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EGF对不同直径卵泡绵羊卵母细胞体外成熟、受精及胚胎发育的影响

作 者: 郭延华
导 师: 石国庆
学 校: 石河子大学
专 业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 表皮生长因子 绵羊卵母细胞 体外成熟 胞质成熟 核型 囊胚率
分类号: S826
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 11次
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内容摘要


为了研究EGF对绵羊不同直径卵泡卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响,通过9个系列试验,比较不同直径卵泡特征,卵母细胞的质量、核型、成熟率和早期胚胎发育能力,并在成熟液和发育液中添加100ng/m1EGF,通过成熟率、胚胎发育能力及囊胚细胞总数,研究EGF对不同直径卵泡卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响。1.新采集方法-刺剖法能明显提高绵羊采卵数量,且卵泡直径越大,卵母细胞的A、B级比例也越高。2.LH、E2的同一种工作浓度在不同季节对绵羊卵母细胞的成熟率是不同的。3.卵泡直径越大,卵母细胞的成熟率也越高,且成熟受精后,胚胎发育能力也正常。4.EGF对生发泡破裂(GVBD)具有积极的影响,通过卵母细胞的促成熟作用明显改善胚胎发育率,尤其是偏势卵泡卵母细胞形成的胚胎,胚胎培养液中添加EGF对囊胚细胞总数有积极的影响。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
英文缩写一览表  7-10
第一章 文献综述  10-25
  引言  10
  1. 腔前卵泡及卵母细胞的生长  10-11
  2 卵母细胞的成熟  11-14
    2.1 细胞核成熟  11-13
      2.1.1 细胞核成熟促进因子  11-12
      2.1.2 细胞核成熟抑制因子  12-13
    2.2 细胞质成熟  13-14
      2.2.1 卵泡细胞对卵母细胞质成熟的影响  13
      2.2.2 卵母细胞细胞器的成熟变化  13-14
  3 不同直径卵泡及卵子的差异性特征  14-19
    3.1 卵泡的划分  14-16
    3.2 促性腺激素对不同直径卵泡的作用机制及内分泌特征  16-19
      3.2.1 小腔卵泡内容物的促性腺激素作用机制  16-17
      3.2.2 闭锁卵泡直径的特征及闭锁调控机制  17-19
      3.2.3 优势卵泡直径及特征  19
  4. 哺乳动物不同直径卵泡卵母细胞的IVM、IVF、IVC  19-20
  5. 小结  20
  6. EGF在哺乳动物生殖调控中的作用及其研究进展  20-25
    6.1 EGF在哺乳动物卵母细胞及胚胎发育中的作用  20-22
    6.2 EGF的结构、分布、功能和受体  22-23
      6.2.1 EGF的结构与表达分布  22-23
      6.2.2 EGFR受体结构与活化  23
    6.3 EGF的调控  23-25
第二章 试验研究  25-47
  1. 材料和方法  25-32
    1.1 材料  25-26
      1.1.1 试验材料  25
      1.1.2 主要药品与试剂  25
      1.1.3 主要仪器设备  25
      1.1.4 试剂的配置  25-26
    1.2 试验方法  26-32
      1.2.1 卵巢的采集、运输、修剪及清洗  26
      1.2.2 绵羊卵巢卵泡表面直径与实际直径的测量  26-27
      1.2.3 绵羊卵母细胞的采集  27
      1.2.4 体外成熟  27
      1.2.5 绵羊卵母细胞体外成熟的观察  27-28
      1.2.6 绵羊卵母细胞直径及透明带厚度测量  28
      1.2.7 绵羊卵母细胞活力染色  28-29
      1.2.8 绵羊卵母细胞核成熟的染色  29-30
      1.2.9 绵羊成熟卵母细胞的体外受精  30
      1.2.10 受精卵母细胞体外培养  30-32
      1.2.11 囊胚的染色  32
  2 试验设计  32-33
    2.1 卵泡在卵巢皮质上的表面直径与实际直径的关系  32
    2.2 比较四组卵泡内卵母细胞直径和透明带直径的差异  32
    2.3 比较采集方法对绵羊卵母细胞数量的影响  32
    2.4 比较不同表面直径卵泡在卵巢表面的分布情况及卵母细胞的质量  32
    2.5 比较梯度LH、E2对绵羊卵母细胞成熟率的影响  32-33
    2.6 比较有效浓度EGF对不同直径卵泡卵母细胞成熟率的影响  33
    2.7 比较成熟添加EGF与否对后期受精胚胎发育的影响  33
    2.8 比较卵母细胞核成熟前后的变化及EGF的影响  33
    2.9 比较培养液添加EGF与否对囊胚细胞数的影响  33
    2.10 试验统计分析  33
  3 试验结果与分析  33-40
    3.1 卵泡在卵巢皮质上的表面直径与实际直径的关系  33-34
    3.2 比较四组卵泡内卵母细胞直径和透明带直径的差异  34
    3.3 比较采集方法对绵羊卵母细胞数量的影响  34
    3.4 比较不同表面直径卵泡在卵巢表面的分布情况及卵母细胞的质量  34-35
    3.5 比较两种浓度LH、E2对绵羊卵母细胞成熟率的影响  35-36
    3.6 比较浓度100NG/MLEGF对不同直径卵泡卵母细胞成熟率的影响  36-37
    3.7 比较成熟添加EGF与否对后期受精胚胎发育的影响  37-38
    3.8 比较卵母细胞核成熟前后的变化及EGF的影响  38-40
    3.9 比较发育液添加EGF与否对囊胚细胞数的影响  40
  4 讨论  40-46
    4.1 比较卵泡在卵巢皮质上的表面直径与实际直径的关系  40-41
    4.2 比较四组卵泡内卵母细胞直径和透明带直径的差异  41
    4.3 比较采集方法对绵羊卵母细胞数量的影响  41-42
    4.4 比较不同表面直径卵泡在卵巢表面的分布情况及卵母细胞的质量  42
    4.5 比较梯度LH、E_2对绵羊卵母细胞成熟率的影响  42-43
    4.6 比较浓度为100NG/MLEGF对不同直径卵泡卵母细胞成熟率的影响  43-44
    4.7 比较成熟添加EGF与否对后期受精胚胎发育的影响  44
    4.8 比较卵母细胞核成熟前后的变化及EGF的作用  44-45
    4.9 比较发育液添加EGF与否对囊胚细胞数的影响  45-46
  5. 结论  46
  6.创新点  46-47
参考文献  47-56
附录1  56
附录2  56-57
致谢  57-58
作者简历  58-59
导师评阅表  59

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 >
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