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转化生长因子β对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfal基因表达的影响

作　者: 王惠娟
导　师: 董进
学　校: 山西医科大学
专　业: 内分泌学
关键词: 转化生长因子β 成骨细胞增殖骨形态蛋白-2 核心结合因子al
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的初步研究转化生长因子β(TGF-β)在体外对小鼠颅盖骨成骨细胞增殖及骨形态蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子al (Cbfal)mRNA表达的影响,探讨转化生长因子作用于成骨细胞的可能机制,为临床供一定的理论依据。方法1.培养小鼠成骨细胞,并观察其形态和功能。2.不同浓度转化生长因子β(0、0.01、100ng/ml)作用于原代培养的乳鼠成骨细胞,采用MTT(噻唑蓝)比色法测定培养液OD值。3.不同浓度转化生长因子β(0、0.01、100ng/ml)干预原代培养的乳鼠成骨细胞,通过RT-PCR方法检测BMP-2和Cbfal的表达水平。4.统计学方法实验所得的数据以x±s表示,采用spssl3.0统计学软件对实验数据进行分析,组间比较用LSD—t检验;方差不齐,组间比较用Dunnett T3法检验,P<0.05差异有统计学意义。结果1.体外培养的小鼠成骨细胞大多呈长梭形,碱性磷酸酶组织化学染色阳性,培养液中加入β一甘油磷酸钠及L一抗坏血酸后钙茜素红染色阳性。2.不同浓度转化生长因子β(0、0.01、100ng/ml)作用于原代培养的成骨细胞24小时后可促进其增值,OD值显著增加P<0.05,TGF-β可明显促进成骨细胞增殖。3.通过半定量RT-PCR检测原代培养的成骨细胞BMP-2和CbfalmRNA的表达。结果显示,随着转化生长因子β浓度升高,成骨细胞BMP-2和CbfalmRNA基因表达升高,光密度比值明显增加且呈剂量效应关系。对照组与实验组、实验组组间比较,均有统计学差异(P<0.05)。结论1.转化生长因子β促进原代培养成骨细胞增殖。2.转化生长因子β通过调节BMP-2和Cbfal基因表达,从而促进成骨细胞增殖、分化及成熟。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-8
英文缩略词表  8-9
前言  9-11
第一章材料与方法  11-15
  1.1 实验材料  11-12
  1.2 主要仪器设备  12-13
  1.3 试剂的配置  13-15
第二章实验方法  15-18
  2.1 细胞的培养  15
  2.2 细胞鉴定  15-16
  2.3 MTT 检测细胞增殖能力  16
  2.4 RT-PCR 检测TGF-Β对成骨细胞BMP-2 和CBFAL 表达的影响  16
  2.5 统计学方法  16-18
第三章结果  18-23
  3.1 成骨细胞的生长观察及鉴定  18-19
  3.2 转化生长因子Β对原代培养成骨细胞增殖的影响  19-20
  3.3 转化生长因子Β对成骨细胞表面 BMP-2 和CBFAL 表达的影响  20-23
第四章讨论  23-26
  4.1 成骨细胞的培养和鉴定  23
  4.2 TGF-Β对原代培养成骨细胞增殖的影响  23-24
  4.3 TGF-Β对原代培养成骨细胞BMP-2 及CBFAL 表达的影响  24-26
结论  26-27
参考文献  27-30
综述  30-39
  参考文献  36-39
个人简介  39-40
致谢  40

转化生长因子β对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfal基因表达的影响

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