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Netrin1-DCC信号通路与Myo10相互作用调节成神经细胞的迁移

作　者: 李宇婷
导　师: 朱筱娟
学　校: 东北师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 神经细胞迁移成神经细胞 Netrin1 DCC Myo10
分类号: Q42
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

位于侧脑室下方的SVZ(subventricular zone, SVZ)区会产生神经元和胶质细胞,并且能一直到成年它都是神经元发生的位点。新产生的SVZ成神经细胞紧密并列呈链状迁移通过SVZ区,随后沿RMS(rostral migratory stream,RMS)区最终迁移至嗅球。迁移的成神经细胞由星形胶质细胞包围。SVZ区是成年动物成神经细胞迁移最活跃的少数位点之一。控制细胞在小鼠大脑中长距离迁移的机制至今仍是研究的热点。而如果对控制成神经细胞迁移的分子机制有了充分的了解,将大大有助于我们探讨研究成年动物大脑中的细胞移植,成神经细胞从SVZ区迁移到嗅球也能很好地反映了成年动物大脑中细胞如何运动。神经细胞的迁移整合了胞外刺激、受体活化、胞内信号转导最终使得细胞骨架改构等一系列的过程,来源于SVZa(anterior subventricular zone, SVZa)的成神经细胞按切线迁移的方式迁移到嗅球,在这个过程中也涉及到一系列的分子机制,但胞内与胞外信号通路相互作用对其迁移的影响至今很少有报道。本文为证明Myo10与Netrin-DCC(deleted in colorectal cancer, DCC)相互作用影响RMS成神经细胞的迁移,首先通过HEK293细胞团与RMS外植体共培养初步确定了Netrin1对RMS成神经细胞的迁移主要起抑制作用。由于已有相关文献指出DCC可以与Myo 10 FERM Domain相互作用,故又通过免疫组化实验观察Myo10在RMS区域的表达情况,作为肌球蛋白家族一员的Myo10在RMS中有较高表达,接着运用体外电转原代培养成神经细胞成团后体外模拟外植体与转染有Netrin1的HEK293细胞团共培养,发现沉默了内源Myo10的成神经细胞迁移能力显著减弱,进而得出结论:Netrin1-DCC信号通路通过与Myo10的FERM Domain相互作用影响成神经细胞的迁移。

全文目录

摘要  4-5
英文摘要  5-7
引言  7-14
  1. 神经细胞的迁移  7-9
  2. 从SVZ脑室管膜下区到嗅球神经细胞迁移的研究  9-12
  3.N etrin1-DCC信号通路的研究  12
  4.M yosin10 的相关研究  12-14
材料和方法  14-19
  2.1 动物材料和细胞株  14
  2.2 化学试剂  14
  2.3 抗体  14
  2.4 仪器  14-15
  2.5 RT-PCR  15
  2.6 免疫组织荧光染色  15-16
  2.7 新生大鼠嗅球外植体与Netrin1 分泌型HEK293 细胞团共培养  16-17
  2.8 新生大鼠嗅球外植体单个细胞分离及培养  17
  2.9 嗅球原代神经元电转  17-18
  2.10 RMS细胞团切割包埋  18-19
结果  19-25
  3.1 Netrin1-DCC信号通路对RMS细胞迁移的影响  19-20
  3.2 Myo10 在RMS区域的表达  20-21
  3.3 沉默Myo10 后RMS成神经细胞迁移受影响  21-23
  3.4 沉默Myo10 后RMS细胞的迁移不受Netrin1 的排斥作用  23-25
讨论  25-27
结论  27-28
参考文献  28-30
致谢  30

Netrin1-DCC信号通路与Myo10相互作用调节成神经细胞的迁移

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