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缺氧调控滋养细胞MMP-9/TIMP-1表达的体外研究

作　者: 张雅琪
导　师: 乔福元
学　校: 华中科技大学
专　业: 妇产科
关键词: 滋养细胞缺氧 MMP-9 TIMP-1 妊娠期高血压疾病侵袭力细胞爬片 MTT 荧光定量PCR
分类号: R714.245
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

研究背景:子宫螺旋动脉重铸失败和胎盘浅着床是导致子痫前期的病理生理特点之一。正常的滋养细胞侵入蜕膜、肌层及血管,逐步取代螺旋动脉血管内皮细胞,深入血管壁,降解血管平滑肌及弹力纤维导至血管腔扩大,血流阻力的下降和血流量增加,这一过程称为“血管重铸”。这一生理性的过程与滋养细胞的侵袭力有着密切的关系。滋养细胞的侵袭力主要是由于滋养细胞具有分泌基质金属蛋白酶(MMPS)的能力,而基质金属蛋白酶抑制物(TIMPS)在细胞外基质中能特异性的抑制这种侵袭力。在正常妊娠中,MMPs与TIMPs能够协调的表达,一旦MMPs和TIMPs调控失衡就可能会引起细胞滋养细胞侵袭力异常,其中以MMP-9和TIMP-1的作用最为明显且被研究的最多,如两者调节异常导致侵袭力不足,则可能发生妊娠期高血压疾病。滋养细胞的浸润能力还与胎盘局部氧含量密切相关,低氧可以抑制滋养细胞对子宫内膜的浸润,导致侵润过浅,并使胎盘血管重铸障碍,从而导致妊娠期高血压疾病的发生。目前研究表明,缺氧可导致肿瘤细胞中MMP-9/TIMP-1的表达增高,但在滋养细胞中研究较少,其具体机制还在研究中。研究目的:探讨在化学缺氧条件下滋养细胞的增殖和MMP-9以及特异性抑制物TIMP-1的表达。研究方法:①用MTT法检测滋养细胞在正常条件以及不同浓度cocl2致缺氧条件下的增殖。②用细胞免疫组化检测MMP-9/TIMP-1在滋养细胞中的定位和表达。③荧光定量PCR检测缺氧条件下滋养细胞中MMP-9和TIMP-1的表达。结果:①滋养细胞在cocl2浓度分别为150umol/L和300umol/L时的细胞增殖明显受到抑制,且在300umol/L时抑制作用更为明显,差异有统计学意义(p<0.01),这说明缺氧可抑制滋养细胞的增殖,且浓度越高抑制作用越明显。②MMP-9和TIMP-1均表达在滋养细胞的包膜和胞浆,且在缺氧条件下MMP-9和TIMP-1的蛋白表达是增加的。③MMP-9和TIMP-1在缺氧条件下表达增加,且均在缺氧48h时最为显著,差异有显著性意义(p<0.01)。MMP-9/TIMP-1比值降低,在72h最为显著。(p<0.01)。这说明在缺氧条件下MMP-9和TIMP-1的表达式增加的,但TIMP-1增加的幅度更大导致MMP-9/TIMP-1比值降低,使滋养细胞侵袭力降低。结论:缺氧能够促进滋养细胞分泌MMP-9和TIMP-1,但MMP-9/TIMP-1比值降低,使滋养细胞的侵袭力减弱。

全文目录

中文摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-14
  参考文献  12-14
第一部分缺氧对滋养细胞增殖的影响  14-21
  材料和方法  14-16
  结果  16-17
  讨论  17-20
  参考文献  20-21
第二部分缺氧条件下 MMP-9 和 TIMP1 在滋养细胞中的表达  21-39
  材料和方法  21-28
  结果  28-34
  讨论  34-37
  参考文献  37-39
综述  39-47
  参考文献  44-47
致谢  47-48

缺氧调控滋养细胞MMP-9/TIMP-1表达的体外研究

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