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外源激素GA_3、IAA、ABA、KT对甜菜M14单体附加系亲子代相似性的影响
作 者: 孟宪宇
导 师: 唐艳
学 校: 黑龙江大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 无融合生殖 激素 AFLP HPLC
分类号: S566.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
下 载: 72次
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内容摘要
甜菜M14品系是通过二倍体栽培甜菜(Beta vulgaris L.VV,2n=18)与四倍体野生白花甜菜(B.corolliflora Zoss.CCCC,2n=4x=36)杂交获得异源三倍体再经过与栽培甜菜回交得到的后代。其染色体组组成为栽培甜菜染色体组附加了一条白花甜菜第九号染色体。细胞学研究结果表明甜菜单体附加系的传递率平均为96.5%,表现为稳定高频传递。激素是植物体内代谢反应的产物,它产生于植物本身,同时又在不同水平上对植物的生长发育和生命活动进行调控。目前认为激素是植物信号传导的最重要的调节因子。许多研究结果表明,激素处理能诱导新的mRNA和蛋白质的合成,说明激素的许多作用是通过调节基因表达的方式实现的。本实验从外源激素诱导角度对其生殖特性进行探索。首先利用高效液相色谱法对甜菜M14品系在营养生长阶段中的4个不同时期叶片中的内源激素(IAA、ABA、GA3、KT)含量进行测定,同时以栽培甜菜为对照进行比较分析得出差异及规律,然后分别利用三种不同浓度的四种外源激素(IAA、ABA、GA3、KT)进行诱导,最后通过分子标记的手段(AFLP)分析诱导后的亲子代相似性关系,得到外源激素对其亲子代相似性的影响程度,从而初步探索激素在甜菜M14品系亲子代相似性方面的影响及意义。经过实验得到以下结果:1.在0.1mg/mL和0.5mg/mL ABA诱导下的两组甜菜M14品系材料的亲子代遗传相似性系数明显高于未受过诱导的空白材料的亲子代遗传相似性系数,低浓度的ABA对甜菜M14品系的亲子代相似性有一定提高作用。2.GA3、IAA、KT的诱导对甜菜M14品系的亲子代相似性的影响不大。
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全文目录
中文摘要 2-3 Abstract 3-7 第1章 前言 7-20 1.1 植物无融合生殖的概述 7-10 1.1.1 植物无融合生殖现象的发现 7 1.1.2 植物无融合生殖的分类 7-8 1.1.3 植物无融合生殖的研究 8-10 1.2 甜菜M14品系 10-11 1.2.1 甜菜M14品系的获得 10-11 1.2.2 甜菜M14品系的研究 11 1.3 激素对无融合生殖影响的研究 11-12 1.4 AFLP分子标记概述 12-16 1.4.1 AFLP分子标记的原理 12-14 1.4.2 AFLP分子标记的应用 14-16 1.5 HPLC概述 16-19 1.6 本实验的内容、目的及意义 19-20 第2章 甜菜M14品系内源激素IAA、ABA、GA3、KT的测定 20-26 2.1 实验材料 20 2.2 实验试剂与仪器 20 2.2.1 主要试剂及来源 20 2.2.2 主要仪器 20 2.3 实验方法 20-22 2.3.1 甜菜叶片内源激素的提取 20-21 2.3.2 色谱条件 21-22 2.3.3 四种激素的回收率测定 22 2.4 结果与分析 22-26 第3章 外源激素诱导及AFLP分析 26-46 3.1 实验材料 26 3.1.1 外源激素诱导实验材料 26 3.1.2 AFLP实验材料 26 3.2 实验试剂与仪器 26-28 3.2.1 外源激素诱导试剂 26 3.2.2 AFLP实验试剂 26-28 3.2.3 实验仪器 28 3.3 接头与引物 28-29 3.3.1 HindⅢ接头和MseⅠ接头 28-29 3.3.2 HindⅢ和MseⅠ预扩增引物 29 3.3.3 HindⅢ和MseⅠ选扩增引物 29 3.4 实验方法 29-36 3.4.1 外源激素诱导 29-30 3.4.2 甜菜染色体镜检 30-31 3.4.3 甜菜基因组DNA提取及检测 31-32 3.4.4 AFLP反应体系的建立 32-35 3.4.5 6%变性聚丙烯酰胺凝胶检测 35-36 3.5 结果与分析 36-46 3.5.1 甜菜染色体镜检 36-37 3.5.2 甜菜基因组DNA提取及检测 37 3.5.3 甜菜M14品系遗传距离及聚类分析 37-46 结论 46-48 参考文献 48-54 附录1 54-55 附录2 55-62 致谢 62-63
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 糖料作物 > 甜菜(甜萝卜)
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