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芦笋边角料提取分离及活性研究
作 者: 赵建华
导 师: 张立伟
学 校: 山西大学
专 业: 药物分析
关键词: 芦笋 皂苷 a-葡萄糖苷酶抑制剂 非酶糖基化抑制剂
分类号: R284
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 86次
引 用: 4次
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内容摘要
芦笋(Asparagus officinalis Linn.),学名石刁柏,属百合科天门冬属多年生宿根性草本植物。是一种药食兼用的上等蔬菜。药理学研究表明:长期食用可提高免疫、活血通经、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤、降血脂、降血糖等。其中甾体皂苷为其重要物质基础。目前我国正在进行芦笋的大规模种植与产品上市,生产发展十分迅速,随着芦笋种植的大量推广,加工过程产生的大量边角料作为废料被弃去,任其自然腐败,既污染了环境,又造成了资源的极大浪费。据测定,这些废弃物中除含有大量营养元素外,还含有丰富的皂苷类成分,为提高芦笋的综合利用率,本文主要对以下几个方面进行了研究:1、芦笋边角料的提取分离。首先选用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇对芦笋边角料提取物进行萃取分离,然后采用大孔吸附树脂D101对正丁醇部分进行柱层析分离,最后根据活性实验提示,针对D101树脂80%醇洗部分进行硅胶柱层析分离,薄层层析及定性试验显示:得到三个显色斑点单一的皂苷化合物,并命名为:皂苷1、皂苷2、皂苷3。2、芦笋皂苷降血糖活性的初步研究。通过体外a-葡萄糖苷酶.抑制剂模型,对芦笋皂苷提取物的不同组分进行了筛选,结果表明:皂苷1、80醇洗组分、皂苷3有显著的a-葡萄糖苷酶抑制活性,IC50分别为0.25mg/mL、0.41mg/mL、0.52mg/mL。表明芦笋皂苷有一定的降血糖作用。3、芦笋皂苷抗糖尿病并发症活性的初步研究。首次采用牛血清白蛋白-葡萄糖模型,针对芦笋皂苷对非酶糖基化产物生成量的影响进行了考察。结果表明:多数组分对非酶糖基化产物的生成均有不同程度的抑制作用,且抑制能力与浓度对数呈现良好的线性关系。其中80%醇洗组分、皂苷1、皂苷3抑制作用最为显著,80%醇洗组分的IC50仅为0.024mg/mL。初步显示芦笋皂苷有一定的抗糖尿病并发症活性。4、芦笋皂苷体外抗凝活性研究。通过ADP诱导的大鼠血小板聚集实验,初步研究了芦笋皂苷对血小板聚集的影响。测定结果显示:皂苷3有一定的血小板聚集抑制活性,且其浓度与抑制能力呈现一定的量效关系,其IC50为1.27mg/mL。另外,皂苷3对大鼠血浆凝血酶原时间(PT)、血浆活化部分凝血酶时间(APTT)、血浆凝血酶时间(TT)具有明显延长作用,同对照组相比具有显著性差异,提示皂苷3可能具有抗血栓的药理作用,有防治心脑血管疾病方面的前景。
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全文目录
中文摘要 10-12 英文摘要 12-14 第一章 前言 14-41 1.1 芦笋化学成分研究进展 14-18 1.1.1 皂苷类 14-16 1.1.2 黄酮类 16-17 1.1.3 多糖类 17 1.1.4 蛋白质和氨基酸类 17-18 1.1.5 矿物质元素 18 1.1.6 维生素 18 1.1.7 其它成分 18 1.2 芦笋药理活性研究进展 18-21 1.2.1 抗肿瘤作用 18-19 1.2.2 降血脂作用 19 1.2.3 保肝解毒作用 19-20 1.2.4 调节免疫功能 20 1.2.5 抗氧化及衰老作用 20-21 1.2.6 抗疲劳作用 21 1.2.7 抗溃疡作用 21 1.2.8 其它药理作用 21 1.3 甾体皂苷研究进展 21-24 1.3.1 甾体皂苷的提取分离 22-23 1.3.2 甾体皂苷的含量测定方法 23-24 1.4 a-葡萄糖苷酶研究进展 24-28 1.4.1 a-葡萄糖苷酶体内作用机制 25 1.4.2 a-葡萄糖苷酶抑制剂种类的研究 25-27 1.4.3 a-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型的研究 27-28 1.5 非酶糖基化反应研究进展 28-31 1.5.1 非酶糖基化反应原理 28-29 1.5.2 非酶糖基化反应抑制剂种类的研究 29-31 1.5.3 非酶糖基化反应抑制剂筛选模型的研究 31 1.6 选题目的及意义 31-32 1.7 研究内容 32-33 1.7.1 研究方案 32 1.7.2 工艺路线 32-33 参考文献 33-41 第二章 芦笋皂苷的提取分离 41-46 2.1 引言 41 2.2 实验材料与仪器 41-42 2.3 提取 42 2.4 分离 42-45 2.4.1 大孔吸附树脂的预处理 42-43 2.4.2 分离流程 43-44 2.4.3 分离组分的定性鉴别 44-45 参考文献 45-46 第三章 皂苷对a-葡萄糖苷酶抑制作用的初步研究 46-57 3.1 引言 46 3.2 实验材料与仪器 46 3.3 酶活力测定方法的建立 46-49 3.3.1 体系反应原理 46-47 3.3.2 测定方法的验证 47-48 3.3.3 体系中DMSO对酶活力的影响 48-49 3.4.样品溶液的制备 49-50 3.5 各组分抑制活性的测定 50-54 3.5.1 萃取组分抑制活性的测定 50 3.5.2 D101柱层析组分抑制活性的测定 50-53 3.5.3 硅胶柱层析组分活性测定 53-54 3.6 各组分抑制活性比较 54-55 3.7 小结 55 参考文献 55-57 第四章 皂苷对非酶糖基化反应抑制作用的初步研究 57-71 4.1 引言 57 4.2 实验材料与仪器 57-58 4.3 非酶糖基化反应抑制剂筛选体系的建立 58-61 4.3.1 体系反应原理 58 4.3.2 激发与发射波长的选择 58-59 4.3.3 测定方法的验证 59-61 4.4 样品溶液的制备 61 4.5 各组分抑制活性的测定 61-68 4.5.1 萃取组分抑制活性的测定 61-62 4.5.2 D101柱层析组分抑制活性的测定 62-66 4.5.3 硅胶柱层析组分抑制活性的测定 66-68 4.6 各组分抑制活性比较 68-69 4.7 小结 69-70 参考文献 70-71 第五章 皂苷体外抗凝活性的初步研究 71-76 5.1 引言 71 5.2 实验材料与仪器 71-72 5.2.1 实验仪器与试剂 72 5.2.2 实验动物 72 5.3 ADP诱导大鼠血小板聚集实验 72-73 5.4 对大鼠血浆凝血酶原时间(PT)的影响 73 5.5 对大鼠血浆活化部分凝血酶时间(APTT)的影响 73 5.6 对大鼠血浆凝血酶时间(TT)的影响 73-74 5.7 小结 74 参考文献 74-76 第六章 总结与展望 76-78 6.1 总结 76 6.2 展望 76-78 附录 78-79 致谢 79-80
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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