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五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜离子通道活性的影响

作 者: 王艳杰
导 师: 季宇彬
学 校: 黑龙江中医药大学
专 业: 中药学
关键词: 五味子多糖 抗肿瘤 离子通道 红细胞免疫
分类号: R285.5
类 型: 博士论文
年 份: 2007年
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内容摘要


目的:本文从五味子多糖的提取、纯化及鉴定入手,进行五味子多糖对S180荷瘤小鼠的抑瘤实验,从红细胞免疫角度,进行五味子多糖对红细胞膜离子通道活性影响的研究,以探讨其抗肿瘤作用机制,为临床应用提供理论依据。方法:采用醇提法进行五味子多糖的提取;采用苯酚-硫酸法进行五味子多糖含量的测定;采用HPCE技术进行五味子多糖单糖组成成分的分析与鉴定;采用分光光度法检测荷瘤小鼠红细胞膜Na+,K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、Band3蛋白的活性,检测荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量、红细胞膜流动性以及红细胞膜封闭度的变化;采用SDS-PAGE以及Westonb lot技术检测荷瘤小鼠红细胞膜Band3蛋白表达含量的变化;采用激光共聚焦技术检测荷瘤小鼠红细胞Ca2+含量的变化;采用免疫花环实验,检测红细胞天然免疫粘附肿瘤细胞的能力。结果:(1)五味子多糖能提高S180荷瘤小鼠红细胞Na+,K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、阴离子转运通道带3蛋白等离子通道的活性(P<0.01);(2)五味子多糖能提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性、红细胞膜唾液酸含量,膜自我封闭能力(P<0.01),降低荷瘤小鼠红细胞Ca2+的浓度(P<0.05);(3)五味子多糖能提高S180荷瘤小鼠红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力(P<0.01),免疫花环率为24.17%;(4)五味子多糖的含量为85.56%,其单糖组成成分为鼠李糖,半乳糖,葡萄糖和阿拉伯糖,存在两个未知糖;(5)五味子多糖的抑瘤率为45.4%。结论:五味子多糖能提高S180荷瘤小鼠红细胞膜离子通道的活性,并在离子通道之间建立相互促进的作用关系,通过离子通道之间的相互促进的作用,调控离子的平衡,改善红细胞膜生理状态,增强红细胞免疫功能,从而发挥其抗肿瘤作用。

