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利用何首乌毛状根糖苷化活性香豆素的初步研究

作　者: 邓文娟
导　师: 于荣敏
学　校: 暨南大学
专　业: 药物化学
关键词: 何首乌毛状根 香豆素 糖苷化 生物转化
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 37次
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内容摘要


目的：建立利用何首乌毛状根生物转化得到香豆素糖苷的方法；并通过生物转化方法探讨何首乌毛状根的酶系统。方法：将6-羟基-4-甲基香豆素(A1),瑞香素(A2),亮菌甲素(A3),4-甲基-7-烯丙基氧香豆素(A4)分别投入何首乌毛状根悬浮培养体系中共培养7 d,分离鉴定各产物；利用HPLC进行生物转化条件优化；利用HPLC测定其水溶性。结果：A1,A2,A3均发生了糖苷化反应,产物依次为4-甲基香豆素-6-O-β-D-葡萄糖苷(A1P),瑞香素-8-O-β-D-葡萄糖苷(A2P),亮菌甲素-13-O-β-D-葡萄糖苷(A3P)。A4产物分别为：7-羟基-4-甲基香豆素(A4P1)、4-甲基香豆素-7-O-β-D-葡萄糖苷(A4P2)。何首乌毛状根生物转化A1总摩尔转化率48 h达最大为76.3%。A2使用不含金属离子的培养基产率大幅增加,总摩尔转化率达72.44%。A3总摩尔转化率24 h达最大为58.4%。A1,A2,A3糖苷化产物的水溶性均得到提高。结论：何首乌毛状根能糖苷化A1,A2,A3;其中A3P为新化合物。此外首次发现何首乌毛状根具有水解酶。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-6
目录  6-8
1 前言  8-22
  1.1 香豆素简介  8-11
    1.1.1 香豆素的活性简介  8-11
    1.1.2 香豆素的应用缺陷  11
  1.2 香豆素苷简介  11-17
    1.2.1 香豆素苷应用优势  12-13
    1.2.2 香豆素苷的来源  13-17
  1.3 毛状根的生物转化应用  17-18
    1.3.1 毛状根与植物愈伤组织比较  18
  1.4 何首乌毛状根生物转化香豆素简介  18-19
    1.4.1 何首乌毛状根的来源  18-19
    1.4.2 何首乌毛状根糖苷化香豆素的研究  19
    1.4.3 何首乌毛状根糖苷化香豆素的优势  19
  1.5 何首乌毛状根生物转化类型  19-22
2 实验部分  22-53
  2.1 仪器与材料  22-23
  2.2 何首乌毛状根悬浮培养体系的建立  23
  2.3 何首乌毛状根生物转化6-羟基-4-甲基香豆素的实验  23-29
    2.3.1 底物6-羟基-4-甲基香豆素(A1)简介  23
    2.3.2 底物6-羟基-4-甲基香豆素的鉴定  23-24
    2.3.3 生物转化A1实验  24
    2.3.4 A1生物转化实验结果  24-26
    2.3.5 共培养时间对产物转化率的影响  26
    2.3.6 底物A1及产物A1P含量检测  26-27
    2.3.7 A1生物转化条件优化结果  27-28
    2.3.8 转化产物的时效(T-C)曲线  28-29
    2.3.9 A1生物转化小结  29
  2.4 何首乌毛状根生物转化瑞香素的研究  29-37
    2.4.1 底物瑞香素(A2)的选择  29-31
    2.4.2 瑞香素的来源及鉴定  31-32
    2.4.3 生物转化A2实验  32
    2.4.4 生物转化A2实验结果  32-34
    2.4.5 生物转化瑞香素的条件优化  34
    2.4.6 底物A2及产物A2P含量检测  34-35
    2.4.7 生物转化瑞香素条件优化结果  35-37
    2.4.8 A2生物转化小结  37
  2.5 何首乌毛状根生物转化亮菌甲素的研究  37-45
    2.5.1 底物亮菌甲素(A3)的选择  38-39
    2.5.2 亮菌甲素的来源  39-40
    2.5.3 生物转化A3实验  40
    2.5.4 生物转化A3实验结果与讨论  40-42
    2.5.5 共培养时间对生物转化A3的影响  42
    2.5.6 底物A3及产物A3P含量检测方法学考察  42-43
    2.5.7 共培养时间对生物转化A3影响结果  43-44
    2.5.8 A3生物转化小结  44-45
  2.6 何首乌毛状根生物转化4-甲基-7-烯丙基氧香豆素的研究  45-51
    2.6.1 底物4-甲基-7-烯丙基氧香豆素(A4)的来源  45
    2.6.2 生物转化A4实验  45-46
    2.6.3 生物转化A4实验结果与讨论  46-47
    2.6.4 共培养时间对生物转化A4的影响考察  47-48
    2.6.5 底物A4及其产物含量检测方法学考察  48-49
    2.6.6 共培养时间对生物转化A4影响结果  49-51
    2.6.7 A4生物转化小结  51
  2.7 香豆素及香豆素苷溶解度的初步测定  51-53
    2.7.1 香豆素及香豆素苷溶解度的测定方法  51-52
    2.7.2 香豆素及香豆素苷溶解度测定结果  52-53
3 总结  53-54
参考文献  54-61
附录  61-68
  符号说明  61-62
  化合物核磁测试图谱  62-68
在学期间发表的论文  68-69
致谢  69

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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