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微生物发酵改善菜籽粕品质的初步研究

作 者: 王刚
导 师: 陆健
学 校: 江南大学
专 业: 发酵工程
关键词: 菜籽粕 枯草芽孢杆菌-2 戊糖片球菌-1 发酵 硫甙 蛋白饲料
分类号: S816
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


本文通过枯草芽孢杆菌-2戊糖片球菌-1混合发酵菜籽粕,达到综合改善菜籽粕品质的目的。首先对从菜籽粕中分离得到的205株菌通过以硫甙为唯一碳源的培养情况进行初筛,获得了具有良好生长情况(OD600>0.6)的菌株22株。通过测定硫甙的降解情况,获得了6株具有较强硫甙降解能力的乳酸菌。通过菜籽粕固态发酵进行复筛,最终获得了1株硫甙降解率为62.11%的菌株戊糖片球菌-1。从实验室保藏的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌进行筛选,通过固态发酵菜籽粕实验,测定发酵菜籽粕中肽含量,结合发酵菜籽粕蛋白的SDS-PAGE分析,筛选出1株对菜籽粕蛋白降解能力较强的枯草芽孢杆菌-2。通过单因素和正交实验对菜籽粕的发酵工艺进行了优化,确定了最优的发酵条件为,发酵温度为35℃,总接种量为20%,发酵时间为48h,戊糖片球菌-1的接种时间为第6h接入,料水比1:1,枯草芽孢杆菌-2和戊糖片球菌-1的接种比为1:3。在此条件下:菜籽粕中肽含量为10.25±0.43%,硫甙含量为20.15±0.65μmol/g,总酸含量为3.57±0.27%。初步建立了优质发酵菜籽粕的质量控制标准,硫甙的含量为≤25μmol/g,粗蛋白含量≥43%,水解氨基酸总量≥33%,12S球蛋白降解率≥80%,分子量在5kDa以内的菜籽肽含量≥9%,蛋白质的快速体外消化率提高1.5个百分点以上,乳酸含量≥2.5%。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-7
第一章 绪论  7-15
  1.1 饲料工业与蛋白质饲料原料  7-8
  1.2 菜籽粕的营养价值及其抗营养因子  8-9
  1.3 菜籽粕品质的改善方法  9-12
  1.4 本课题的研究背景和意义  12-13
  1.5 本课题的主要研究内容  13-15
第二章 材料与方法  15-21
  2.1 实验材料  15
    2.1.1 实验原料  15
    2.1.2 主要试剂  15
  2.2 实验仪器  15-16
  2.3 实验方法  16-17
    2.3.1 硫甙粗品的制备  16
    2.3.2 硫甙降解菌株的筛选  16
    2.3.3 蛋白质降解菌株的筛选  16-17
    2.3.4 生长曲线的绘制  17
    2.3.5 单因素实验  17
    2.3.6 微生物跟踪计数  17
  2.4 理化指标的测定  17-21
    2.4.1 水分的测定  17
    2.4.2 硫甙含量的测定  17
    2.4.3 蛋白质含量及氨基酸组成的测定  17-18
    2.4.4 菜籽粕蛋白的SDS-PAGE 分析  18
    2.4.5 菜籽肽含量的测定  18
    2.4.6 蛋白质的体外消化率  18
    2.4.7 总酸含量的测定  18-19
    2.4.8 乳酸含量的测定  19-21
第三章 结果与讨论  21-41
  3.1 发酵菌株的筛选  21-24
    3.1.1 硫甙降解菌株的筛选  21-23
    3.1.2 菜籽粕蛋白降解菌株的筛选  23-24
    3.1.3 小结  24
  3.2 混合菌种发酵工艺的研究  24-33
    3.2.1 发酵菌种生长曲线的的绘制  24-25
    3.2.2 温度对菜籽粕发酵的影响  25-26
    3.2.3 接种量对菜籽粕发酵的影响  26-27
    3.2.4 料水比对菜籽粕发酵的影响  27-28
    3.2.5 装样量对菜籽粕发酵的影响  28
    3.2.6 发酵时间对菜籽粕发酵的影响  28-29
    3.2.7 接种比对菜籽粕发酵的影响  29-30
    3.2.8 戊糖片球菌-1 的接种时间对菜籽粕发酵的影响  30-31
    3.2.9 正交实验优化  31-32
    3.2.10 验证实验  32-33
    3.2.11 小结  33
  3.3 菜籽粕品质评价体系的初步建立  33-41
    3.3.1 发酵菜籽粕中硫甙的含量  33-34
    3.3.2 发酵菜籽粕粗蛋白含量和氨基酸组成  34
    3.3.3 发酵菜籽粕蛋白的SDS-PAGE 分析  34-35
    3.3.4 发酵菜籽粕中菜籽肽的含量  35
    3.3.5 发酵菜籽粕蛋白质的体外消化率  35-36
    3.3.6 发酵菜籽粕中乳酸的含量  36-37
    3.3.7 发酵过程的初步解析  37-39
    3.3.8 小结  39-41
第四章 主要结论与展望  41-43
  4.1 主要结论  41
  4.2 前景展望  41-43
致谢  43-45
参考文献  45-49
作者在攻读硕士学位期间发表的论文  49

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 普通畜牧学 > 饲料
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