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联用色谱在中药及血浆氨基酸中的应用研究

作　者: 季晓燕
导　师: 梁逸曾
学　校: 中南大学
专　业: 分析化学
关键词: 联用色谱化湿药挥发油化学计量学代谢组学
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

色谱及色谱-质谱联用技术借助新的分析理论和技术,为中药现代化、生命科学和环境科学等学科分析问题的解决提供了强有力的工具和手段。本论文从实际问题出发,从色谱及色谱质谱联用仪器入手,通过有效利用仪器分析技术提供的有用信息,分析比较了八种化湿药挥发油成分异同,同时建立了一个代谢组学的新平台并成功应用于超重、肥胖与正常儿童的判别分析。本论文的研究内容主要为以下两个部分：一、采用气相色谱-质谱联用技术分离和检测八种化湿药挥发油,在色谱分离与质谱表征的条件下借助直观推导式演进特征投影法(HELP)实现了重叠色谱峰的分辨。八种化湿药共定性出182种化学成分,占挥发油总量的85.3%以上。定性出共有组分67种,八种药材挥发性成分中均含有桉叶油醇(Eucalyptol,0.01％～77.26％).环氧石竹烯(Caryophyllene oxide, 0.02％～5.5％)和和D-柠檬烯(D-Limonene,tr-8.64％).挥发油共有成分大多数为萜类化合物及其衍生物,但其含量存在较大差异。研究结果表明采用HELP大大提高了定性、定量结果的准确度,为阐明中药的化学物质组成和科学合理用药提供了参考依据,奠定了基础。二、采用液相色谱分离(HPLC)荧光检测快速测定儿童血浆中的16种氨基酸。考察方法的线性范围、精密度、稳定性和回收率。方法成功应用于儿童血浆的分析。对于获得的复杂的色谱数据,在比较了化学计量学各种不同的模式识别方法后,成功建立了一种基于HPLC结合非相关线性判别分析(ULDA)的代谢平台用以寻找儿童超重与肥胖的代谢模式紊乱,典型相关分析(CCA)的方法被用来寻找潜在生物标记物。结果表明非相关线性判别分析(ULDA)法能够反映超重、肥胖和正常儿童氨基酸代谢谱的动态变化,建立的超重、肥胖和正常儿童判别模型总判别正确率达99.71%。并且ADMA和Thr可能是儿童超重与肥胖的潜在生物标记物。本文的研究也表明TC、TG、HDL以及LDL可能是与儿童超重与肥胖代谢模式紊乱关系最密切的临床参数。

全文目录

摘要  3-4
ABSTRACT  4-6
符号说明  6-9
第一章绪论  9-19
  1.1 引言  9-10
  1.2 色谱法原理及相关技术介绍  10-12
    1.2.1 气相色谱质谱法原理  10-11
    1.2.2 气相色谱质谱的基本组成  11
    1.2.3 液相色谱法原理  11-12
    1.2.4 液相色谱的基本组成  12
    1.2.5 荧光检测器  12
  1.3 中药挥发油及分析技术与方法  12-14
    1.3.1 挥发油及其化学组成  12-13
    1.3.2 分析挥发油的常用方法  13-14
    1.3.3 挥发油分析中的难点及解决方案  14
  1.4 代谢组学  14-15
  1.5 化学计量学方法及其在复杂体系分析中的应用  15-18
    1.5.1 化学计量学与二维数据  15-17
    1.5.2 模式识别分析  17-18
  1.6 本论文的研究内容  18-19
第二章 GCMS结合化学计量学分析八种化湿药  19-43
  2.1 引言  19-23
  2.2 理论部分-直观推导式演进特征投影法  23
  2.3 实验部分  23-25
    2.3.1 样品来源  23-24
    2.3.2 仪器与试剂  24
    2.3.3 挥发油的提取  24
    2.3.4 测定条件  24
    2.3.5 挥发油的定性与定量  24-25
  2.4 结果与讨论  25-41
    2.4.1 八种化湿药挥发油的指纹图谱  25-26
    2.4.2 化学计量学算法辅助定性定量  26-30
    2.4.3 八种化湿药挥发油成分比较分析  30-41
  2.5 本章小结  41-43
第三章液相色谱测定儿童血浆中的氨基酸  43-61
  3.1 引言  43
  3.2 儿童肥胖概述  43-45
    3.2.1 儿童肥胖诊断标准  43-44
    3.2.2 儿童肥胖的危害  44-45
  3.3 理论部分  45-46
    3.3.1 主成分分析  45
    3.3.2 偏最小二乘  45-46
    3.3.3 线性判别分析  46
    3.3.4 非相关线性判别分析  46
    3.3.5 典型相关分析  46
  3.4 实验部分  46-49
    3.4.1 受试者  46-47
    3.4.2 试剂与仪器  47-48
    3.4.3 标准品溶液及其他溶剂的配置  48-49
    3.4.4 血浆衍生  49
    3.4.5 HPLC检测条件  49
  3.5 结果与讨论  49-60
    3.5.1 方法验证  49-53
    3.5.2 实验结果  53-54
    3.5.3 超重、肥胖与正常儿童的判别分析  54-60
  3.6 本章小结  60-61
结论与展望  61-62
参考文献  62-71
致谢  71-72
攻读学位期间研究成果  72

联用色谱在中药及血浆氨基酸中的应用研究

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