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所谓肺硬化血管瘤的克隆性

作　者: 张丽
导　师: 张伟；巩丽；李艳红
学　校: 第四军医大学
专　业: 病理与病理生理学
关键词: 单克隆硬化性血管瘤肺肿瘤雄激素受体磷酸甘油酸酯激酶
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 2次
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内容摘要

目的:利用基于女性体细胞构成组织内X染色体失活嵌合性和雄激素受体( androgen receptor , AR )、磷酸甘油酸激酶( polymorphism of phosphoglycerate kinase, PGK)基因位点的克隆性分析技术和激光显微切割技术,探讨所谓肺硬化性血管瘤(pulmonary sclerosing haemangioma, PSH)组织中表面立方细胞、间质多角形细胞以及整个病变的克隆性,以进一步阐明该病变的性质及整个病变与两种细胞的关系。方法:选PSH女性患者所谓肺硬化性血管瘤手术切除标本29例。所有标本均经4 %中性福尔马林固定,石蜡包埋后进行切片HE染色。然后应用激光捕获显微切割技术分别获取整个病变、PSH组织中多角形细胞、表面立方细胞及周围同样大小的正常肺组织,提取基因组DNA。Bst XI酶切,用甲基化敏感的限制性内切酶HpaⅡ消化,巢式聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增磷酸甘油酸酯激酶(phosphoglycerate kinase, PGK)基因。HhaⅠ酶切后,PCR扩增X染色体连锁的雄激素受体(androgen receptor, AR)基因。PGK基因扩增产物的多态性和克隆性经2 %琼脂糖电泳显示。AR基因扩增产物经8 %变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显示其长度多态性及克隆性。结果:29例所谓肺硬化性血管瘤病变,光镜下均表现其典型的组织学特征,即病变主要由间质圆形或多角形细胞和表面立方细胞所构成,形成实体区、乳头区、硬化区和出血区结构。高倍镜下可见实性区细胞呈圆形或多角形,胞质呈嗜酸性或略呈透明状,核分裂罕见,乳头状结构表面均被覆单层立方上皮。克隆性检测结果表明AR和PGK位点的多态性分别为:有23例(79.3%,23/29)显示AR基因位点具有多态性。7例(24.1%,7/29)显示PGK基因位点具有多态性。经HhaI、HpaⅡ酶切后,所有具有多态性的标本两个条带中有一个条带的密度明显减弱或消失,而另一个条带保留,证明其均为肿瘤性增生。结论:所谓肺硬化性血管瘤组织中的多角形细胞、表面立方细胞及整个病变都具有相似的单克隆性增生模式,这一结果表明它们可能均为肿瘤的实质性细胞。

全文目录

缩略语表  5-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-11
文献回顾  11-23
正文  23-37
  实验一  23-37
    1 材料  23-24
    2 方法  24-28
    3 结果  28-34
    4 讨论  34-37
小结  37-38
参考文献  38-45
个人简历  45-46
致谢  46

所谓肺硬化血管瘤的克隆性

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