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TNF-α在NMDA诱导大鼠视网膜兴奋性损伤中的表达

作 者: 刘刚
导 师: 王大博
学 校: 青岛大学
专 业: 眼科学
关键词: N-甲基天冬氨酸 肿瘤坏死因子α 青光眼
分类号: R774.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:研究NMDA诱导大鼠视网膜兴奋性损伤中TNF-α的表达规律。方法:健康成年清洁级Wistar大鼠42只,随机分为正常对照组(6只)、PBS组(6只)和NMDA组(30只)。NMDA组所有大鼠均随机取一只眼球玻璃体腔注射2μl80mmol/l NMDA制作视网膜兴奋性损伤模型。PBS组大鼠随机取一只眼玻璃体腔注射2μl PBS。正常对照组不做任何处理。NMDA组大鼠在玻璃体腔注射后2h,8h,16h,24h,48h处死。HE染色光镜下观察各组视网膜组织的形态学变化,免疫组织化学染色方法观察视网膜TNF-α表达的变化,实时定量RT-PCR方法观察视网膜TNF-αmRNA表达的变化。结果:1 HE染色:正常对照组和PBS组大鼠视网膜组织结构层次清楚,染色均匀,细胞形态规则。NMDA组造模后2h,神经纤维层和神经节细胞开始水肿;造模后8h,水肿最严重,视网膜增厚;造模后16h,水肿较前减轻,排列疏松,形态不规则,数量减少;造模后24h,神经节细胞数目减少,排列紊乱,神经纤维层、神经节细胞层变薄;造模48h,神经节细胞稀少,神经纤维层和神经节细胞层萎缩,视网膜变薄.2免疫组织化学染色:正常对照组及PBS组视网膜未见TNF-α阳性表达。NMDA组造模后2h,TNF-α的表达量迅速上调(P<0.05),造模后8h,TNF-α表达量达高峰(P<0.05),造模后16h表达量降低,但仍高于对照组(P<0.05)。造模后24h,48h TNF-α表达量与16h无差别(p>0.05),较正常对照组增多(P<0.05)。TNF-α阳性表达主要位于神经纤维层、神经节细胞层及内丛状层。3实时定量RT-PCR:正常对照组和PBS组大鼠视网膜未见TNF-αmRNA表达。NMDA组造模后2h,TNF-αmRNA水平较正常对照组上调(P<0.05),造模后8h, TNF-αmRNA水平达高峰(P<0.05),造模后16h表达量降低,但仍高于对照组(P<0.05)。造模后24h,48h TNF-αmRNA表达量与16h无差别(p>0.05),较正常对照组增多(P<0.05)。结论:TNF-α在NMDA诱导大鼠视网膜兴奋性损伤中表达增加,该因子在视网膜兴奋性损伤中可能起重要作用。

全文目录


摘要  2-3
英文摘要  3-6
引言  6-8
第1章 材料与方法  8-16
  1.1 实验材料  8-9
  1.2 实验方法  9-14
  1.3 统计学分析  14-16
第2章 结果  16-18
  2.1 HE染色结果  16
  2.2 免疫组织化学染色结果  16-17
  2.3 实时定量RT-PCR结果  17-18
第3章 讨论  18-22
  3.1 兴奋性损伤模型的建立  18-19
  3.2 兴奋性损伤的机制  19
  3.3 兴奋性损伤后视网膜形态的变化  19-20
  3.4 兴奋性损伤后TNF-α的表达  20-21
  3.5 TNF-α及其受体在RGCs凋亡中的可能作用机制  21-22
结论  22-23
参考文献  23-27
综述  27-39
  参考文献  35-39
攻读学位期间的研究成果  39-40
附录  40-48
致谢  48-49

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中图分类: > 医药、卫生 > 眼科学 > 视网膜及视神经疾病 > 视网膜疾病
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