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苹果采后病害拮抗酵母菌的分离、筛选及其防治研究

作　者: 巩文峰
导　师: 马青
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 植物病理学
关键词: 拮抗酵母菌 生物防治 苹果 采后病害
分类号: S436.611
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 333次
引　用: 3次
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内容摘要


青霉病、灰霉病和炭疽病是苹果贮藏期的主要侵染性病害,应用拮抗酵母菌进行果蔬采后病害的生物防治是安全有效的方法,本研究通过分离、筛选获得对三种病害均具有优异效果的拮抗酵母菌株,并测定所筛选出的菌株不同处理对上述病害的抑制效果,拮抗酵母菌在果实伤口的定殖情况以及低温情况下酵母菌的存活能力。取得的主要成果如下:用稀释平板法,从果实表面分离得到76个菌株。通过果实接种法初筛和复筛筛选出3株酵母菌2SP、3SD和3SJ对青霉菌(Penicillium expansum)、灰霉菌(Botrytis cinerea)和炭疽菌(Colletotrichum gloeosporides)有拮抗作用,能明显抑制上述病菌的生长,其病斑直径显著小于病菌对照,其中3SJ对3种病害的防治效果分别为91%、83%和82%。拮抗酵母菌浓度影响病斑的扩展,拮抗酵母菌的浓度越高对3种病害的抑制效果越好,当3株酵母菌浓度由1×106cfu/mL增加到1×108cfu/mL,其对青霉菌的防治效果由36%增加到92%,对灰霉菌的防治效果由25%增加到81%,而对炭疽菌的防治效果由12%增加到77%。用不同的酵母菌处理液处理果实,其中浓度为1×108cfu/mL的拮抗酵母菌悬浮液对青霉、灰霉和炭疽病有较好的抑制效果,离心灭菌上清液和过滤上清液对于病菌没有抑制效果,表明这3株酵母菌不是通过产生抑菌物质来抑制病菌的扩展,营养和空间的竞争可能是其抑制病害的发展的主要机制。在离体条件下,酵母菌悬浮液浓度越高对病菌孢子萌发的抑制能力越强,在25℃条件下,当酵母菌的浓度为1×108 cfu/mL时,能完全抑制病菌孢子的萌发,而离心灭菌上清液和过滤上清液却没有这种作用。拮抗菌2SP、3SD和3SJ能够在果实伤口迅速生长定殖。酵母菌3SJ和3SD在第3天达到最高值,数量提高了近10000倍;酵母菌2SP在第5天达到最高值,酵母菌数量提高了近3000倍,之后酵母菌数量逐渐下降,但较缓慢。在4℃低温条件下酵母菌可以在苹果伤口上存活至少一个月,且酵母菌数量高于起始值。因此这类能耐低温的酵母菌为在果品的低温冷藏中的应用奠定了基础

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
第一章 文献综述  10-28
  1.1 果实采后腐烂情况  10
  1.2 控制果实采后病害的主要方法及其特点  10-12
    1.2.1 采后病害的侵染途径  10-11
    1.2.2 主要果实贮藏方法及特点  11-12
  1.3 采后病害的防治方法  12-13
  1.4 防治因子的利用  13-16
    1.4.1 利用天然植物产物控制采后病害  13-14
    1.4.2 采后果实抗病性的诱导  14
    1.4.3 利用抗病基因工程技术  14-15
    1.4.4 用于采后病害生物防治的拮抗微生物  15-16
  1.5 拮抗菌的来源和种类  16-19
    1.5.1 拮抗菌的挑选标准  18-19
  1.6 拮抗酵母菌的作用机理  19-22
    1.6.1 营养、空间的竞争  19-20
    1.6.2 产生胞外活性物质  20
    1.6.3 产生细胞壁降解酶并直接侵染病原菌(重寄生作用)  20-21
    1.6.4 诱导影响果蔬组织的抗病性  21-22
  1.7 提高拮抗酵母菌抑菌效果的方法  22-25
    1.7.1 使用拮抗剂的混合物  22-23
    1.7.2 几种拮抗菌的混合使用  23
    1.7.3 与低剂量杀菌剂结合使用  23-24
    1.7.4 与金属离子配合使用  24
    1.7.5 基因工程方法提高拮抗菌的抑菌能力  24-25
  1.8 拮抗酵母菌的应用前景及问题  25-26
    1.8.1 应用现状  25
    1.8.2 发展前景  25-26
    1.8.3 存在问题  26
  1.9 本研究目的与意义  26-28
第二章 材料与方法  28-33
  2.1 主要仪器、基础培养基的组成和实验材料  28
    2.1.1 主要仪器  28
    2.1.2 基础培养基成分  28
    2.1.3 实验材料  28
  2.2 苹果采后病原菌的分离、纯化和病原菌菌悬液的制备  28-29
  2.3 酵母菌的分离、纯化和保存  29-30
    2.3.1 酵母菌的分离  29
    2.3.2 菌株的保存  29-30
  2.4 拮抗菌的筛选  30-31
    2.4.1 不同量的酵母浸膏对培养酵母菌数量的影响  30
    2.4.2 酵母菌菌悬液的制备  30
    2.4.3 不同浓度的的酵母菌悬浮液对青霉、灰霉病和炭疽病的抑制效果  30-31
  2.5 拮抗酵母菌的抑菌机理  31-32
    2.5.1 对筛选出的酵母菌进行离体(in vitro)检验  31
    2.5.2 酵母菌的不同处理液对3 种苹果采后病害的抑制效果  31
    2.5.3 不同处理液对3 种病原菌孢子萌发的影响  31-32
    2.5.4 3 株酵母菌在苹果果实伤口处的生长动态  32
  2.6 3株酵母菌在苹果伤口上低温储藏的存活能力  32-33
第三章 结果与分析  33-45
  3.1 不同青霉菌的致病性  33
  3.2 酵母菌的分离与保存  33-34
  3.3 拮抗酵母菌的筛选  34-40
    3.3.1 不同量配方对酵母菌数量增长的影响  34
    3.3.2 防治青霉菌、灰霉菌和炭疽菌的拮抗菌筛选  34-39
    3.3.3 不同浓度的的酵母菌悬浮液对3 种采后病害的抑制效果  39-40
  3.4 拮抗菌酵母的抑菌机理  40-43
    3.4.1 筛选出酵母菌的in vitro检验  40-41
    3.4.2 酵母菌的不同处理液对3种苹果采后病害的抑制效果  41-42
    3.4.3 不同处理液对3种病菌孢子萌发的影响  42
    3.4.4 3 株拮抗酵母菌在苹果果实伤口处的生长动态  42-43
  3.5 3 株酵母菌在苹果伤口上低温储藏的存活能力  43-45
第四章 讨论  45-49
  5.1 拮抗酵母菌的分离、纯化与保存  45-46
  5.2 拮抗酵母菌的筛选  46-47
  5.3 拮抗酵母菌对采后病害的防治效果  47
  5.4 拮抗菌酵母的抑菌机理  47-48
  5.5 拮抗酵母菌的应用  48-49
第五章 结论  49-50
参考文献  50-56
附录  56-57
致谢  57-58
作者简介  58

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 果树病虫害 > 仁果类病虫害 > 苹果病虫害
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