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微生物发酵改善菜籽粕品质的初步研究
作 者: 王刚
导 师: 陆健
学 校: 江南大学
专 业: 发酵工程
关键词: 菜籽粕 枯草芽孢杆菌-2 戊糖片球菌-1 发酵 硫甙 蛋白饲料
分类号: S816
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
本文通过枯草芽孢杆菌-2和戊糖片球菌-1混合发酵菜籽粕,达到综合改善菜籽粕品质的目的。首先对从菜籽粕中分离得到的205株菌通过以硫甙为唯一碳源的培养情况进行初筛,获得了具有良好生长情况(OD600>0.6)的菌株22株。通过测定硫甙的降解情况,获得了6株具有较强硫甙降解能力的乳酸菌。通过菜籽粕固态发酵进行复筛,最终获得了1株硫甙降解率为62.11%的菌株戊糖片球菌-1。从实验室保藏的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌进行筛选,通过固态发酵菜籽粕实验,测定发酵菜籽粕中肽含量,结合发酵菜籽粕蛋白的SDS-PAGE分析,筛选出1株对菜籽粕蛋白降解能力较强的枯草芽孢杆菌-2。通过单因素和正交实验对菜籽粕的发酵工艺进行了优化,确定了最优的发酵条件为,发酵温度为35℃,总接种量为20%,发酵时间为48h,戊糖片球菌-1的接种时间为第6h接入,料水比1:1,枯草芽孢杆菌-2和戊糖片球菌-1的接种比为1:3。在此条件下:菜籽粕中肽含量为10.25±0.43%,硫甙含量为20.15±0.65μmol/g,总酸含量为3.57±0.27%。初步建立了优质发酵菜籽粕的质量控制标准,硫甙的含量为≤25μmol/g,粗蛋白含量≥43%,水解氨基酸总量≥33%,12S球蛋白降解率≥80%,分子量在5kDa以内的菜籽肽含量≥9%,蛋白质的快速体外消化率提高1.5个百分点以上,乳酸含量≥2.5%。
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全文目录
摘要 3-4 Abstract 4-7 第一章 绪论 7-15 1.1 饲料工业与蛋白质饲料原料 7-8 1.2 菜籽粕的营养价值及其抗营养因子 8-9 1.3 菜籽粕品质的改善方法 9-12 1.4 本课题的研究背景和意义 12-13 1.5 本课题的主要研究内容 13-15 第二章 材料与方法 15-21 2.1 实验材料 15 2.1.1 实验原料 15 2.1.2 主要试剂 15 2.2 实验仪器 15-16 2.3 实验方法 16-17 2.3.1 硫甙粗品的制备 16 2.3.2 硫甙降解菌株的筛选 16 2.3.3 蛋白质降解菌株的筛选 16-17 2.3.4 生长曲线的绘制 17 2.3.5 单因素实验 17 2.3.6 微生物跟踪计数 17 2.4 理化指标的测定 17-21 2.4.1 水分的测定 17 2.4.2 硫甙含量的测定 17 2.4.3 蛋白质含量及氨基酸组成的测定 17-18 2.4.4 菜籽粕蛋白的SDS-PAGE 分析 18 2.4.5 菜籽肽含量的测定 18 2.4.6 蛋白质的体外消化率 18 2.4.7 总酸含量的测定 18-19 2.4.8 乳酸含量的测定 19-21 第三章 结果与讨论 21-41 3.1 发酵菌株的筛选 21-24 3.1.1 硫甙降解菌株的筛选 21-23 3.1.2 菜籽粕蛋白降解菌株的筛选 23-24 3.1.3 小结 24 3.2 混合菌种发酵工艺的研究 24-33 3.2.1 发酵菌种生长曲线的的绘制 24-25 3.2.2 温度对菜籽粕发酵的影响 25-26 3.2.3 接种量对菜籽粕发酵的影响 26-27 3.2.4 料水比对菜籽粕发酵的影响 27-28 3.2.5 装样量对菜籽粕发酵的影响 28 3.2.6 发酵时间对菜籽粕发酵的影响 28-29 3.2.7 接种比对菜籽粕发酵的影响 29-30 3.2.8 戊糖片球菌-1 的接种时间对菜籽粕发酵的影响 30-31 3.2.9 正交实验优化 31-32 3.2.10 验证实验 32-33 3.2.11 小结 33 3.3 菜籽粕品质评价体系的初步建立 33-41 3.3.1 发酵菜籽粕中硫甙的含量 33-34 3.3.2 发酵菜籽粕粗蛋白含量和氨基酸组成 34 3.3.3 发酵菜籽粕蛋白的SDS-PAGE 分析 34-35 3.3.4 发酵菜籽粕中菜籽肽的含量 35 3.3.5 发酵菜籽粕蛋白质的体外消化率 35-36 3.3.6 发酵菜籽粕中乳酸的含量 36-37 3.3.7 发酵过程的初步解析 37-39 3.3.8 小结 39-41 第四章 主要结论与展望 41-43 4.1 主要结论 41 4.2 前景展望 41-43 致谢 43-45 参考文献 45-49 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 49
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 普通畜牧学 > 饲料
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