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人绒毛膜促性腺激素对乳腺癌侵袭转移作用的研究

作　者: 林授
导　师: 林德馨
学　校: 福建医科大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 乳腺癌人绒毛膜促性腺激素(hCG) 黄体生成素受体(LHR) 侵袭转移
分类号: R737.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的:通过构建黄体生成素受体( Luteinizing Hormone/human Chorionic Gonadotropin receptor,LHR)真核表达质粒载体(pcDNA3.1(+)-LHR),转染乳腺癌细胞,研究人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)对乳腺癌细胞侵袭转移能力的影响。方法:用KpnⅠ/HpaⅠ双酶切LHR-cDNA质粒载体;KpnⅠ/EcoR V双酶切pcDNA3.1(+)载体,构建pcDNA3.1(+)-LHR质粒载体,稳定转染MCF-7乳腺癌细胞,建立稳定高表达LHR的乳腺癌细胞株。应用体外侵袭转移实验方法,观察hCG对乳腺癌细胞迁移能力的影响。在此基础上,以半定量RT-PCR,分析hCG对乳腺癌细胞MMP1、MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP3、VEGF等侵袭转移相关基因转录表达的影响。结果:1、构建pcDNA3.1(+)-LHR真核表达质粒载体,通过酶切图谱及测序等方法鉴定。2、pcDNA3.1(+)-LHR稳定转染MCF-7细胞,通过RT-PCR和细胞内cAMP浓度测定,证实转染LHR的MCF-7细胞高表达LHR。3、MTT法测定hCG对乳腺癌细胞增殖力影响,转染LHR的MCF-7细胞增殖力无明显改变。4、应用体外侵袭转移实验方法,测定hCG对乳腺癌细胞侵袭力影响,转染LHR的MCF-7细胞侵袭力明显降低。5、应用半定量RT-PCR方法,测定hCG对乳腺癌细胞侵袭转移相关基因表达的影响,转染LHR的MCF-7细胞MMP9、VEGF基因转录受抑制,而TIMP1转录水平升高。结论:1、hCG对MCF-7乳腺癌细胞增殖力无明显影响。2、hCG抑制转染LHR的MCF-7细胞侵袭转移能力。3、hCG抑制转染LHR的MCF-7细胞MMP9、VEGF基因表达;促进TIMP1基因表达。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
主要材料与仪器  10-13
实验方法与结果  13-41
  第一部分 pcDNA3.1(+)-LHR 真核表达载体的构建  13-28
    方法  13-23
    结果  23-27
    小结  27-28
  第二部分 hCG 对乳腺癌细胞侵袭转移力的影响  28-41
    方法  28-32
    结果  32-40
    小结  40-41
讨论  41-45
结论  45-46
参考文献  46-52
致谢  52-53
附录  53-57
  质粒测序结果  53-56
  英文缩略词释义表  56-57
综述  57-70

人绒毛膜促性腺激素对乳腺癌侵袭转移作用的研究

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