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氨海水与5-羟色胺对栉孔扇贝解剖卵体外促熟作用的研究

作　者: 邸炜鹏
导　师: 王昭萍
学　校: 中国海洋大学
专　业: 水产养殖
关键词: 栉孔扇贝体外成熟氨海水 5-羟色胺
分类号: S917.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 23次
引　用: 1次
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内容摘要

本文以栉孔扇贝(Chlamys farreri)为研究对象,研究了氨海水和5-羟色胺对其解剖卵的体外促熟作用。研究中探索了氨海水与5-羟色胺的最佳促熟条件,对体外促熟的受精卵进行了培育和观察,对处理液pH值条件进行了研究,并通过荧光显微技术观察了卵母细胞成熟前后核型态的变化,以期为贝类人工受精开辟一条新的途径,为贝类育种研究提供支持。研究中,通过氨海水和5-羟色胺体外浸泡的方法处理栉孔扇贝卵母细胞使其成熟,并完成人工受精。结果表明：一定浓度的氨海水可显著促使栉孔扇贝卵母细胞生发泡破裂,但经过氨处理的卵母细胞受精率却不高,且存在大量畸形；5-羟色胺不能诱导栉孔扇贝卵母细胞生发泡破裂,但可有效地使已经发生生发泡破裂的卵母细胞进一步成熟。两种试剂混合处理效果稍好于单独处理,但表现出一定的相互抑制。而先用氨海水处理然后用5-羟色胺处理可以得到最佳诱导效果,受精率可达(40.02±2.73)%。对幼虫孵化的研究表明：体外促熟处理的受精卵发育比诱导排卵滞后。混合处理孵化率仅为(16.98±1.66)%,且畸形率偏高(38.62±5.05)%,幼虫高和长也较小。最佳处理条件下幼虫孵化率达到(47.69±1.31)%,低于相同情况下诱导排卵孵化率(85.55±1.34)%,但畸形较少,石蜡切片观察发现幼虫器官已经开始分化。对处理液pH值的研究表明：卵母细胞成熟需要偏碱性的环境,但是pH不是其成熟的决定因素,NH4+起到了关键的作用。对卵母细胞成熟前后的荧光显微观察表明：诱导排卵的卵母细胞基本都处于第一次减数分裂中期,而体外促熟的卵母细胞只有部分处于第一次减数分裂中期,另一部分阻滞于前期与中期之间,这种阻滞很可能需要激活才能完成减数分裂,5-羟色胺可能正是起到这种这种作用。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-10
0 前言  10-11
1 文献综述  11-24
  1.1 贝类获得精卵的方法  11-20
    1.1.1 贝类人工诱导排放精卵的方法  11-15
    1.1.2 贝类通过解剖获得精卵  15-18
    1.1.3 精子的激活  18-19
    1.1.4 获得精卵方法的比较  19-20
  1.2 卵子体外成熟的研究  20-23
    1.2.1 卵母细胞体外成熟的生理过程  20
    1.2.2 卵母细胞成熟动力  20-21
    1.2.3 卵母细胞体外成熟的调控  21-23
  1.3 体外促熟在育种中的应用  23-24
2 栉孔扇贝解剖卵体外促熟最佳条件的研究  24-48
  2.1 氨海水对栉孔扇贝解剖卵的促熟作用  25-34
    2.1.1 材料与方法  25-27
    2.1.2 结果  27-30
    2.1.3 讨论  30-34
  2.2 5-羟色胺对栉孔扇贝解剖卵的促熟作用  34-40
    2.2.1 材料与方法  34-35
    2.2.2 结果  35-37
    2.2.3 讨论  37-40
  2.3 氨海水与5-HT联合处理对栉孔扇贝解剖卵的促熟作用  40-48
    2.3.1 材料与方法  40-41
    2.3.2 结果  41-45
    2.3.3 讨论  45-48
3 栉孔扇贝解剖卵幼虫发生的研究  48-55
  3.1 材料与方法  48-50
  3.2 结果  50-53
  3.3 讨论  53-55
4 栉孔扇贝解剖卵体外促熟的相关研究  55-64
  4.1 处理液的pH值与其促熟作用的相关性  55-59
    4.1.1 材料与方法  56
    4.1.2 结果  56-57
    4.1.3 讨论  57-59
  4.2 栉孔扇贝解剖卵促熟前后的荧光观察  59-64
    4.2.1 材料与方法  59-60
    4.2.2 结果  60-62
    4.2.3 讨论  62-64
参考文献  64-74
致谢  74

氨海水与5-羟色胺对栉孔扇贝解剖卵体外促熟作用的研究

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