学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

人Tum-5基因重组逆转录病毒载体系统的建立与分析

作　者: 罗红
导　师: 盖晓东
学　校: 北华大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: Tum-5基因 pLXSN 基因治疗 抗血管生成 逆转录病毒载体
分类号: R346
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 11次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的:构建携带人肿瘤抑素基因(Tumstatin)抗血管生成活性片段Tum-5基因的重组逆转录病毒载体,使用包装细胞PA317将其包装成假病毒颗粒,并用NIH3T3细胞对其进行检测分析。方法:用Trizol试剂从胎肾组织中提取总RNA,用RT-PCR法扩增Tum-5片段,并将扩增片段定向克隆到逆转录病毒质粒pLXSN的MCS。将获得的重组质粒利用电穿孔方法转染PA317细胞,经G418筛选阳性克隆并扩增培养,收集其产生的含Tum-5的假病毒颗粒,用NIH3T3检测其病毒滴度及安全性。结果:用RT-PCR方法获得了255bp的Tum-5基因序列(含酶切位点),并将其成功的定向克隆到逆转录病毒质粒pLXSN,测序结果表明克隆出的基因序列与Gene Bank中所提供的Tum-5基因序列完全一致。RT-PCR证实,转染后的PA317、NIH3T3细胞中存在人Tum-5特异性片段,病毒滴度为2.05×104cfu/ml,并且没有对NIH3T3细胞造成二次感染。结论:成功的构建了携带人Tum-5基因的逆转录病毒载体系统,并对其性状及疗效进行了相关检测,为肿瘤的抗血管生成治疗以及血管依赖性疾病的基因治疗提供了一种全新的、有效的、安全的外源性基因导入的途径。

全文目录


中文摘要  3-4
Abstract  4-7
序论  7-12
本论  12-40
  1 材料与方法  12-24
    1.1 实验材料  12-16
    1.2 实验方法  16-24
  2 实验结果  24-31
  3 讨论  31-39
  4 结论  39-40
参考文献  40-45
综述  45-61
  综述参考文献  57-61
英文缩略词表  61-63
致谢  63

相似论文

  1. 聚乙烯亚胺修饰糖脂共聚物介导基因治疗研究,R450
  2. 新型非病毒基因转染体系的构建及其在骨髓间充质干细胞基因重组中的应用,R346
  3. 环磷酰胺LDM联合MTD在乳腺癌抗血管生成、诱导凋亡方面的研究,R737.9
  4. Ad-ING4-IL-24双基因共表达对肺癌的抑癌增效和化疗增敏的体外实验研究,R734.2
  5. 携带hIL12-p40-L△p35的双靶向溶瘤腺病毒联合CIK细胞的抗癌作用研究,R730.5
  6. 选择复制性腺病毒M4对卵巢癌细胞系体外治疗作用及机制的初步探讨,R737.31
  7. 东方田鼠抗日本血吸虫相关基因KPNA2重组逆转录病毒载体的构建和病毒制备,S855.99
  8. 胰高血糖素样肽-1及其类似物基因治疗糖尿病的研究,R587.1
  9. 人皮肤成纤维细胞诱导多潜能干细胞的研究,R329
  10. IL-15基因治疗小鼠结肠癌的实验研究,R735.35
  11. 缺氧诱导因子-1α的siRNA抑制肝癌细胞生长的实验研究,R735.7
  12. uPAR反义RNA表达质粒对大鼠RA滑膜ECM影响的初步研究,R593.22
  13. 基于拉曼光谱技术的抗血管生成药物对血管与组织损伤的研究,R730.5
  14. 靶向性泛素化降解胰岛素样生长因子受体和胰岛素受体的肿瘤基因治疗策略,R730.5
  15. 5-氟胞嘧啶热化疗对鼠结肠癌肝转移治疗机理研究,R735.3
  16. 逆转录病毒载体介导的人溶菌酶基因在乳腺细胞的表达,Q78
  17. 内皮抑素基因治疗裸鼠子宫内膜异位症模型对Ang-2、Tie-2及MVD的影响,R711.71
  18. 鱼藤素抗血管生成作用评价及延缓胚胎发育机制研究,R285
  19. 人前脑啡肽基因修饰的人骨髓间充质干细胞系的构建及其生物学特性的实验研究,R402
  20. 新一代肿瘤条件复制腺病毒构建及其喉癌生物治疗研究,R739.65

中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体生物化学、分子生物学
© 2012 www.xueweilunwen.com