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肠杆菌科细菌质粒介导β-内酰胺类抗生素耐药性研究

作　者: 贺靖冬
导　师: 陈锦英
学　校: 天津医科大学
专　业: 病原微生物
关键词: 肠杆菌科细菌 β-内酰胺酶超广谱β内酰胺酶 AmpC酶质粒基因分型
分类号: R378.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 87次
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内容摘要

[目的]研究肠杆菌科细菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及质粒介导AmpC酶菌株的分布。[方法]收集天津胸科医院2004年临床分离肠杆菌科细菌396株,以K-B法测定细菌对抗生素的敏感性;以NCCLS推荐纸片确证试验检测其产ESBLs情况,以头孢西丁试验粗筛产AmpC酶菌。以细菌接合试验辅助耐药基因的定位。提取质粒DNA作模板,采用聚合酶链反应(PCR)和多重PCR方法及序列分析确定ESBLs及质粒介导AmpC酶的基因型[结果]396株肠杆菌科细菌对氨苄西林耐药率高达91.4%,一、二代头孢菌素耐药率高于40%,三代头孢菌素中头孢噻肟耐药率达25.70%,庆大霉素耐药率达26.5%,环丙沙星耐药率达23.2%,复方磺胺耐药率达31.8%,三耐以上的多重耐药菌株达71.2%。其中产ESBLs菌株检出率为25.0%(99/396),疑似产AmpC酶菌株检出率为16.9%(67/396);产ESBLs菌株除对亚胺陪南仍保持较好的敏感性(99.0%)以外,对其他抗生素耐药率均高于40%,青霉素类和一、二代头孢菌素耐药率均为100%,三代头孢菌素中头孢噻肟耐药性最高,达79.6%。产ESBLs菌株接合试验阳性率为40.4%(40/99),疑似产AmpC酶菌株接合试验阳性率为10.4%(7/67),接合子药敏试验证实供体菌的耐药标誌部分或全部传递给受体菌;以40株接合试验阳性的产ESBLs菌株的质粒DNA为模板用PCR方法进行基因分型,结果显示TEM、SHV、CTX-M阳性率分别为50.0%、20.0%和67.5%,产2种型别ESBLs的菌株达61.3%;对7株接合试验阳性疑似产AmpC酶菌株提取其质粒DNA为模板,用PCR方法进行基因分型,结果有4株为DHA型阳性,其中2株菌同时产ESBLs,高度疑似为产超超广谱β-内酰胺酶(SSBL)菌株。随机抽取5株ESBLs扩增阳性的PCR产物进行序列分析,其结果证实2株TEM型扩增产物均属TEM-1型,经NCBI基因库查询和BLASTn比对,与奇异变形杆菌(AY729027)注册的相应序列的核

全文目录

英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-8
前言  8-10
材料与方法  10-17
结果  17-29
讨论  29-33
小结  33-34
参考文献  34-39
序列比对图  39-49
致谢  49

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