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补肾活血方含药血清对大鼠颗粒细胞类PCOS模型的影响

作　者: 王瑛
导　师: 杨正望；尤昭玲
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 中西医结合妇科学
关键词: 补肾活血方 类多囊卵巢综合征 颗粒细胞 含药血清 雌二醇
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要


目的：探讨肾活血方(BSHXF)含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞(GC)类多囊卵巢综合征(类PCOS)模型的形态、增殖及分泌雌二醇(E2)功能的影响,阐明补肾活血方对卵巢颗粒细胞的作用机制,为补肾活血方临床治疗PCOS提供实验依据,以期进一步拓宽PCOS疾病的研究思路,并为防治其他肾虚血瘀型排卵障碍性疾病提供思路。方法：1)制备大鼠含药血清,将不同浓度含药血清对体外分离培养大鼠近成熟卵泡颗粒细胞进行干预,筛选出促进颗粒细胞增殖和分泌E2功能的最佳含药血清培养液浓度。2)用丙酸睾酮(T)和不同浓度肿瘤坏死因子(TNF-α)对大鼠近成熟卵泡颗粒细胞诱导培养,建立颗粒细胞类PCOS模型。3)将造摸细胞随机分为正常组、模型组、实验组即含药组、孕马血清组,进行干预培养,观察各组GC形态、增殖、分泌E2功能及降低PCOS高雄激素的作用。结果：①浓度为10%补肾活血方含药血清对正常大鼠颗粒细胞生长具有最佳促进生长增殖和分泌E2作用；②500ng／m1T和浓度为500ng／m1的TNF-α对大鼠GC进行体外诱导培养可建立颗粒细胞类PCOS模型；③补肾活血方含药血清培养液对该模型细胞的形态及增殖的影响优于各实验组,促进其分泌E2的作用与正常组比较差异有显著统计学意义(p<0.01),抑制T分泌的作用与模型组比较,差异有显著统计学意义(p<0.01)。结论：补肾活血方含药血清作为培养液浓度以10%为佳。500ng／mlT和浓度为500ng／m1的TNF-α体外诱导培养大鼠卵巢颗粒细胞在一定程度上表现出颗粒细胞生长增殖障碍和分泌E2功能下降等类似多囊卵巢综合征的病理特征。补肾活血方含药血清对该模型细胞生长增殖及其分泌E2功能有良好的促进作用,并有降低该模型高雄激素的作用。

全文目录


中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
引言  10-11
第一部分 BSHXF含药血清的制备及体外培养大鼠卵巢颗粒细胞最佳含药血清浓度的筛选  11-20
  1.材料与方法  11-14
    1.1 实验动物  11
    1.2 药物与试剂  11
    1.3 主要设备及仪器  11-12
    1.4 含药血清的制备  12
    1.5 BSHXF含药血清有效成份的检测  12-13
    1.6 体外培养大鼠卵巢颗粒细胞最佳含药血清浓度的筛选  13-14
    1.7 检测指标及方法  14
    1.8 统计学方法  14
  2.结果与分析  14-20
    2.1 补肾活血方含药血清检测结果与分析  14-16
    2.2 不同浓度含药血清对颗拉细胞形态学影响的观察  16
    2.3 不同浓度含药血清对正常大鼠颗粒细胞分泌E_2水平的比较  16-17
    2.4 不同浓度含药血清对正常大鼠颗粒细胞生长的增殖作用  17-20
第二部分 TNF-α和T诱导大鼠卵巢颗粒细胞类PCOS模型的建立  20-25
  1.材料与方法  20-21
    1.1 实验动物  20
    1.2 主要试剂  20
    1.3 主要设备及仪器  20
    1.4 造模方法  20-21
    1.5 检测指标及方法  21
    1.6 统计学方法  21
  2 结果与分析  21-25
    2.1 形态学观察  21
    2.2 T和不同浓度TNF-α对大鼠颗粒细胞分泌E_2的影响  21-22
    2.3 T和不同浓度TNF-α诱导培养对大鼠颗粒细胞平均生长抑制率的影响  22-25
第三部分 BSHXF含药血清对TNF-α和T诱导培养大鼠卵巢颗细胞类PCOS模型影响的实验研究  25-28
  1. 材料与方法  25-26
    1.1 实验动物  25
    1.2 主要试剂  25
    1.3 主要设备及仪器  25
    1.4 BSHXF含药血清对体外培养大鼠颗拉细脑类PCOS模型影响的实验  25-26
    1.5 检测指标及方法  26
    1.6 统计学方法  26
  2. 结果与分析  26-28
    2.1 BSHXF对体外诱导培养大鼠颗粒细胞形态学的影响  26
    2.2 BSHXF对体外诱导培养大鼠颗粒细胞分泌E_2、T影响  26-28
第四部分 讨论  28-40
  1. 补肾活血方与PCOS  28-33
    1.1 肾虚血瘀是PCOS的基本病机  28-29
    1.2 肾虚血瘀与PCOS临床表现  29
    1.3 补肾活血法是中医治疗PCOS的基本方法  29-31
    1.4 补肾活血方治疗PCOS理论基础  31-33
  2. 中药含药血清  33-36
    2.1 含药血清的科学性  33-34
    2.2 关于本实验含药血清的制备  34-36
    2.3 关于含药血清的检测  36
    2.4 含药血清加入量和对照组的设立  36
  3. PCOS与GC  36-37
  4. 肿瘤坏死因子(TNF-α)和雄激素(T)诱导培养颗粒细胞类PCOS模型  37-38
    4.1 PCOS高雄激素与GC凋亡  37
    4.2 PCOS中TNF-α与GC  37-38
    4.3 肿瘤坏死因子(TNF-α)和雄激素(T)诱导培养建立颗粒细胞类PCOS模型  38
  5.补肾活血法治疗PCOS排卵障碍取效的现代机理探讨  38-39
    5.1 促进卵巢颗粒细胞的生长增殖  38
    5.2 调节女性生殖内分泌功能  38-39
  6. 本研究的不足之处与研究展望  39-40
结论  40-41
参考文献  41-45
附图  45-48
综述  48-53

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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