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产ESBLs大肠埃希菌的耐药性及其基因型与疾病相关性研究

作　者: 赵卫东
导　师: 张群智
学　校: 大理学院
专　业: 病原生物学
关键词: 大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶 blaCTX-M 耐药胜感染性疾病
分类号: R446.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：研究大理地区大肠埃希菌的临床分离情况,超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出率及blaCTX-M基因的分子流行病学,分析并探讨产ESBLs大肠埃希菌的耐药性及其所致的感染性疾病,指导临床应用抗生素。方法：1.ESBLs检测：采用美国临床与实验标准化研究所(CLSI)推荐的方法,对所有的大肠埃希菌进行ESBLs确证试验,确证试验采用纸片扩散(K-B)法。2.分子生物学检测：用聚合酶链反应(PCR)检测所有产ESBLs大肠埃希菌的blaCTX-M-1和blaCTX-M-9基因,随机选取CTX-M-1型和CTX-M-9型基因阳性菌株各5株送至生物公司进行测序。3.药物敏感试验：用微量肉汤稀释法测定产ESBLs大肠埃希菌对10种抗生素的MIC值,分析其耐药性。4.所致感染性疾病：查阅临床病历资料,回顾性分析产ESBLs大肠埃希菌的临床分布与所致感染性疾病的关系。结果：1.三所医院共收集到大肠埃希菌213株,其中A医院89株,B医院54株,C医院70株。2.PCR初步分型结果显示,CTX-M阳性ESBLs大肠埃希菌有71株,其中CTX-M-1组和CTX-M-9组阳性菌株分别为30株和45株,阳性率分别为31.9%和47.9%,同时携带CTX-M1和CTX-M9基因的菌株有4株,占4.3%。3.分离到产ESBLs(?)大肠埃希菌94株,检测率为44.1%。ESBLs阳性株的耐药率明显高于ESBLs阴性株,并且产酶株多为多重耐药,其中产酶株对亚胺培南均敏感,对氨苄西林、氨曲南、头孢西丁、头孢吡肟、环内沙星和头孢噻肟耐药率较高,而对头孢他啶、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低。4.通过病例回顾性分析,CTX-M型ESBLs大肠埃希菌主要分离自痰液和尿液标本,主要引起呼吸系统和泌尿系统感染性疾病。结论：1.大肠埃希菌是肠道正常菌群,本次试验的菌株主要来源于痰和尿液标本,说明大肠埃希菌是条件致病菌,可以引起移位感染。2. CTX-M型产超广谱β内酰胺酶的大肠埃希菌的耐药性明显高于非产酶株。CTX-M型菌株除对亚胺培南敏感外,对其他抗生素均有不同程度耐药。3.三所医院CTX-M型产超广谱β内酰胺酶的大肠埃希菌检出率为44.1%。4.从PCR结果可以看出,CTX-M 1组和CTX-M9组基因在三所医院内都有流行,并且还发现有4株细菌同时携带有以上两种基因。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-8
英汉缩略语名词对照  8-9
前言  9-10
第一部分大肠埃希菌ESBLs检测  10-15
  1 材料与方法  10-13
  2 结果  13-14
  3 讨论  14-15
第二部分产ESBLs大肠埃希菌CTX-M型基因PCR扩增  15-25
  1 材料和方法  15-17
  2 产ESBLs菌株质粒提取  17
  3 PCR扩增反应体系及循环参数  17-18
  4 PCR扩增产物结果观察  18
  5 结果  18-24
  6 讨论  24-25
第三部分产ESBLs大肠埃希菌CTX-M基因测序分析  25-28
  1 材料和方法  25-27
  2 结果  27-28
  3 讨论  28
第四部分大肠埃希菌的耐药性分析  28-34
  1 材料和方法  28-31
  2 结果  31-33
  3 讨论  33-34
第五部分产ESBLs大肠埃希菌所致感染性疾病的分析  34-37
  1 材料和方法  34-35
  2 结果  35-36
  3 讨论  36-37
小结  37-39
参考文献  39-45
  附录1:blaCTX-M1耐药基因序列  43
  附录2:blaCTX-M9耐药基因序列  43-44
  附录3:DNA测序结果附图  44-45
文献综述  45-52
  参考文献  49-52
致谢  52-53
硕士期间发表的论文  53-54
附件  54-56

产ESBLs大肠埃希菌的耐药性及其基因型与疾病相关性研究

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