学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

uPAR反义RNA表达质粒对大鼠RA滑膜ECM影响的初步研究

作　者: 方继锋
导　师: 董金波
学　校: 石河子大学
专　业: 外科学
关键词: 质粒胶原型大鼠基因治疗细胞外基质尿激酶型纤溶酶原激活剂受体
分类号: R593.22
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 4次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:探讨反义uPAR/pcDNA3.1(-)真核表达质粒对胶原型大鼠滑膜细胞外基质的影响。材料与方法:1. pcDNA3.1(-)质粒及反义uPAR/pcDNA3.1(-)质粒:采用碱裂解法从细菌保存液中大量抽提pcDNA3.1(-)质粒及反义uPAR/pcDNA3.1(-)质粒。2. Wistar雌性大鼠50只,随机分为5组,每组10只,为正常对照组、造模对照组、生理盐水治疗组、空质粒治疗组、重组质粒治疗。正常对照组不做任何处理,其余4组建立Ⅱ型胶原诱导的大鼠类风湿性关节炎(CIA)模型,15日后,生理盐水治疗组、空质粒治疗组、重组质粒治疗组,左踝关节内分别注射生理盐水、pcDNA3.1 (-)质粒及反义uPAR/pcDNA3.1(-)质粒注射各50ul。3.结果观察:观察大鼠的一般情况、关节炎指数,病理变化及免疫组化法检测踝关节滑膜uPAR、MMP-3的表达。结果:1.回收质粒DNA抽提质粒后1%琼脂糖凝胶电泳,在DNA Marker 5400 bp附近可见明显条带,与目的片段大小相符,用全自动紫外分光光度计作浓度、纯度测定,经测定质粒浓度510ng/ul、500ng/ul、质粒DNA OD=260/280,在1.9-2.0之间。2.随着CIA免疫时间的延长,造模对照组、生理盐水治疗组、空质粒治疗组关节炎指数评分渐增加迅速,而重组质粒治疗组关节炎指数评分增加缓慢;与正常对照组比较,模型组大鼠滑膜,滑膜轻度增厚,滑膜新生血管开始增多,大量炎性细胞浸润、增生。3.免疫组化显示:uPAR的表达:正常组大鼠滑膜组织中无表达,模型对照组、生理盐水组及空质粒组之间无差异(p>0.05),模型对照组、生理盐水组、空质粒组与重组质粒治疗组之间有显著差异(p<0.01);MMP-3的表达:正常大鼠滑膜组织中无表达,,模型对照组、生理盐水组及空质粒组之间无差异(p>0.05),模型对照组与重组质粒治疗组之间有显著差异(p<0.01)。滑膜组织中uPAR、MMP-3相关性分析呈正相关(r=0.604,P<0.01)。结论:1. uPAR/pcDNA3.1(-)表达质粒能抑制滑膜组织中uPAR的表达。2. uPAR/pcDNA3.1(-)表达质粒能抑制滑膜组织中MMP-3的表达及大鼠细胞外基质的降解,为类风湿关节炎的治疗提供理论依据。

全文目录

中文摘要  6-7
英文摘要  7-8
缩略词表  8-9
前言  9-11
第一部分大量反义uPAR/pcDNA3.1(-)质粒和pcDNA3.1(-)质粒的抽提  11-15
  材料与方法  11-13
  结果  13-14
  讨论  14-15
第二部分各实验动物滑膜组织中uPAR、MMP-3蛋白质表达  15-32
  材料和方法  15-19
  结果  19-27
  讨论  27-32
结论  32-33
参考文献  33-36
综述  36-41
  参考文献  39-41
致谢  41-42
作者简介  42-43
导师评语  43

uPAR反义RNA表达质粒对大鼠RA滑膜ECM影响的初步研究

内容摘要

全文目录

相似论文