学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

东方田鼠抗日本血吸虫相关基因KPNA2重组逆转录病毒载体的构建和病毒制备

作　者: 盖楠
导　师: 胡维新
学　校: 中南大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 东方田鼠 KPNA2 逆转录病毒载体 日本血吸虫
分类号: S855.99
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 4次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


日本血吸虫病是危害严重的人兽共患寄生虫病.其寄生的哺乳动物繁多,但无论野生的东方田鼠还是室内繁殖的东方田鼠均对日本血吸虫具有天然抗性,且这种抗性可稳定遗传。东方田鼠的这种特性,为抗日本血吸虫病的研究提供了新的思路。在前期研究中,我们构建了东方田鼠骨髓cDNA文库,应用表达克隆法将文库cDNA与瞬时表达载体pcDNA1.1构建成重组质粒,转染HEK293 T细胞,筛选出一个对日本血吸虫童虫具有较高杀伤率的次级亚基因池gE76,并从次级亚基因池gE76中筛选到对血吸虫具有抗性的候选基因gE76.44。生物信息学分析表明,E76.44是KPNA2的同源基因,属于importinα基因家族。为了进一步确认Mf-KPNA2的抗日本血吸虫活性,本研究应用逆转录病毒载体pLXSN,建立pLXSN-KPNA2重组逆转录病毒载体系统,pLXSN-KPNA2重组病毒载体通过磷酸钙转染法导入PA317细胞后,包装出pLXSN-KPNA2重组病毒,释放到培养基中,收集这些培养基,运用超速离心的方法进行浓缩,测定病毒滴度。本实验成功构建了pLXSN-KPNA2重组病毒载体,连同空载体pLXSN分别转染PA317细胞,通过鉴定得到阳性克隆,收集到足够的病毒,并进行了浓缩和滴度测定,可用于下一步的动物实验。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
目录  7-8
英文缩写词简表  8-9
前言  9-13
技术路线  13-14
第一章 东方田鼠抗日本血吸虫相关基因KPNA2的逆转录载体构建  14-24
  1.1 材料  14-15
  1.2 方法  15-19
  1.3 结果  19-23
  1.4 讨论  23-24
第二章 pLXSN-KPNA2重组病毒的包装、浓缩和滴度测定  24-33
  2.1 材料方法  24-25
  2.2 方法  25-29
  2.3 结果  29-32
  2.4 讨论  32-33
结论  33-34
参考文献  34-36
综述  36-44
  参考文献  41-44
致谢  44-45
攻读学位期间主要研究成果  45

相似论文

  1. 日本血吸虫硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶（SjTGR）的克隆、表达及免疫保护效果的初步评估,R392
  2. 日本血吸虫DNA疫苗在小鼠体内的代谢及时空表规律研究,S855.91
  3. 东方田鼠线粒体基因组序列及Y染色体部分序列的测定及分析,Q953
  4. 高山血吸虫病流行区钉螺空间分布及灭螺方法研究,R184
  5. 构建日本血吸虫抗原Sj23的毕赤酵母和转基因紫花苜蓿表达系统,Q943.2
  6. 人Tum-5基因重组逆转录病毒载体系统的建立与分析,R346
  7. 18日龄日本血吸虫酵母双杂交cDNA文库的构建及抱雌沟蛋白相互作用因子的筛选,S852.735
  8. 日本血吸虫TβRII基因全长cDNA的克隆及其胞外段免疫保护功能的研究,R392.11
  9. 稳定表达C/EBPα基因的Raji细胞株的建立及其生物学活性研究,R733.7
  10. 东方田鼠CYP2E1基因表达载体的构建及转基因研究,Q78
  11. 东方田鼠抗日本血吸虫相关基因E77.43部分编码序列的克隆及多克隆抗体的制备,Q78
  12. 日本血吸虫Argonaute蛋白的初步研究,S852.7
  13. 日本血吸虫SJCHGC06868蛋白的研究,R383.2
  14. 日本血吸虫鞘脂激活蛋白样蛋白的基因克隆、表达及相关免疫生物学特性的研究,R392
  15. 中国大陆日本血吸虫不同地理株对吡喹酮敏感性比较及其蛋白质组学差异分析,R383
  16. 逆转录病毒载体介导的人溶菌酶基因在乳腺细胞的表达,Q78
  17. 东方田鼠非酒精性脂肪肝模型的建立及研究,R575.5
  18. 分子嵌合MHC-I基因小鼠骨髓造血干细胞模型的建立及体外实验研究,R392
  19. NFBD1在宫颈癌标本中的表达及其shRNA逆转录病毒载体的构建,R737.33
  20. 人前脑啡肽基因修饰的人骨髓间充质干细胞系的构建及其生物学特性的实验研究,R402

中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医寄生虫病学 > 人畜共患病
© 2012 www.xueweilunwen.com