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玫瑰蜂花粉多糖的分离纯化及理化性质分析

作　者: 佟进
导　师: 周义发
学　校: 东北师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 玫瑰蜂花粉多糖分离纯化理化性质
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本文对玫瑰蜂花粉多糖进行了系统的分离纯化，研究了它们的单糖组成，分子量及理化性质，并对获得的多糖级分的结构特征进行了初步的探索。干燥的玫瑰蜂花粉经过热水提取、乙醇沉淀得到水溶性总多糖WRPP（产率7.8 %）。单糖组成结果为Man：Rha：GlcA：GalA：Glc：Gal：Ara= 2.6：3.4：1：12.1：11.6：21.4：47.9。WRPP经过DEAE-Cellulose柱层析分级，得到一个中性糖级分WRPP-N和两个酸性糖级分WRPP-1、WRPP-2。分别对这三个级分进行了总糖含量、糖醛酸含量、分子量、分子筛层析及单糖组成的测定。WRPP-N为分子量较小的中性糖级分，由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖和甘露糖组成，比例为Glc：Gal：Ara：Man=34.3: 25: 36.7: 4。推测主要由阿拉伯半乳聚糖和葡聚糖组成。WRPP-1是含有RG-I型结构域的酸性果胶级分，主要由半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖及半乳糖醛酸组成，比例为Gal：Ara：Rha：GalA=24.7: 53.9: 3: 12.4，推测核心区域为I型聚鼠李半乳糖醛酸（RG-I）和聚半乳糖醛酸(HG)，阿拉伯半乳聚糖作为侧链存在。WRPP-1分子量分布较广，在Sepharose CL-6B凝胶层析柱上呈现较宽的峰，主要集中在2.2×10~5Da区域，半乳糖和阿拉伯糖含量和占总糖的70%以上。WRPP-2主要由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成，单糖组成比例为Rha：GalA：Gal：Ara=7.8: 23: 15: 48.7。其中半乳糖醛酸的比例占总糖的20%，而鼠李糖占7.8%，因此可以推测在WRPP-2中，除了含有RG-I型果胶结构域，还含有较多的HG型果胶结构域。阿拉伯糖和半乳糖的含量占总糖的60%以上，推测WRPP-2中侧链主要由阿拉伯半乳聚糖和阿拉伯聚糖组成。WRPP-2分子量较大，主要由分子量为5.0×105Da和2.5×10~4Da两种混合多糖组成。根据单糖组成和分子筛层析结果分析，该级分以RG-I和HG为主链，阿拉伯半乳聚糖为侧链的果胶类多糖。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-6
中英文对照及英文缩写词表  6-9
第一章引言  9-19
  1 多糖的研究进展  9-10
    1.1 糖类的研究历史  9-10
    1.2 多糖的概念及分类  10
  2 植物多糖的研究进展  10-15
    2.1 植物多糖的分离纯化及结构分析  10-13
    2.2 植物多糖的生物活性研究  13-15
  3 玫瑰蜂花粉的研究进展  15-18
    3.1 蜂花粉的有效成分  15-17
    3.2 蜂花粉的生物活性  17-18
  4 论文的选题依据、目的、意义和研究内容  18-19
第二章结果和讨论  19-26
  1 玫瑰蜂花粉多糖WRPP 的研究  19-20
    1.1 WRPP 的提取分离  19
    1.2 WRPP 的理化性质  19
    1.3 WRPP 的单糖组成分析  19-20
  2 WRPP 的分级纯化  20-25
    2.1 WRPP 的系统分级流程  20-21
    2.2 WRPP-N 的理化性质分析  21-22
    2.3 WRPP-1 的理化性质分析  22-23
    2.4 WRPP-2 的理化性质分析  23
    2.5 糖含量及糖醛酸含量的测定  23-25
  3 结果及讨论  25-26
第三章实验方法  26-31
  1 实验材料及设备  26-27
    1.1 实验材料  26
    1.2 试剂  26
    1.3 仪器  26-27
  2 实验方案  27-29
    2.1 玫瑰蜂花粉多糖的提取  27-28
    2.2 玫瑰蜂花粉多糖的分离纯化  28-29
  3 一般方法  29-30
    3.1 常规干燥  29-30
    3.2 冰冻干燥  30
    3.3 透析  30
  4 多糖的分离纯化方法  30-31
    4.1 离子交换柱层析  30
    4.2 凝胶柱层析  30-31
参考文献  31-35
致谢  35

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