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耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的药物敏感性与耐药机制研究

作　者: 阳志勇
导　师: 胡四海
学　校: 南华大学
专　业: 病原生物学
关键词: 铜绿假单胞菌碳青霉烯类抗生素耐药性金属β-内酰胺酶多药外排泵
分类号: R446.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:检测耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌临床株在各类标本中的分布及对12种抗菌药物的敏感性,并进行同源性分析,为临床合理使用抗生素和控制铜绿假单胞菌感染提供指导;对耐碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌进行金属β-内酰胺酶的筛选和外排泵抑制试验,初步探讨铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法:根据美国国家临床实验室标准委员会(CLSI)标准,用纸片法筛选出碳青霉烯类耐药株,应用琼脂稀释法检测耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌对12种抗菌药物的敏感性,并采用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)对碳青霉烯类耐药株进行同源性分析;应用亚胺培南-乙二胺四乙酸纸片增敏协同试验筛选出产金属β-内酰胺酶的菌株,以及外排泵抑制试验对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的外排泵进行检测,初步探讨铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶与外排泵表达对碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。结果:(1)铜绿假单胞菌的感染率与对碳青霉烯类抗生素的耐药率:在各类临床标本中铜绿假单胞菌的感染率为18.1%,仅次于大肠埃希菌,其中对碳青霉烯类抗生素的耐药率为43.9%。(2)耐药菌株来源及分布:分离的75株碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌临床株,分别来自痰液(57.3%)、伤口分泌物(22.7%)、脓液(6.7%)和其他感染标本(13.3%);主要分布于重症监护病房和神经外科等病室。(3)对抗生素的敏感性:75株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌具有三种耐药模式:亚胺培南和美罗培南均耐药(IMI~RMERO~R)、亚胺培南耐药而美罗培南敏感(IMIRMEROS)、亚胺培南敏感而美罗培南耐药(IMI~SMERO~R)。该75株铜绿假单胞菌对12种抗菌药物的耐药率从低到高依次为:多粘菌素E<环丙沙星<阿米卡星<头孢吡肟<妥布霉素<庆大霉素<美罗培南<头孢他啶<哌拉西林/三唑巴坦<亚胺培南<复方新诺明<氨苄西林/舒巴坦。(4)同源性分析:通过ERIC-PCR分析75株耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌的同源性,研究结果显示一共具有8个型别,其中以A型和B型为主,分别占34.7%(26株)和22.7%(17株)。(5)金属β-内酰胺酶检测:亚胺培南-乙二胺四乙酸纸片增敏协同试验检测金属β-内酰胺酶,在75株耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌中,有13株铜绿假单胞菌菌株为金属β-内酰胺酶阳性,占17.3%。(6)外排泵检测:结果显示外排泵抑制剂MC207110可以使34株美罗培南耐药株的美罗培南MIC值较单药(未加抑制剂)时降低4倍或以上,占63.0%(34/54)。结论:(1)铜绿假单胞菌在医院内感染病原菌中占有重要地位,仅次于大肠埃希菌;对亚胺培南和美罗培南等碳青霉烯类抗生素的耐药性已呈现日趋严重的态势。(2)铜绿假单胞菌感染的标本以呼吸道痰液为主,病区主要集中在重症监护病房和神经外科等病室。(3)药敏结果提示,在严重的碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌感染的患者治疗中,多粘菌素E是一个很有应用前景的备选药物,其次为环丙沙星。(4)本院分离的耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(主要来自湘南地区)经过同源性分析,主要以A型和B型为主。(5)产金属β-内酰胺酶可能是导致铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的原因之一。(6)铜绿假单胞菌可能存在外排泵等多重耐药外排系统。

全文目录

主要英文缩略语索引  4-6
中文摘要（Chinese Abstract）  6-9
英文摘要（English Abstract）  9-12
引言（Introduction）  12-15
实验材料（Materials）  15-18
实验方法(Method)  18-22
实验结果(Results)  22-29
讨论(Discussion)  29-32
结论(Conclusion)  32-33
参考文献(References)  33-37
综述(Reviews)  37-43
  参考文献  40-43
成果目录（Achievements）  43-44
致谢(Acknowledgements)  44

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的药物敏感性与耐药机制研究

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