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山核桃蒲壳中生物碱的分离及异莲心碱对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性的影响

作　者: 南李
导　师: 宣贵达
学　校: 浙江大学
专　业: 药学
关键词: 山核桃蒲壳生物碱分离异莲心碱 CYP3A
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

本文前面部分以浙江临安产山核桃(Carya cathayensis Sarg.)蒲壳为研究对象,旨在摸索出对其中药用价值较高的生物碱成分的分离与纯化的可行性条件,为进一步分离生物碱单体、鉴定其结构、研究其抗肿瘤活性打下实验基础。先用超声辅助提取的方法,得到醇提总浸膏,再用酸沉碱提法结合生物碱系统提取法,将生物碱分成不同极性的几个部分。最后利用硅胶柱层析及薄层色谱(TLC)相结合的方法摸索山核桃蒲壳中生物碱单体分离的可行条件。结果：山核桃蒲壳用乙醇提取出膏率为6.09%。弱碱性生物碱提取率为0.22%；得到的叔胺生物碱,氯仿层固体提取率为0.018%；乙酸乙酯层固体(C)提取率为0.15%；水溶性生物碱提取率为：1.69%。C馏分用氯仿-甲醇(30：1→2：1；V/V)混合溶剂进行洗脱,得到E、F、G三馏分。继续用上述条件,增加装柱高度分离E馏分,得H、I两馏分。Ⅰ馏分的最优分离条件为石油醚-乙酸乙酯(3：1→1：1；V/V)洗脱。本文后半部分探讨异莲心碱对CYP3A酶活性的影响,以了解异莲心碱与CYP3A酶底物合用时可能产生的相互作用。首先制备大鼠肝微粒体,建立体外肝微粒体混合酶代谢体系；然后以睾酮作为底物探针,用HPLC建立检测CYP3A酶代谢活性的方法,考察体外代谢体系的最佳孵育条件；再将不同浓度异莲心碱分别与睾酮共同孵育于肝微粒体代谢体系中,测定在有或无异莲心碱存在下睾酮的减少量,以评估异莲心碱对CYP3A酶代谢的影响。结果：在肝微粒体孵育体系中,睾酮体外代谢的最佳孵育条件为底物浓度200μmol/L,代谢时间210 min。异莲心碱对CYP3A酶抑制作用较弱,IC50>1000μmol/L。结论：异莲心碱对CYP3A酶无显著影响。

山核桃蒲壳中生物碱的分离及异莲心碱对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性的影响

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