全文目录


缩略语表  7-9
中文摘要  9-10
英文摘要  10-12
前言  12-13
文献综述  13-43
  1 中药多糖抗肿瘤作用机制的研究进展  13-21
    1.1 多糖的免疫调节功能  15-16
    1.2 直接抑制肿瘤生长  16
    1.3 抑制肿瘤细胞的蛋白质和核酸的合成  16-17
    1.4 影响肿瘤细胞膜的生化代谢  17-18
    1.5 抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡  18-19
    1.6 其它作用机制  19-21
  2 红细胞免疫功能研究  21-27
    2.1 红细胞免疫功能的发现  21
    2.2 红细胞免疫功能的物质基础  21-22
    2.3 红细胞免疫在抗肿瘤方面的作用  22-25
    2.4 红细胞免疫功能的变化与肿瘤  25-26
    2.5 多糖与肿瘤红细胞免疫  26-27
  3 红细胞膜与离子通道的相关研究  27-38
    3.1 红细胞膜的结构与功能  27-28
    3.2 离子通道类型与功能  28-30
    3.3 离子泵与离子通道的关系  30-31
    3.4 红细胞膜离子通道的相关研究  31-38
  4 五味子多糖的研究进展  38-43
    4.1 五味子多糖的提取工艺及分析方法  40-41
    4.2 五味子多糖的药理作用研究进展  41-43
实验研究  43-98
  第1章 五味子多糖的提取、纯化及含量测定  43-48
    1.1 引言  43
    1.2 实验材料、仪器及试剂  43-44
    1.3 实验方法  44-45
    1.4 实验结果  45-47
      1.4.1 葡萄糖标准曲线  45-46
      1.4.2 五味子多糖含量测定结果  46-47
    1.5 本章小结  47-48
  第2章 五味子多糖的单糖组分的分析与鉴定  48-51
    2.1 引言  48
    2.2 实验材料、仪器及试剂  48
    2.3 实验方法  48-50
    2.4 实验结果  50
    2.5 本章小结  50-51
  第3章 五味子多糖对荷瘤小鼠的抑瘤作用  51-57
    3.1 引言  51
    3.2 实验材料、仪器与药品  51
    3.3 实验方法  51-52
    3.4 实验结果  52-55
      3.4.1 五味子多糖对H_(22)荷瘤小鼠生存时间的影响  52-53
      3.4.2 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠生存时间的影响  53-54
      3.4.3 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠抑瘤作用的影响  54-55
    3.5 本章小结  55-57
  第4章 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜 Na~+-K~+-ATP酶及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影响  57-62
    4.1 引言  57
    4.2 实验材料、仪器及试剂  57-58
    4.3 实验方法  58-59
    4.4 实验结果  59-61
      4.4.1 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜 Na~+-K~+-ATP酶活性的影响  59-60
      4.4.2 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜 Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影响  60-61
    4.5 本章小结  61-62
  第5章 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞[Ca~(2+)]的影响  62-66
    5.1 引言  62
    5.2 实验材料、仪器及试剂  62-63
    5.3 实验方法  63-64
    5.4 实验结果  64-65
    5.5 本章小结  65-66
  第6章 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜阴离子转运通道 Band3蛋白相对含量的影响  66-73
    6.1 引言  66
    6.2 实验材料、仪器及试剂  66-67
    6.3 实验方法  67-71
    6.4 实验结果  71-72
      6.4.1 S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的结果  71-72
      6.4.2 Weston blot检证S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜 Band3蛋白表达的影响  72
    6.5 本章小结  72-73
  第7章 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜阴离子转运通道 Band3蛋白功能的影响  73-76
    7.1 引言  73
    7.2 实验材料、仪器及试剂  73
    7.3 实验方法  73-74
    7.4 实验结果  74-75
    7.5 本章小结  75-76
  第8章 五味子多糖对 S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量的影响  76-81
    8.1 引言  76
    8.2 实验材料、仪器及试剂  76-77
    8.3 实验方法  77-78
    8.4 实验结果  78-79
    8.5 本章小结  79-81
  第9章 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜流动性影响  81-85
    9.1 引言  81
    9.2 实验材料、仪器及试剂  81-82
    9.3 实验方法  82-83
    9.4 实验结果  83-84
    9.5 本章小结  84-85
  第10章 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜封闭度的影响  85-89
    10.1 引言  85
    10.2 实验材料、仪器及试剂  85-86
    10.3 实验方法  86-87
    10.4 实验结果  87-88
    10.5 本章小结  88-89
  第11章 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠红细胞天然免疫粘附肿瘤细胞能力的影响  89-93
    11.1 引言  89
    11.2 实验材料、仪器及试剂  89-90
    11.3 实验方法  90
    11.4 实验结果  90-91
    11.5 本章小结  91-93
  第12章 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠血清中红细胞免疫调节因子活性的影响  93-98
    12.1 引言  93
    12.2 实验材料、仪器及试剂  93
    12.3 实验方法  93-95
    12.4 实验结果  95-96
      12.4.1 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠血清中红细胞免疫促进因子的影响  95
      12.4.2 五味子多糖对S_(180)荷瘤小鼠血清中红细胞免疫抑制因子的影响  95-96
    12.5 本章小结  96-98
讨论  98-108
结论  108-110
致谢  110-111
参考文献  111-124
图版  124-129
攻读博士学位期间发表的学术论文  129-131
个人简介  131

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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