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肝癌干细胞特异性标志物的实验研究及其临床病理联系

作　者: 杨军
导　师: 冯德云
学　校: 中南大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 肝癌 干细胞标记物
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 33次
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内容摘要


目的：以肝细胞癌(HCC)、肝内胆管癌(ICC)的组织标本和肝癌细胞株HepG2作为研究对象,通过检测CD133、CD44、PSCA三项干细胞指标在上述癌细胞中的表达,对肝癌干细胞特异性标志物进行实验研究；同时,通过比较三种干细胞标记物在肝癌中的不同表达情况,探讨肝癌干细胞标记物与肝癌生物学行为的关系,为肝癌的靶向治疗提供一定的实验依据。方法：(1)分别选取70例HCC和50例ICC组织标本,按组织学分类将其分为高一中分化组和低分化组。(2)体外培养HepG2细胞。(3)用免疫组化MaxVision法分别检测上述标本中CD133、CD44、PSCA的表达。(4)利用Motic6.0图像分析系统和SPSS13.0统计学分析软件对上述免疫组化染色结果进行观察和分析。结果：(1)在HCC和ICC组织中,CD133、CD44及PSCA的阳性表达率分别为58.6%(41/70)、61.4%(43/70)、40%(28/70)和56%(28/50)、52%(26/50)、44%(22/50)；统计学分析显示CD133、CD44及PSCA在HCC和ICC的阳性表达率无显著差异(x2=0.824,P=0.662)；但PSCA在ICC的阳性表达强度高于HCC(P<0.05)。(2)CD133、CD44、PSCA阳性细胞在HCC及ICC中的分布均存在散在和成簇两种形式,其中CD133多呈散在分布,即使在成簇分布的癌巢中亦存在表达很强的单个细胞；而CD44和PSCA阳性细胞以成簇分布为主,但在成簇分布的癌巢中亦存在表达很强的单个细胞；在HepG2培养细胞中,CD133、CD44和PSCA阳性细胞呈散在和成片分布,其中CD133以散在分布为主,而CD44和PSCA则多呈成片分布。(3)在HCC和ICC癌旁组织中,CD133、CD44和PSCA阳性表达率分别为51.4%(36/70)、47.1%(33/70)、32.9%(23/70)和46%(23/50)、32%(16/50)、36%(18/50),3种蛋白在HCC和ICC的癌旁组织中的阳性率差异无统计学意义(P均>0.05)。在具有肝硬化伴不典型增生的肝细胞中可见表达很强的阳性细胞,且该阳性细胞多位于紧邻癌组织的部位。阳性细胞分布以散在多见,而成簇分布少见,尤其是CD133几乎均为散在分布。同时观察到ICC癌旁部分非典型增生的胆管细胞呈强阳性,其中PSCA表达最强。(4)CD133、CD44、PSCA在HCC、ICC及其癌旁组织中的阳性表达有较明显的一致性。(5)在70例原发性HCC和50例原发性ICC组织标本中,CD133的阳性表达率和阳性表达强度与肿瘤分化程度、淋巴结转移及肿瘤大小均显著相关(P<0.05),肿瘤分化愈差、体积愈大及有淋巴结转移者其阳性率和阳性表达强度亦愈高,反之亦然；而CD44和PSCA的阳性表达率和阳性表达强度仅与肿瘤的分化程度及淋巴结转移明显相关(P<0.05),而与肿瘤大小无关(P>0.05)结论：(1)CD133、CD44和PSCA可能是肝癌干细胞的特异性表面标志物,其中CD133的特异性可能最强,而PSCA可能是ICC较为特异的癌干细胞表面标志物；(2)在原发性肝癌中检测CD133、CD44、PSCA的表达有可能作为判断肝癌预后的指标之一。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-11
英文缩略词简表  11-12
第一章 前言  12-15
第二章 材料与方法  15-19
  2.1 检测标本  15
    2.1.1 组织标本  15
    2.1.2 一般资料  15
    2.1.3 培养细胞标本  15
  2.2 主要试剂及材料  15-16
  2.3 主要实验设备  16
  2.4 主要实验方法  16-17
    2.4.1 细胞培养  16
    2.4.2 抗原修复  16-17
    2.4.3 免疫组化染色  17
  2.5 结果判断  17-18
  2.6 统计学分析  18-19
第三章 结果  19-29
  3.1 CD133、CD44、PSCA在HCC和ICC中的阳性定位、表达率及阳性表达强度  19-20
  3.2 CD133、CD44、PSCA阳性细胞在HCC及ICC中分布  20-23
  3.3 CD133、CD44、PSCA在癌旁的表达及阳性细胞的分布  23-24
  3.4 HCC、ICC及其癌旁组织中CD133、CD44、PSCA阳性表达的重叠性  24
  3.5 CD133、CD44、PSCA在HepG2细胞中的表达  24-25
  3.6 HCC和ICC中CD133、CD44、PSCA的阳性率和阳性表达强度与临床病理联系  25-29
第四章 讨论  29-32
第五章 结论  32-33
参考文献  33-36
综述  36-45
致谢  45-46
攻读学位期间主要的研究成果  46

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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