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黄芪多糖结构与抗肿瘤活性研究

作　者: 刘荣强
导　师: 朱振元
学　校: 天津科技大学
专　业: 制糖工程
关键词: 黄芪多糖分离纯化结构分析聚合度抗肿瘤
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 33次
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内容摘要

本文以黄芪(Radix Astragalus)为原料,通过水提醇沉法提取多糖；酶-Sevag联合法除蛋白；无水乙醇洗涤去色素；乙醇分级沉淀、DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-100柱层析分离纯化后得到两种黄芪多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ,苯酚硫酸法测定其糖含量分别为94.59%和97.57%。紫外光谱扫描测定结果表明,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ都不含核酸和蛋白；旋光度测定分别为[a]DAPs-Ⅰ23℃=+185°(C,0.001g/mL, H2O)、[a]DAPs-Ⅱ23℃=+170°(C,0.001g/mL, H2O);高效液相色谱法测定APS-Ⅰ和APS-Ⅱ重均分子量分别为4.77×106和8.68×103Da。GC分析表明,多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ主要由葡萄糖组成,还有少量的阿拉伯糖和木糖,其阿拉伯糖：木糖：葡萄糖的摩尔比分别为0.54：1：18.14和0.23：1：29.39；经红外光谱、甲基化分析、高碘酸氧化、Smith降解和核磁共振分析其多糖结构,结果表明,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ的结构相似,为α-(1→3)连接葡聚糖,其中少量1→4、1→6连接的葡萄糖、阿拉伯糖和木糖以分支存在。APS-Ⅰ和APS-Ⅱ结构的差异在于分子量即糖链聚合度的不同。通过对小鼠H22腹水瘤抑制效果的比较、小鼠血清聚丙烯酰胺凝胶电泳和肿瘤组织切片观察等发现,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ的抑瘤率分别为55.47%和47.72%, APS-Ⅰ的抑瘤效果要好于APS-Ⅱ;提示黄芪多糖抗肿瘤作用与其多糖结构存在一定的关系。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-8
1 前言  8-18
  1.1 引言  8
  1.2 黄芪多糖的提取与分离纯化  8-11
    1.2.1 多糖的提取  8-10
    1.2.2 多糖的分离纯化  10-11
    1.2.3 多糖的纯度鉴定  11
  1.3 黄芪多糖的结构测定  11-14
    1.3.1 化学法  12-13
    1.3.2 仪器分析法  13-14
    1.3.3 生物学方法  14
    1.3.4 黄芪多糖的结构研究进展  14
  1.4 黄芪多糖的药理研究  14-16
    1.4.1 黄芪多糖对免疫功能的影响  14-15
    1.4.2 降血糖作用  15
    1.4.3 对心血管系统的作用  15-16
    1.4.4 抗肿瘤作用  16
  1.5 本课题研究的目的、意义和主要内容  16-18
2 材料与方法  18-27
  2.1 仪器、试剂与材料  18-20
    2.1.1 仪器  18
    2.1.2 材料与试剂  18-20
  2.2 实验方法  20-27
    2.2.1 黄芪多糖的提取与分离  20-22
    2.2.2 黄芪多糖的结构研究  22-25
    2.2.3 黄芪多糖抗肿瘤活性的研究  25-27
3 结果与讨论  27-51
  3.1 黄芪多糖的提取与分离  27-29
  3.2 黄芪多糖结构分析  29-47
    3.2.1 理化性质分析  29-34
    3.2.2 单糖组成结果分析  34-36
    3.2.3 甲基化分析  36-41
    3.2.4 高碘酸氧化和Smith降解  41-44
    3.2.5 NMR结果分析  44-47
  3.3 抗肿瘤活性  47-51
    3.3.1 抑瘤率  47-48
    3.3.2 血清电泳分析  48-49
    3.3.3 组织切片观察  49-51
4 结论  51-52
5 展望  52-53
6 参考文献  53-60
7 攻读硕士期间发表的论文  60-61
8 致谢  61

黄芪多糖结构与抗肿瘤活性研究

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