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滋阴补阳方对PCOS大鼠GDF-9、BMPRⅡ基因表达和含药血清对PCOS卵泡培养的影响研究

作　者: 何志华
导　师: 丁家桐; 钱云
学　校: 扬州大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 多囊卵巢综合征生长分化因子9 骨形态发生蛋白受体Ⅱ 含药血清滋阴方补阳方
分类号: R711.75
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是较常见的女性生殖功能障碍性疾病,在育龄妇女中发病率高达5%-10%,是主要引起女性排卵障碍、不孕和月经异常的常见原因之一。由于PCOS病因和发病机制至今仍不十分清楚,也相应的缺乏比较有效的治疗手段,现代医学认为应该深入到卵巢局部内分泌因子、免疫学、遗传学等方面,故PCOS日益为医学界学者所关注。高雄激素血症、高LH血症、高胰岛素血症和胰岛素抵抗是PCOS最重要的内分泌特征。研究表明卵泡发育不但是生育的物质基础,也应是PCOS患者治疗的关键症结。由于PCOS复杂性和临床表现出的多态性,使其治疗较棘手,研究显示中医药治疗该病存在一定优势和较大潜力。鉴于对目前PCOS动物模型了解,建立类PCOS大鼠模型,一方面通过腔前卵泡分离培养方法,从形态学上揭示滋阴补阳方制备的含药血清对PCOS建模大鼠卵泡发育的作用；另一方面通过滋阴补阳方对PCOS大鼠灌胃治疗,通过检测卵巢内GDF-9和BMPRⅡ基因表达丰度差异和血清中激素水平变化,从而从分子生物学和内分泌学角度阐明其作用机制。结果表明PCOS大鼠模型对照组血清T水平显著高于A组,给药后C、ZH、BH组相对B组有了显著的下降；LH水平B组显著高于A组,给药后除BL和BM外其余组都有明显下降；FSH水平B组水平显著低于A组,给药后各组均有显著上升。B组的GDF-9mRNA表达量显著低于A组,给药后出现不同程度的上升；B组的BMPRⅡ mRNA表达量显著高于A组,给药后出现不同水平下降。在对PCOS模型大鼠腔前卵泡进行含药血清培养结果发现除A组外其余各组在培养2d后出现了不同程度的阻碍,颗粒细胞层数减少,BH组较其他含药血清培养组生长发育状况较好,表明补阳高剂量血清促进卵泡发育的作用较明显。

全文目录

中文摘要  3-4
ABSTRACT  4-8
第一部分文献综述  8-14
  1 多囊卵巢综合征概况  8-9
  2 GDF-9与PCOS  9-10
    2.1 GDF-9结构和体内分布  10
    2.2 GDF-9主要生物学效应  10
  3 BMPR Ⅱ与PCOS  10-11
    3.1 BMPR Ⅱ结构  10-11
    3.2 BMPR Ⅱ生物学效应  11
  4 卵泡的体外培养  11-12
  5 中药和卵泡培养  12-13
    5.1 中药血清药理学的研究  12-13
    5.2 中药对卵泡发育的调节作用  13
  6 研究目的和意义  13-14
第二部分滋阴补阳方对PCOS大鼠GDF-9、BMPR Ⅱ基因表达和含药血清对PCOS卵泡培养的影响研究  14-34
  1 材料和方法  14-20
    1.1 试验材料  14-16
    1.2 试验方法  16-20
  2 结果与分析  20-28
    2.1 PCOS大鼠卵巢总RNA检测  20-21
    2.2 PCR产物的特异性检测  21
    2.3 GDF-9、BMPR Ⅱ和β-actin基因扩增效率一致性的判定  21-22
    2.4 GDF9在PCOS大鼠卵巢中的相对表达变化  22-23
    2.5 BMPR Ⅱ在PCOS大鼠卵巢中的相对表达变化  23-24
    2.6 试验各组血清LH、FSH、E_2、T浓度  24-25
    2.7 PCOS腔前卵泡体外培养形态学变化  25-28
  3 讨论  28-34
    3.1 滋阴补阳方对PCOS大鼠血清激素水平的影响  28-29
    3.2 GDF-9在PCOS中的表达  29-31
    3.3 BMPR Ⅱ在PCOS中的表达  31-32
    3.4 含药血清体外培养PCOS腔前卵泡  32-34
结论  34-35
参考文献  35-44
致谢  44-45
攻读学位期间发表的学术论文  45-46

滋阴补阳方对PCOS大鼠GDF-9、BMPRⅡ基因表达和含药血清对PCOS卵泡培养的影响研究

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