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黄芪注射液对嗅鞘细胞增殖及分泌神经营养因子的影响

作　者: 张农山
导　师: 王培民
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中西医结合
关键词: 黄芪嗅鞘细胞增殖神经营养因子
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 48次
引　用: 1次
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内容摘要

背景：黄芪(astragalus)是豆科黄芪属植物,为中医传统的益气药。祖国医学还认为黄芪有强化机体的作用,临床重用黄芪治疗半身不遂每有良效,沈跃建应用黄芪和川芎注射液治疗神经功能缺损患者,症状均有明显好转；现代药理研究认为黄芪有多方面的药理作用,如具有免疫调节、抗菌利尿、强心等作用,刘世清等研究中药黄芪对实验性脊髓损伤的神经保护作用,认为黄芪可以提高机体对创伤的修复能力,增加受损部位的供血,有利于神经的再生。嗅鞘细胞作为一种特殊类型的胶质细胞,不仅具有促进成年哺乳动物嗅感觉神经元不断更新的特点,还能促进中枢神经系统多种神经元存活和轴突生长。目前研究认为嗅鞘细胞这些功能部分源于培养时其分泌的多种营养物质,如神经生长因子、脑源性神经营养因子等,嗅鞘细胞的特殊生物学特性使其被广泛应用于临床,在促进神经功能恢复和改善患者生活质量方面起到了积极的作用,成为神经损伤患者的新希望。本试验运用中西医结合的思维,强调综合治疗的原则,通过对祖国医学治疗方法机理的研究,以期用中西医结合的临床治疗思路给神经功能缺损患者带来更大福音,也进一步推广中药提供理论依据。目的：探讨嗅鞘细胞的生物学特性,探寻中药黄芪养嗅鞘细胞的作用。方法：体外培养嗅鞘细胞,并拍照记录观察对比；采用MTT法和流式细胞仪检测黄芪注射液对嗅鞘细胞增殖的影响；用酶联免疫法测定培养上清的神经营养因子的含量。结果：MTT结果显示20ug/ml和2ug/ml浓度黄芪注射液能明显促进嗅鞘细胞增殖；流式细胞仪检测结果表明黄芪注射液能显著减少嗅鞘细胞凋亡数量；ELISA结果表明2ug/ml浓度黄芪能对嗅鞘细胞分泌神经营养因子有显著的促进作用。结论：用差速贴壁法成功地体外培养出嗅鞘细胞；黄芪注射液能促进嗅鞘细胞增殖及分泌神经营养因子。

全文目录

摘要  7-8
ABSTRACT  8-10
一研究背景  10-14
二材料和方法  14-17
  2.1 实验材料  14
  2.2 实验方法  14-17
    2.2.1 原代嗅鞘细胞的分离培养  14-15
    2.2.2 嗅鞘细胞的纯化及免疫组织化学染色鉴定  15
    2.2.3 实验分组  15
    2.2.4 MTT法测定黄芪注射液对嗅鞘细胞的增殖作用  15-16
    2.2.5 流式细胞测定黄芪注射液对嗅鞘细胞的增殖作用  16
    2.2.6 ELISA法测定上清液神经营养因子的含量  16
    2.2.7 统计学分析  16-17
三结果  17-23
  3.1 形态学观察(X200)  17-18
  3.2 纯化后嗅鞘细胞的纯度测定  18-19
  3.3 黄芪注射液对嗅鞘细胞的作用  19-23
    3.3.1 MTT法结果显示  19-20
    3.3.2 流式细胞法测定结果显示  20-22
    3.3.3 ELISA结果显示  22-23
四讨论  23-26
五参考文献  26-30
综述一嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床研究现状  30-38
综述二黄芪的化学成分、药理研究及临床应用现状  38-44
附录  44-45
攻读硕士学位期间取得的学术成果  45-46
致谢  46

黄芪注射液对嗅鞘细胞增殖及分泌神经营养因子的影响

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