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慢性间歇性缺氧对人肝癌细胞HIF-1α、TNF-α、IL-6表达的影响

作　者: 佘常
导　师: 杨宇
学　校: 中南大学
专　业: 老年医学
关键词: 慢性间歇性缺氧 慢性持续性缺氧 低氧诱导因子-1α 白介素-6 肿瘤坏死因子-α
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是一种具有潜在危险的疾病,发病率2%-4%,在老年人中发病率更高。OSAHS与冠心病、高血压病、动脉粥样硬化关系密切。慢性间歇缺氧是其主要致病机制之一,已有研究发现慢性间歇缺氧与氧化应激、炎症反应关系密切。本实验拟通过对人肝癌细胞(HepG2细胞)慢性间歇缺氧和慢性持续缺氧干预,研究慢性间歇缺氧与转录因子HIF-1α炎症因子TNF-αIL-6的关系,初步探讨慢性间歇缺氧对炎症反应的影响,为临床治疗提供实验数据和理论依据。方法1.采用HepG2细胞建立细胞模型,根据低氧程度及模式不同分为5组：21%氧浓度组；10%间歇缺氧组；5%间歇缺氧组；10%持续缺氧组；5%间歇缺氧组。2.实验室检测：采用酶联免疫吸附法测定细胞培养基上清液IL-6, TNF-a浓度以及细胞核内HIF-1α浓度。结果1.HIF-1α检测结果：持续缺氧5%组与持续缺氧10%组比较无统计学差异(p>0.05),间歇缺氧5%组与间歇缺氧10%比较无统计学差异(p>0.05),间歇缺氧5%组与持续缺氧5%组比较明显升高(p<0.05),间歇缺氧10%与持续10%组比较明显升高(p<0.05)；各组与21%氧浓度组比较明显升高(p<0.05)；2.IL-6检测结果：持续缺氧5%组与持续缺氧10%组比较明显升高(p<0.05),间歇缺氧5%组与间歇缺氧10%比较明显升高(p<0.05),间歇缺氧5%组与持续缺氧5%组比较明显升高(p<0.05),间歇缺氧10%与持续10%组比较明显升高(p<0.05),各组与21%氧浓度组比较明显升高(p<0.05)；3.TNF-α检测结果：持续缺氧5%组与持续缺氧10%组比较明显升高(p<0.05),间歇缺氧5%组与间歇缺氧10%比较明显升高(p<0.05),间歇缺氧5%组与持续缺氧5%组比较明显升高(p<0.05),间歇缺氧10%与持续10%组比较明显升高(p<0.05),各组与21%氧浓度组比较明显升高(p<0.05)；4.本实验中HIF-1a,IL-6,TNF-a两两之间相关性分析：HIF-1a与IL-6比较呈正相关(r=0.287,p<0.05)；HIF-1a与TNF-a比较呈正相关(r=0.273,p<0.05)；TNF-a与IL-6比较呈正相关(r=0.713,p<0.05)。结论1.慢性间歇性缺氧与慢性持续性缺氧可致人肝癌细胞HIF-1α激活及IL-6、TNF-a表达增高；2.慢性间歇性缺氧对人肝癌细胞TNF-a, IL-6表达的影响比在慢性持续缺氧环境更明显,慢性持续缺氧环境对HIF-1α表达的影响比慢性间歇性缺氧明显。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-10
第一章 前言  10-13
第二章 实验材料与方法  13-22
  2.1 实验材料  13-15
    2.1.1 实验对象  13
    2.1.2 细胞培养及分组  13-14
    2.1.3 主要药品及试剂  14
    2.1.4主要仪器设备及型号  14-15
    2.1.5 实验气体  15
  2.2 实验方法  15-21
    2.2.1 间歇缺氧的方法  15-16
    2.2.2 持续缺氧方法  16-17
    2.2.3 21%氧浓度组暴露方法  17-18
    2.2.4 样品的准备和保存  18
    2.2.5 人HIF-1α的检测  18-19
    2.2.6 人IL-6的检测  19-20
    2.2.7 人TNF-α的检测  20-21
  2.3 统计学处理  21-22
第三章 结果  22-26
  3.1 检测结果  22-24
    3.1.1 各组HIF-1α浓度比较  22
    3.1.2 各组IL-6浓度比较  22-23
    3.1.3 各组TNF-α浓度比较  23-24
  3.2 相关性分析  24-26
    3.2.1 HIF-1α与IL-6的关系  24
    3.2.2 HIF-1α与TNF-α的关系  24-25
    3.2.3 IL-6与TNF-α的关系  25-26
第四章 讨论  26-32
第五章 结论  32-33
参考文献  33-38
综述  38-47
  参考文献  44-47
致谢  47

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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