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利多卡因对幼鼠小肠缺血—再灌注肝脏损伤的保护作用

作　者: 盛盼
导　师: 吴学东
学　校: 大理学院
专　业: 儿科学
关键词: 肠缺血-再灌注 肝损伤 利多卡因 丙氨酸氨基转移酶 丙二醛 髓过氧化物酶 细胞间粘附分子-1 肿瘤坏死因子-α 幼鼠
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：在建立幼鼠小肠缺血-再灌注(Intestinal ischemia-reperfusion, II/R)损伤模型的基础上,使用利多卡因干预,进行肝脏组织学研究,检测血清中ALT值和肝脏组织中MDA、MPO和ICMA-1的含量及TNF-α(tumor necrosis factor-a)的表达,从而探讨利多卡因对幼鼠小肠缺血-再灌注肝脏损伤的保护作用,为进一步临床用药做实验铺垫和指导。方法：将80只4周龄Sprague Dawley (SD)大鼠随机分成四组：(1)假手术组10只,(2)肠缺血组(Ⅰ组)10只,(3)肠缺血-再灌注组(Ⅱ/R组)30只,(4)利多卡因干预组(Lid组)30只；假手术组仅暴露肠系膜上动脉(SMA)不做其他处理,60分钟(min)后处死动物;Ⅰ组暴露并夹闭SMA,60min后处死动物；Ⅱ/R组夹闭SMA60min,在再灌注前经股静脉注射生理盐水0.5ml作为对照；Lid组夹闭SMA60min,于再灌注前经股静脉注射利多卡因2mg/kg(稀释在0.5ml的生理盐水中)；Ⅱ/R组与Lid组分别于再灌注30min、60min、120min每个时间点各处死10只动物。动物处死前,采取动物血检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)值；动物处死后,取肝脏组织用H-E染色技术进行病理学观察,用分光光度计对肝脏组织匀浆中的MDA含量和MPO活性进行检测,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝脏组织ICAM-1的表达水平,用免疫组织化学技术检测肝脏组织中TNF-α的表达。根据资料的方差齐性,对结果进行组间单因素方差分析(One-Way ANOVA检验)、LSD-t检验或Kruskal-Wallis秩和检验基础上的Dunnett T3分析,检验水准取α=0.05,即P<0.05为差异有统计学意义。结果：1.普通H-E染色后,假手术组肝脏组织无明显病理改变。Ⅰ组肝组织轻度充血、肝细胞肿胀。Ⅱ/R组肝组织充血及炎症细胞浸润,肝细胞肿胀,胞浆疏松化,随再灌注时间的延长,损伤逐渐加重。Lid组肝脏损伤的变化趋势与Ⅱ/R组基本相同,但损伤程度较Ⅱ/R组轻,其中Lid30min和Lid60min(?)的损伤程度与Ⅰ组相似,而Lid120min(?)的损伤程度较Ⅰ组稍加重。2.小肠缺血-再灌注后幼鼠血ALT及肝组织中MDA、MPO、ICAM-1和TNF-α的检测结果：(1)Ⅰ组血及肝组织中各指标检测值均明显高于假手术组(P<0.01)。(2)Ⅱ/R组测得值从再灌注30mmin开始逐渐升高,除ALT测得值于再灌注60min出现峰值后逐渐下降外,其余各指标到再灌注120min一直处于上升状态(3)Ⅱ/R组各时间点测得值均高于Lid组相对应时间点、假手术组和Ⅰ组的测得值(P<0.01)。(4)Ⅱ/R组组内比较,除ALT测得值II/R30min与II/R120min比较差异无统计学意义(P>0.05)外,余指标差异均有显著性(P<0.01)。3.利多卡因干预后幼鼠血及肝组织中各指标的检测结果：(1)Lid组各指标测得值从再灌注30min开始逐渐升高,除ALT测得值到再灌注120min一直处于上升状态外,其余指标均于再灌注60min出现峰值,以后逐渐下降。(2)各指标在Lid组各时间点测得值均高于假手术组(P<0.01)。(3)与Ⅰ组比较,Lid组各时间点测得ALT与TNF-α值均低于Ⅰ组,差异有显著性(P<0.01);MDA和MPO测得值在Lid60min和Lid120min两时间点高于Ⅰ组,差异有显著性(P<0.01),而Lid30min测得MDA和MPO值以及各时间点ICAM-1测得值与Ⅰ组比较均无统计学意义(P>0.05)(4)Lid组各指标在各时间点测得值组内比较：ALT测得值在Lid30min分别与Lid60min和Lid120min比较差异都有显著性(P<0.01),而Lid60min与Lid120min比较差异无统计学意义(P>0.05)；MDA、ICAM-1以及TNF-α测得值组内比较结果差异都无统计学意义(P>0.05);MPO三个时间点的测得值相互比较,除Lid30min与Lid60min比较差异有显著性(P<0.01),其余比较差异都无统计学意义(P>0.05)。结论：小肠缺血-再灌注可导致幼年SD大鼠发生急性肝损伤,损伤的程度随着缺血-再灌注时间的延长而加重。利多卡因干预后不同程度的减轻了缺血-再灌注幼鼠肝脏的病理改变,并通过降低血清中ALT值和下调肝组织中MDA与MPO含量及ICAM-1与TNF-α活性水平而表现出对肝脏损伤有保护作用,但其对肝脏保护作用的机制有待进一步的研究。

全文目录


摘要  5-8
ABSTRACT  8-12
前言  12-13
材料与方法  13-24
结果  24-30
讨论  30-37
结论  37-38
参考文献  38-42
附录  42-53
综述  53-62
  参考文献  59-62
致谢  62

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学 > 实验药理学
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