脂静态吸附曲线、解吸曲线的绘制  39-40
    3.3.6 大孔吸附树脂对原花青素的动态吸附、解吸实验  40
    3.3.7 大孔吸附树脂对原花青素动态吸附、解吸曲线的绘制  40
  3.4 结果与讨论  40-46
    3.4.1 树脂的确定  40-41
    3.4.2 进样 pH 值的确定  41-42
    3.4.3 料液浓度对树脂吸附的影响  42-43
    3.4.4 树脂静态吸附曲线  43
    3.4.5 树脂静态解吸曲线  43-44
    3.4.6 进样流速的确定  44
    3.4.7 水洗体积的确定  44-45
    3.4.8 解吸剂及浓度的确定  45
    3.4.9 动态解吸流速的确定  45-46
    3.4.10 动态解吸曲线的绘制  46
  3.5 葡萄籽原花青素中 B2含量测定  46
  3.6 本章小结  46-48
第4章葡萄籽原花青素对胰脂酶活性抑制功能的研究  48-58
  4.1 材料与试剂  49
  4.2 仪器与设备  49
  4.3 实验方法  49-52
    4.3.1 葡萄籽原花青素含量测定  49
    4.3.2 胰脂酶活力测定  49-51
    4.3.3 胰脂酶抑制酶活实验  51
    4.3.4 不同因素对酶活抑制影响的研究  51-52
    4.3.5 抑制剂类型与抑制常数的确定  52
  4.4 结果与讨论  52-56
    4.4.1 原花青素对脂肪酶活性的抑制  52-53
    4.4.2 抑制剂浓度对酶活抑制作用的影响  53-54
    4.4.3 体系温度对酶活抑制作用的影响  54
    4.4.4 体系 pH 值对酶活抑制作用的影响  54-55
    4.4.5 反应时间对酶活抑制作用的影响  55
    4.4.6 抑制类型与抑制常数的确定  55-56
  4.5 本章小结  56-58
第5章结论与展望  58-60
  5.1 结论  58
    5.1.1 脱脂葡萄籽原花青素的萃取  58
    5.1.2 葡萄籽原花青素的纯化  58
    5.1.3 原花青素对胰脂酶活性抑制研究  58
  5.2 展望  58-60
参考文献  60-66
致谢  66-68
在学期间主要科研成果  68
  一、发表学术论文  68

葡萄籽原花青素分离及其对胰脂酶活性抑制功能的研究

内容摘要

全文目录

相似论文