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兰香草总黄酮提取、纯化工艺及其体外抑菌活性研究

作　者: 李筱玲
导　师: 李稳宏
学　校: 西北大学
专　业: 化学工程
关键词: 兰香草黄酮提取工艺分离纯化抑菌活性
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

本课题对兰香草总黄酮的检测方法、提取及分离纯化工艺、体外抑菌活性等进行了研究,建立了一条兰香草黄酮的提取、纯化工艺路线并对其中各项工艺参数进行了优化。主要研究成果如下：(1)采用紫外-可见分光光度法检测兰香草提取液中黄酮浓度,并对检测方法进行了方法学考察。结果得到回归方程y=0.0115x-0.0026,相关系数R2=0.9996,表明芦丁在0-55μg/mL范围内线性关系良好;标准品和供试品溶液稳定性试验RSD分别为1.54%、1.66%：精密度和重复性试验RSD分别为0.93%、1.50%;加样回收试验平均回收率为98.42%,RSD为1.44%,表明该方法具有较好的稳定性和重复性,方法准确、可靠。(2)运用PB筛选和BBD设计、优化,得到一条兰香草总黄酮超声提取的工艺路线：’乙醇浓度73%,超声时间32min,液料比45mL/g,在此条件下提取率为5.04%。与传统的乙醇浸提法相比,超声波法节约溶剂,具有较高的效率,优势较为明显,具有一定的推广价值。(3)经过静态吸附及解吸试验结果表明,H-327B型树脂是一种对兰香草黄酮的分离纯化理想的树脂。对该树脂分离过程工艺参数通过优化得到的工艺条件为：以黄酮浓度为9mg/mL的原料液上柱,上柱速率为3BV/h,充分饱和后,以5BV的75%EtOH为洗脱剂进行洗脱。收集洗脱液,减压蒸干溶剂后,干燥即得兰香草黄酮。经纯化后兰香草黄酮纯度由12.14%增加到63.11%,纯化效果显著。(4)由体外抑菌试验结果表明,兰香草黄酮有一定的抗菌活性,具有一定的药用开发价值。经纯化后的兰香草黄酮抑菌试验中所用到的4种细菌的抑菌圈均有较大程度的增加,四种细菌的MIC及MBC均有所减少,证明经纯化处理,对提升兰香草黄酮的抑菌活性是很有帮助的。

全文目录

摘要  3-4
Abstract  4-9
第一章绪论  9-24
  1.1 兰香草简介  9-14
    1.1.1 兰香草的形态特征  9-10
    1.1.2 兰香草的资源分布  10-12
    1.1.3 兰香草的化学成分  12-14
  1.2 黄酮类化合物研究概况  14-22
    1.2.1 黄酮类化合物的生理活性  15-18
    1.2.2 黄酮类化合物提取、分离、纯化方法研究概况  18-22
  1.3 项目研究的背景及意义  22
  1.4 项目研究主要内容  22-24
第二章兰香草总黄酮检测方法研究  24-31
  2.1 黄酮类化合物检测方法概述  24-26
    2.1.1 紫外-可见分光光度法  24-25
    2.1.2 高效液相色谱法  25
    2.1.3 毛细管电泳法  25-26
    2.1.4 其它检测分析方法  26
  2.2 实验材料与仪器  26-27
    2.2.1 实验材料  26-27
    2.2.2 实验仪器与设备  27
  2.3 样品前处理方法  27
  2.4 分析检测方法  27-29
    2.4.1 供试样品溶液的制备  27-28
    2.4.2 供试样品溶液的测定方法  28
    2.4.3 标准品溶液的制备  28
    2.4.4 定量检测的方法学考察  28-29
  2.5 数据记录及分析  29-30
    2.5.1 标准曲线的绘制  29
    2.5.2 稳定性试验  29
    2.5.3 精密度试验  29-30
    2.5.4 重复性试验  30
    2.5.5 回收率试验  30
  2.6 小结  30-31
第三章兰香草总黄酮提取工艺研究  31-43
  3.1 试验材料与仪器  31-32
    3.1.1 实验材料  31
    3.1.2 实验仪器与设备  31-32
  3.2 提取工艺流程  32-33
    3.2.1 提取工艺路线  32
    3.2.2 提取率的确定  32-33
  3.3 单因素试验  33-36
    3.3.1 试验设计  33
    3.3.2 试验结果  33-36
  3.4 Plackett-Burman设计结果与分析  36-38
  3.5 响应面分析试验  38-42
    3.5.1 响应面设计  38
    3.5.2 回归曲线模型及检验  38-39
    3.5.3 三个因素的响应面分析及优化  39-41
    3.5.4 最佳条件的确定及验证实验  41-42
  3.6 小结  42-43
第四章兰香草总黄酮的分离纯化及体外抑菌研究  43-63
  4.1 柱色谱法分离纯化黄酮类物质研究概况  43-44
    4.1.1 分子筛色谱法  43
    4.1.2 硅胶柱色谱  43
    4.1.3 聚酰胺柱色谱  43
    4.1.4 大孔树脂法  43-44
  4.2 试验材料与方法  44-60
    4.2.1 试验材料  44
    4.2.2 试验方法  44-49
    4.2.3 动态条件优化试验  49-60
  4.4 体外抑菌活性试验  60-62
  4.5 小结  62-63
第五章结论  63-65
  5.1 研究成果  63-64
    5.1.1 兰香草黄酮定量检测方法  63
    5.1.2 兰香草总黄酮提取工艺  63
    5.1.3 兰香草总黄酮纯化工艺  63
    5.1.4 兰香草总黄酮体外抑菌活性研究  63-64
  5.2 创新点  64
  5.3 展望  64-65
参考文献  65-70

兰香草总黄酮提取、纯化工艺及其体外抑菌活性研究

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