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清热解毒凉血化瘀法对内毒素肝损伤大鼠蛋白质表达的干预作用

作　者: 文海花
导　师: 刘鹏
学　校: 泸州医学院
专　业: 中医内科学
关键词: 清热解毒凉血化瘀内毒素血症肝损伤蛋白质组学
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：探讨清热解毒凉血化瘀法对内毒素肝损伤大鼠蛋白质表达的干预作用。方法：(1)SD大鼠40只,随机分为4组：正常组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组。(2)模型组：模型组大鼠每天用蒸馏水2ml灌胃,每天1次,连续7天。于末次灌胃1小时后腹腔注射脂多糖(LPS) (10mg/Kg)。腹腔注射及取血前禁食12小时以上,自由饮水。注射脂多糖6小时后,用1%戊巴比妥钠(30mg/Kg)腹腔注射,麻醉动物后,酒精消毒皮肤,开胸,心脏取血。所有血液放入4℃冰箱保存。用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS技术)检测血清蛋白质谱的差异表达。用全自动生化仪检测肝功酶学指标。用显色基质鲎试剂盒检测内毒素浓度。取肝组织1.5cm×1cm×0.5cm,10%甲醛固定,常规病理切片,HE染色,光镜下观察肝组织病理变化。(3)中药组：成人中药用量为1.58g生药／kg／天,根据体表面积公式,大鼠常规用量为10.20g生药／kg／天。中药高剂量组用中药20.40g／kg灌胃,每天1次,连续7天,余实验方法同模型组；中药低剂量组用中药5.10g／kg灌胃,每天1次,连续7天,余实验方法同模型组。(4)正常组：正常组大鼠每天用蒸馏水2ml灌胃,每天1次,连续7天,于末次灌胃1小时后腹腔注射等量蒸馏水,余实验方法同模型组。结果：(1)各组内毒素水平：与模型组比较,中药高剂量组、中药低剂量组的血液内毒素水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与中药低剂量组比较,中药高剂量组的血液内毒素水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)肝脏生化检查结果：与模型组比较,中药高剂量组、中药低剂量组的血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶水平(AST)降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与中药低剂量组比较,中药高剂量组的ALT、AST,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)蛋白质芯片共捕获到115个差异表达蛋白峰,其中,11个差异表达蛋白峰有统计学意义(P<0.05)。相对分子质量为4200道尔顿的蛋白峰在中药干预组的血清中高表达；相对分子质量为8984道尔顿、9005道尔顿的蛋白峰在中药干预组低表达。(4)光学显微镜下观察：①正常组：肝板纹理清楚,肝细胞排列整齐,索状结构清晰。②模型组：可见炎细胞浸润,核固缩,较多脂肪滴,索状结构不清,肝窦狭窄,肝细胞排列紊乱。③中药高剂量组可见肝板纹理比较清楚,有少量炎细胞。肝细胞排列较整齐。索状结构清晰。④中药低剂量组可见肝板纹理比较清楚,肝细胞肿胀、炎细胞及中央静脉扩张淤血。结论：(1)清热解毒凉血化瘀中药能降低内毒素肝损伤大鼠的内毒素水平。(2)清热解毒凉血化瘀中药能降低内毒素肝损伤大鼠的谷丙转氨酶水平、谷草转氨酶水平。(3)清热解毒凉血化瘀中药能影响内毒素肝损伤大鼠的蛋白质表达,对内毒素肝损伤大鼠的蛋白质表达有一定的干预作用。蛋白峰的变化,可能是清热解毒凉血化瘀中药干预内毒素肝损伤大鼠的重要的分子基础。各组大鼠的血清内确实存在着差异表达蛋白,这可能有助于内毒素肝损伤的进一步研究。

全文目录

1 清热解毒凉血化瘀法对内毒素肝损伤大鼠蛋白质表达的干预作用  3-52
  1.1 中文摘要  3-6
  1.2 英文摘要  6-10
  1.3 前言  10-21
  1.4 材料与方法  21-28
  1.5 结果  28-35
  1.6 讨论  35-44
  1.7 结论  44-45
  1.8 参考文献  45-51
  1.9 英汉缩略词对照表  51-52
2 致谢  52-53
3 清热解毒凉血化瘀法干预内毒素肝损伤的机制(综述)  53-62

清热解毒凉血化瘀法对内毒素肝损伤大鼠蛋白质表达的干预作用

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