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南海红树内生真菌#1403代谢产物1403-B抗肿瘤研究

作　者: 叶芳
导　师: 王继红
学　校: 重庆医科大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 海洋微生物代谢产物肿瘤凋亡
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 8次
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内容摘要

目的研究海洋微生物Halorosellinia sp.(NO.1403)代谢产物1403-B的溶解贮存方法,检测1403-B对多种肿瘤细胞的抑制作用,发现对1403-B作用敏感的肿瘤细胞株,初步探讨海洋来源的醌类药物1403-B抗肿瘤的机制。方法在研究1403-B药物溶解贮存方法的基础上,用2.5μmol/L,5.0μmol/L,10μmol/L,20μmol/L和40μmol/L的1403-B分别处理三株鼻咽癌细胞(CNE-2、5-8F、HONE-1),两株肝癌细胞(HepG2、 Be17402),肺癌细胞(A549),前列腺癌细胞(PC3),视网膜母细胞瘤(Rb),胃癌细胞(SGC7901)和正常细胞人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后MTT法检测各细胞的存活状态；荧光显微镜观察1403-B作用SGC7901后细胞形态学变化,用流式细胞仪分析其凋亡情况,Western blotting法检测凋亡相关因子(Caspase-3)的切割。结果MTT结果显示1403-B的最佳溶解贮存方式为直接用溶剂DMSO配制50mmol/L贮存液,其对正常细胞HUVEC的半数抑制浓度(IC50)为22.64±0.62μmol/L,而对多种肿瘤细胞呈浓度依赖性抑制(P<0.05),其中对胃癌细胞SGC7901的IC50最低,为4.12±0.57μmol/L。1403-B作用SGC7901细胞24h后,荧光显微镜下见细胞核皱缩,染色质浓集,形成凋亡小体等凋亡现象且呈剂量依赖性增加。流式细胞检测结果表明,随着1403-B浓度增加,SGC7901凋亡率升高。Western blotting显示1403-B能促进SGC7901细胞内Caspase-3切割。结论海洋药物1403-B能够通过诱导SGC7901凋亡而显著抑制其增殖,有望成为一种抗胃癌的新药物。

全文目录

目录  4-6
英汉缩略语名词对照  6-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
前言  11-13
第一部分：1403-B的抗肿瘤活性研究  13-41
  第一章 1403-B溶解方法探讨  13-18
    前言  13
    1. 实验材料与方法  13-15
    2. 实验结果  15-16
    3. 讨论  16-17
    4. 小结  17-18
  第二章 1403-B对肿瘤细胞的抑制作用  18-23
    前言  18
    1 实验材料与方法  18-19
    2 实验结果  19-21
    3 讨论  21-22
    4 小结  22-23
  第三章 1403-B抗胃癌机制研究  23-30
    前言  23
    1 实验材料与方法  23-25
    2 实验结果  25-28
    3 讨论  28-29
    4 小结  29-30
  总结  30-31
  参考文献  31-33
  文献综述  33-41
    参考文献  38-41
第二部分：重庆市36197例体检人群血脂情况及其与血细胞关系的分析  41-54
  前言  41
  1 研究对象  41-42
  2 研究方法  42-43
  3 结果  43-48
  4 讨论  48-51
  参考文献  51-54
致谢  54-55
攻读硕士期间发表的论文  55

南海红树内生真菌#1403代谢产物1403-B抗肿瘤研究

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