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天津市腹泻儿童病毒感染情况分析及污水中肠道内病毒的检测

作　者: 欧阳雅博
导　师: 李君文
学　校: 中国人民解放军军事医学科学院
专　业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 病毒腹泻检出率基因型二级处理出水
分类号: R725.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

研究目的:腹泻病作为一个普遍的公众健康问题,仍是导致全球儿童发病和死亡的最重要主要病因。病毒是5岁以下儿童腹泻的主要病因。污水中可能含有大量的病毒性病原体,一些重要的介水传播性病毒包括肠道病毒可通过粪-口途径传播。为了解天津市儿童腹泻病毒性病原体的流行情况,污水中肠道内病毒的存在状况,特开展此研究。研究方法:2008年4月~2009年4月收集天津市儿童医院住院腹泻患儿的粪便标本,通过应用金标测试卡,ELASA,细胞培养,(RT-)PCR及测序技术来检测主要的致腹泻病毒性病原体及他们的分子特征,同时对住院儿童的人口学资料(包括性别,年龄,住址),临床表现资料(如住院天数、腹泻、发热、呕吐、脱水等)进行描述,并探讨其与不同病毒感染的关系。用SPSS统计软件进行数据分析处理。用钙离子絮凝柠檬酸洗脱病毒浓缩法和膜吸附-牛肉汤洗脱病毒浓缩法对二级处理污水出水中病毒进行浓缩,应用(RT-)PCR技术检测浓缩液中病毒,测序确定基因型。研究结果:2008年4月~2009年4月共有921例粪便标本用免疫学方法检测轮状病毒及星状病毒。其中的766例通过(RT-) PCR检测腺病毒及人类杯状病毒。所有结果为病毒阳性(除外人类杯状病毒)的粪便标本通过细胞培养及(RT-) PCR进一步鉴定。细胞培养液中阳性的(RT-)PCR产物及粪便中人类杯状病毒的PCR产物用以测序。2008年4月~2009年4月天津市住院腹泻患儿病毒感染率由高到低依次为:轮状病毒(28.56%)、腺病毒(17.62%)、诺如病毒(5.87%)及星状病毒(3.15%)。腹泻患儿粪便中病毒(1种以上)检出356例(356/766,46.48%),其中混合病毒感染占17.42%(62/356),检出最高的是轮状病毒和腺病毒混合感染34例(54.85%),其次是轮状病毒和诺如病毒的混合感染11例(17.74%),腺病毒和诺如病毒共同感染占11.29%(7 /62),轮状病毒和星状病毒的混合感染占8.06%(5/62),腺病毒和星状病毒共同感染占4.84%(3/62),未发现诺如病毒和星状病毒的混合感染病例。有两个病例分别检出三种病毒的混合感染,即轮状病毒、腺病毒和诺如病毒的混合感染及轮状病毒、腺病毒和星状病毒的混合感染。G1型(41/54,75.93%)是轮状病毒感染的主要流行株,其次是G3(11/54,20.37%)、G2及G9分别为(1/54,1.85%)。腺病毒检出率最高型别为Ad41(26/30,86.67%),剩余均为Ad1(4/30,13.33%),Ad40未检出。诺如病毒的测序结果显示其全部属于GII型,80.65% (25/31)是GII-4/2006b,19.35%是GII-3(6/31)。星状病毒全部为HAstV-1型。356例病毒阳性的患儿包括119例(33.43%)女患儿及237例男患儿(66.57%),但性别间检出率相似(分别为42.35%及48.87%),中位数年龄为7月龄(极差,出生后1小时~5岁)。病毒性腹泻以2岁以下患儿为主,但诺如病毒感染患儿的年龄中位数大于其他病毒感染。不同病毒感染患儿的居住地差异对病毒检出无影响。腹泻,呕吐及发热是病毒腹泻患儿中最常见的临床症状,混合病毒腹泻患儿的呕吐比例及脱水比例高于单一病毒感染。诺如病毒及轮状病毒腹泻的脱水比例高于其它腹泻。而星状病毒腹泻的住院时间长于其它病毒腹泻。病毒性腹泻患儿的粪便性状多为水样便,不同病毒感染间差异无统计学意义。多数病毒腹泻发生在第一季度及第四季度,而腺病毒腹泻高峰在第一和第三季度。2009年天津市纪庄子污水处理厂的二级处理出水中检出了甲肝病毒,1型脊髓灰质炎病毒及G6型轮状病毒。三种病毒均在第四季度检出,脊髓灰质炎病毒另一例在第一季度检出。结论:本研究提供了天津市住院病毒性腹泻患儿完整病原学信息及流行病学资料。本研究发现轮状病毒是最常见的婴幼儿腹泻病因,其次为腺病毒、诺如病毒及星状病毒。混合病毒感染对儿童腹泻有重要影响。二级处理出水中检测到不同的病毒类型。污水方面研究表明二级处理出水中病毒的检出可能会污染地表水进而危及人类健康。

全文目录

缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-11
前言  11-14
第一部分天津市腹泻患儿病毒性病原体的检测及分离  14-127
  第一章天津市腹泻患儿轮状病毒感染研究  14-51
    第一节引言  14-16
    第二节实验材料与方法  16-27
    第三节结果  27-48
    第四节讨论  48-50
    第五节小结  50-51
  第二章天津市腹泻患儿星状病毒感染研究  51-71
    第一节引言  51-52
    第二节实验材料与方法  52-59
    第三节结果  59-69
    第四节讨论  69-70
    第五节小结  70-71
  第三章天津市腹泻患儿腺病毒感染研究  71-94
    第一节引言  71-72
    第二节实验材料与方法  72-77
    第三节结果  77-92
    第四节讨论  92-93
    第五节小结  93-94
  第四章天津市腹泻患儿杯状病毒感染研究  94-116
    第一节引言  94-96
    第二节实验材料与方法  96-99
    第三节结果  99-113
    第四节讨论  113-115
    第五节小结  115-116
  第五章天津市腹泻患儿病毒感染情况综合分析  116-127
    第一节引言  116
    第二节实验材料与方法  116-117
    第三节结果  117-124
    第四节讨论  124-126
    第五节小结  126-127
第二部分污水中肠道内病毒的检测  127-144
  第六章两种浓缩水环境中肠道病毒方法的比较  127-136
    第一节引言  127-128
    第二节材料与方法  128-132
    第三节结果  132-134
    第四节讨论  134-135
    第五节小结  135-136
  第七章污水中肠道内病毒的检测  136-144
    第一节引言  136
    第二节实验材料与方法  136-139
    第三节结果  139-142
    第四节讨论  142-143
    第五节小结  143-144
结论  144-145
参考文献  145-154
综述  154-161
个人简历  161-162
攻读硕士期间发表文章  162-163
致谢  163

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