学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

DC-CIK细胞对人肝癌细胞周期、凋亡、增殖和迁移的影响研究

作　者: 项颖
导　师: 秦波
学　校: 重庆医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: DC-CIK细胞肝癌HEPG2细胞凋亡细胞增值细胞迁移
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 239次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：研究在各种细胞因子作用下，通过一定的试验方法将从原发性肝癌病人PBMC诱导出的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）对人肝癌HEPG2细胞系周期、凋亡、增值、迁移的影响，了解DC-CIK细胞对人肝癌细胞作用的规律，更好地为临床治疗原发性肝癌提供试验基础依据。方法：用原发性肝癌患者肝癌组织裂解物（肿瘤抗原）致敏经GM-CSF、TNF-ａ及IL-4等诱导该患者PBMC产生的DC。用IFN-γ、IL-2和人CD3单克隆抗体等诱导该PBMC的悬浮细胞产生CIK细胞。用Tanswell培养小室将DC-CIK细胞与HEPG2细胞在同一培养体系内经该小室膜分隔培养24、48h。流式细胞仪检测该HEPG2细胞的周期；Annexin V-PI双染法检测其凋亡。RT-PCR、Western blot分别检测凋亡相关基因Bax及其编码蛋白的表达。CCK-8法检测HEPG2细胞生长变化，并绘制其生长曲线；划痕实验检测其增殖、迁移能力。RT-PCR、Western blot分别检测其增殖细胞核抗原PCNA基因及其编码蛋白的表达。结果：DC-CIK细胞可明显影响人HEPG2细胞生长周期，经两者共同培养，可将HEPG2细胞系阻滞于G1期。DC-CIK细胞能显著诱导HEPG2细胞的凋亡(与对照相比，其凋亡诱导率差异显著，P<0.01)。基因与蛋白水平检测表明，DC-CIK细胞可致HEPG2细胞系的凋亡相关基因Bax表达明显上调。CCK-8法检测显示，DC-CIK细胞对人HEPG2细胞生长具显著杀伤作用(与对照细胞比较，P<0.01)。划痕实验、基因与蛋白水平检测表明，DC-CIK细胞可明显抑制该瘤细胞的增值与迁移，能在基因与蛋白水平下调该瘤细胞PCNA的表达。结论：原发性肝癌病人的DC-CIK细胞可明显上调肝癌HEPG2细胞系促凋亡基因Bax的表达，显著诱导该细胞凋亡，且该凋亡诱导具时间-依赖与细胞数量-依赖特性。DC-CIK细胞可显著下调肝癌细胞的PCNA表达，并对其增值与迁移产生明显的抑制作用。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-12
1 材料与方法  12-22
2 结果  22-29
3 讨论  29-32
全文总结  32-33
参考文献  33-36
文献综述  36-46
  参考文献  41-46
致谢  46-47
攻读硕士期间发表论文及申请课题情况  47-48

DC-CIK细胞对人肝癌细胞周期、凋亡、增殖和迁移的影响研究

内容摘要

全文目录

相似论文