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EGF对不同直径卵泡绵羊卵母细胞体外成熟、受精及胚胎发育的影响
作 者: 郭延华
导 师: 石国庆
学 校: 石河子大学
专 业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 表皮生长因子 绵羊卵母细胞 体外成熟 胞质成熟 核型 囊胚率
分类号: S826
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
为了研究EGF对绵羊不同直径卵泡卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响,通过9个系列试验,比较不同直径卵泡特征,卵母细胞的质量、核型、成熟率和早期胚胎发育能力,并在成熟液和发育液中添加100ng/m1EGF,通过成熟率、胚胎发育能力及囊胚细胞总数,研究EGF对不同直径卵泡卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响。1.新采集方法-刺剖法能明显提高绵羊采卵数量,且卵泡直径越大,卵母细胞的A、B级比例也越高。2.LH、E2的同一种工作浓度在不同季节对绵羊卵母细胞的成熟率是不同的。3.卵泡直径越大,卵母细胞的成熟率也越高,且成熟受精后,胚胎发育能力也正常。4.EGF对生发泡破裂(GVBD)具有积极的影响,通过卵母细胞的促成熟作用明显改善胚胎发育率,尤其是偏势卵泡卵母细胞形成的胚胎,胚胎培养液中添加EGF对囊胚细胞总数有积极的影响。
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全文目录
摘要 5-6 ABSTRACT 6-7 英文缩写一览表 7-10 第一章 文献综述 10-25 引言 10 1. 腔前卵泡及卵母细胞的生长 10-11 2 卵母细胞的成熟 11-14 2.1 细胞核成熟 11-13 2.1.1 细胞核成熟促进因子 11-12 2.1.2 细胞核成熟抑制因子 12-13 2.2 细胞质成熟 13-14 2.2.1 卵泡细胞对卵母细胞质成熟的影响 13 2.2.2 卵母细胞细胞器的成熟变化 13-14 3 不同直径卵泡及卵子的差异性特征 14-19 3.1 卵泡的划分 14-16 3.2 促性腺激素对不同直径卵泡的作用机制及内分泌特征 16-19 3.2.1 小腔卵泡内容物的促性腺激素作用机制 16-17 3.2.2 闭锁卵泡直径的特征及闭锁调控机制 17-19 3.2.3 优势卵泡直径及特征 19 4. 哺乳动物不同直径卵泡卵母细胞的IVM、IVF、IVC 19-20 5. 小结 20 6. EGF在哺乳动物生殖调控中的作用及其研究进展 20-25 6.1 EGF在哺乳动物卵母细胞及胚胎发育中的作用 20-22 6.2 EGF的结构、分布、功能和受体 22-23 6.2.1 EGF的结构与表达分布 22-23 6.2.2 EGFR受体结构与活化 23 6.3 EGF的调控 23-25 第二章 试验研究 25-47 1. 材料和方法 25-32 1.1 材料 25-26 1.1.1 试验材料 25 1.1.2 主要药品与试剂 25 1.1.3 主要仪器设备 25 1.1.4 试剂的配置 25-26 1.2 试验方法 26-32 1.2.1 卵巢的采集、运输、修剪及清洗 26 1.2.2 绵羊卵巢卵泡表面直径与实际直径的测量 26-27 1.2.3 绵羊卵母细胞的采集 27 1.2.4 体外成熟 27 1.2.5 绵羊卵母细胞体外成熟的观察 27-28 1.2.6 绵羊卵母细胞直径及透明带厚度测量 28 1.2.7 绵羊卵母细胞活力染色 28-29 1.2.8 绵羊卵母细胞核成熟的染色 29-30 1.2.9 绵羊成熟卵母细胞的体外受精 30 1.2.10 受精卵母细胞体外培养 30-32 1.2.11 囊胚的染色 32 2 试验设计 32-33 2.1 卵泡在卵巢皮质上的表面直径与实际直径的关系 32 2.2 比较四组卵泡内卵母细胞直径和透明带直径的差异 32 2.3 比较采集方法对绵羊卵母细胞数量的影响 32 2.4 比较不同表面直径卵泡在卵巢表面的分布情况及卵母细胞的质量 32 2.5 比较梯度LH、E2对绵羊卵母细胞成熟率的影响 32-33 2.6 比较有效浓度EGF对不同直径卵泡卵母细胞成熟率的影响 33 2.7 比较成熟添加EGF与否对后期受精胚胎发育的影响 33 2.8 比较卵母细胞核成熟前后的变化及EGF的影响 33 2.9 比较培养液添加EGF与否对囊胚细胞数的影响 33 2.10 试验统计分析 33 3 试验结果与分析 33-40 3.1 卵泡在卵巢皮质上的表面直径与实际直径的关系 33-34 3.2 比较四组卵泡内卵母细胞直径和透明带直径的差异 34 3.3 比较采集方法对绵羊卵母细胞数量的影响 34 3.4 比较不同表面直径卵泡在卵巢表面的分布情况及卵母细胞的质量 34-35 3.5 比较两种浓度LH、E2对绵羊卵母细胞成熟率的影响 35-36 3.6 比较浓度100NG/MLEGF对不同直径卵泡卵母细胞成熟率的影响 36-37 3.7 比较成熟添加EGF与否对后期受精胚胎发育的影响 37-38 3.8 比较卵母细胞核成熟前后的变化及EGF的影响 38-40 3.9 比较发育液添加EGF与否对囊胚细胞数的影响 40 4 讨论 40-46 4.1 比较卵泡在卵巢皮质上的表面直径与实际直径的关系 40-41 4.2 比较四组卵泡内卵母细胞直径和透明带直径的差异 41 4.3 比较采集方法对绵羊卵母细胞数量的影响 41-42 4.4 比较不同表面直径卵泡在卵巢表面的分布情况及卵母细胞的质量 42 4.5 比较梯度LH、E_2对绵羊卵母细胞成熟率的影响 42-43 4.6 比较浓度为100NG/MLEGF对不同直径卵泡卵母细胞成熟率的影响 43-44 4.7 比较成熟添加EGF与否对后期受精胚胎发育的影响 44 4.8 比较卵母细胞核成熟前后的变化及EGF的作用 44-45 4.9 比较发育液添加EGF与否对囊胚细胞数的影响 45-46 5. 结论 46 6.创新点 46-47 参考文献 47-56 附录1 56 附录2 56-57 致谢 57-58 作者简历 58-59 导师评阅表 59
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 > 羊
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