学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

5-FU与Ⅲ型PI3K信号通路抑制剂联合应用对人胃癌SGC7901细胞的影响

作　者: 孙家磊
导　师: 邢春根
学　校: 苏州大学
专　业: 普通外科学
关键词: 5-FU PI3K(III)-RNAi-AD 增殖 凋亡 自噬
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 31次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的:研究5-FU与Ⅲ型PI3K信号通路抑制剂联合应用对人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡和自噬的影响。方法:分别用5-FU、特异性阻断Ⅲ型PI3K信号转导通路的重组腺病毒PI3K(III)-RNAi-AD、腺病毒NC-RNAi-GFP-AD、5-FU与Ⅲ型PI3K信号通路的抑制剂PI3K(III)-RNAi-AD联合干预胃癌SGC7901细胞24h、48h、72h后,采用MTT法测定各干预对胃癌SGC7901细胞生长的抑制情况,应用流式细胞技术JC-1法检测各干预对胃癌SGC7901细胞线粒体膜电位的影响,应用MDC荧光染色法观察胃癌SGC7901细胞自噬的发生情况,应用免疫荧光法观察自噬特异性蛋白微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)在胃癌SGC7901细胞中的表达情况;在透射电镜下观察不同干预组胃癌SGC7901细胞的自噬状态。结果:5-FU与PI3K(III)-RNAi-AD联合干预组的胃癌SGC7901细胞增殖明显受到抑制,联合干预组24h、48h、72h的吸光率分别为0.17±1.64%、0.13±4.64%、0.11±3.56%,显著低于其余干预组,差异具有统计学意义(P<0.05),联合干预组24h、48h、72h的抑制率分达到45.89%±6.67%、72.57%±9.48%、87.51%±4.65%,显著高于其余干预组,差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示:联合干预组处理胃癌SGC7901细胞24h、48h、72h后,绿色荧光细胞占总细胞的百分比分别为74.4%±3.86%、82.3%±1.84%、92.5%±1.1%,显著高于其余干预组,差异具有统计学意义(P<0.05),绿色荧光细胞数占细胞总数的比值越大,表明线粒体膜电位越低。MDC染色结果显示:联合干预组随着时间延长(24h、48h、72h)自噬囊泡逐渐减少,其余干预组自噬囊泡数量显著高于联合干预组。荧光显微镜下观察到联合干预组LC3蛋白表达随时间延长(24h、48h、72h)逐渐降低,联合干预组免疫荧光强度显著低于其余干预组。电镜下观察各干预组细胞的超微结构,发现联合干预组细胞内自噬体数量显著少于其余干预组,随着时间延长,联合干预组细胞内自噬体数量显著减少。结论:5-FU与Ⅲ型PI3K信号通路抑制剂联合应用使胃癌SGC7901细胞的增殖明显受抑,线粒体膜电位水平显著下降,自噬水平明显下调。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-9
研究背景  9-11
引言  11-12
材料与方法  12-22
  一、材料  12-13
  二、方法  13-22
结果  22-33
  一、病毒PI3K(III)-RNAi-AD和NC-RNAi-GFP-AD的滴度及对SGC7901 细胞的最佳感染复数  22-23
  二、各种干预对胃癌 SGC7901 细胞增殖的抑制作用  23-24
  三、各干预组中胃癌 SGC7901 细胞线粒体膜电位变化的情况  24-27
  四、MDC 荧光染色检测各干预组中胃癌 SGC7901 细胞自噬的表达情况  27-29
  五、各干预组中胃癌SGC7901细胞内自噬特异性蛋白LC3分布和表达情况  29-31
  六、透射电镜下观察各干预组中胃癌 SGC7901 细胞的超微结构的变化情况  31-33
讨论  33-37
结论  37-38
参考文献  38-40
综述  40-49
  参考文献  47-49
中英文对照缩略词表  49-50
攻读学位期间公开发表的论文  50-51
致谢  51-53

相似论文

  1. Pin1在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞周期的影响,R738.1
  2. 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
  3. TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
  4. 冷却分割猪肉中腐败微生物分离鉴定与生长特性的研究,R446.5
  5. 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
  6. β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
  7. 伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1联合诱导Vero细胞凋亡的研究,S856.9
  8. 沉默BMPR-IB基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡及BMP通路相关基因表达的影响,S828
  9. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  10. WWOX在胆管癌组织中的表达及其对胆管癌细胞生物学行为的影响,R735.8
  11. hnRNP A2/B1及p21WAF1蛋白在非小细胞肺癌中表达及意义,R734.2
  12. 组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A对猪卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响,S828
  13. 常规化疗联合节拍化疗对乳腺癌裸鼠移植瘤的实验研究,R737.9
  14. 凋亡调控因子Survivin、XIAP以及c-Jun、NF-κB在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义,R737.31
  15. 骨髓间充质干细胞血肿周边移植对大鼠脑出血的治疗作用及相关机制的探究,R743.34
  16. 半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂对口腔肿瘤细胞抑制作用实验研究,R739.8
  17. 牛膝总皂甙对兔早期骨关节炎及PI3K/AKT通路的影响,R285.5
  18. 大承气汤对多器官功能障碍综合征大鼠小肠平滑肌细胞Bcl-2和Bax表达的影响,R285.5
  19. 斑蝥素诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡及其机制研究,R737.9
  20. 藁本内酯对抗D-半乳糖和过氧化氢致氧化应激损伤的神经保护作用,R285.5
  21. 重组hIL-10抗家兔皮肤移植排斥反应及其对IL-2、IFN-γ、GCs、T细胞凋亡的影响,R392

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胃肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com