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抵抗素对幼鼠主动脉内皮细胞一氧化氮系统的损伤作用

作　者: 杨帆
导　师: 都鹏飞
学　校: 安徽医科大学
专　业: 儿科学
关键词: 抵抗素大鼠主动脉内皮细胞一氧化氮一氧化氮合酶
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:抵抗素是新近发现的一种脂肪因子,在肥胖和超重儿童中血清浓度有不同程度升高,与心脑血管疾病等密切相关。通过原代培养幼鼠主动脉内皮细胞建立体外模型,以不同浓度抵抗素(resistin)干预,模拟正常和肥胖状态下抵抗素水平,从分子、蛋白、酶的活性、基因的表达及转录、翻译后调节等多个水平研究幼鼠主动脉内皮细胞一氧化氮(NO)系统的调控机制。方法:取幼鼠胸主动脉,用植环贴壁法原代培养大鼠主动脉内皮细胞,消化、传代,观察细胞形态,VIII因子相关抗原免疫细胞化学染色进行细胞鉴定,建立体外细胞模型。取传至3-5代的大鼠主动脉内皮细胞,以不同浓度鼠抵抗素(10-100 ng/ml)干预24小时。MTT法检测内皮细胞活性,化学比色法检测NO及NOS酶活性,蛋白免疫印迹法检测细胞内eNOS(内皮型一氧化氮合酶)蛋白和P-eNOS(磷酸化一氧化氮合酶)蛋白的表达,RT-PCR检测eNOSmRNA表达的变化。结果:幼年大鼠主动脉内皮细胞经不同浓度鼠重组抵抗素处理24小时后:1.光镜下观察细胞形态均未发生明显改变。2.与对照组和10 ng/ml相比,50 ng/ml和100 ng/ml组细胞活性下降。3.各组NO产物及eNOS活性均未发生改变。4.与对照组相比,50 ng/ml和100 ng/ml组细胞eNOS蛋白和mRNA表达减少。5.各组P-eNOS表达未见改变。结论:抵抗素可减低幼年大鼠主动脉内皮细胞的细胞活性,调控NO系统,使eNOS蛋白和基因表达水平降低,其但未见通过调控磷酸化作用影响酶的活性从而降低NO产物的合成。

全文目录

英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
正文  10-46
  第一部分大鼠主动脉内皮细胞分离培养与鉴定  10-17
    1.引言  10
    2.材料与方法  10-13
    3.实验结果  13-14
    4.讨论  14-16
    5.结论  16-17
  第二部分抵抗素对大鼠主动脉内皮细胞一氧化氮系统的损伤作用  17-41
    1.引言  17-18
    2.材料  18-20
    3.方法  20-32
    4.结果  32-36
    5.讨论  36-40
    6.结论  40-41
  参考文献  41-46
附录  46-47
致谢  47-48
综述  48-60
  参考文献  55-60

抵抗素对幼鼠主动脉内皮细胞一氧化氮系统的损伤作用

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