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RNA干扰抑制HBV C基因在BHK-21细胞中的表达

作　者: 孙璐璐
导　师: 边中启
学　校: 昆明医学院
专　业: 内科学
关键词: 乙型肝炎 RNA干扰 小干扰RNA 病毒防御
分类号: R512.62
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要


乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染呈世界性流行，据WHO报道，全球约20亿人曾感染HBV，其中3.5亿人为慢性HBV感染者，每年约有100万人死于HBV感染所致的重型肝炎、肝硬化和肝细胞癌。我国HBV感染广泛流行，虽然应用乙肝疫苗使新发HBV感染有所下降，但一般人群中HBsAg阳性率为9.09％。特别是重型肝炎病死率高达80％，严重威胁尘命。由于HBV感染的致病机制尚不清楚，故缺乏有效的防治手段。本课题结合前期对中国云南少数民族地区慢性乙型肝炎患者病毒基因型的鉴定和中国云南少数民族地区慢性乙型肝炎患者病毒基因在大肠杆菌中的表达及抗原性等研究工作，利用云南少数民族慢性乙肝(Chronic hepatitis B，CHB)患者血样作为研究材料，应用RNA干扰(RNAinterference，RNAi)技术，确定RNAi抗HBV的复制与表达，明确了RNAi抗HBV表达的分子机制，探讨了RNAi抗HBV作用的可行性，为乙肝防治提供理论依据。RNAi是近年来生命科学最热点的研究领域，RNAi是20世纪末发现的一种真核生物细胞在转录后引发基因沉默的分子机制，诱发RNAi最关键分子是长度为19—27个核苷酸的双链RNA，即小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)，并由一系列蛋白复合物介导，对与之具有序列同源性的基因在转录、转录后、翻译等水平进行表达调控。siRNA可以由细胞内源性产生，或者外源性由病毒感染、转座子侵入或质粒转染表达。该机制在从酵母到哺乳动物等真核生物中普遍存在保守性，并证明在这些物种中发挥着发育调控、病毒免疫等重要功能。目前，RNAi分子机制及其功能至今仍有待更加细致地阐明，但在抵抗人类重大遗传性疾病和病毒性疾病治疗方面的探索性研究已有报道。本文主要研究了RNAi抑制HBV C基因在BHK-21细胞中的表达，对HBV感染的防治具有重要意义。

全文目录


主要英文缩写列表  5-6
中文摘要  6-7
英文摘要  7-9
前言  9-12
第一部分 靶基因表达载体pEGFP-C的构建  12-25
  1. 材料  12-15
  2. 实验方法  15-20
  3. 结果  20-23
  4. 讨论  23-25
第二部分 siRNA表达载体的构建  25-42
  1. 材料  25-27
  2. 实验方法  27-34
  3. 结果  34-38
  4. 讨论  38-42
第三部分 RNAi抗 HBV研究  42-51
  1. 材料  42
  2. 实验方法  42-45
  3. 结果  45-49
  4. 讨论  49-51
结论  51-52
创新点  52-53
参考文献  53-54
综述  54-68
致谢  68

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 传染病 > 病毒传染病 > 病毒性肝炎 > 乙型肝炎
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