学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

小球藻多糖的制备及芦苇生物活性成分的研究

作　者: 赵小霞
导　师: 谭成玉
学　校: 大连海洋大学
专　业: 环境科学
关键词: 小球藻多糖 工艺优化 抑制肿瘤血管生成 芦苇化学成分 芦苇总黄酮
分类号: TQ281
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
下　载: 3次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


本文以海洋小球藻（Chlorella spp）和芦苇（Phragmites australis）地上部分为材料，主要进行了两部分的研究：（一）小球藻多糖制备工艺的优化；（二）芦苇地上部分总黄酮制备工艺、化学成分及生物活性。对小球藻多糖提取进行了工艺优化，通过比较连续回流提取、超声波辅助提取、闪氏辅助萃取、酶解辅助闪式提取法，发现酶解辅助闪式提取的提取效率最高；并从六种酶中筛选出胰蛋白酶进行酶解，考察了酶解温度、酶用量、酶解时间和酶解pH，确定小球藻多糖酶解提取的较优工艺条件为：酶解温度为40℃、酶用量为1.5%、酶解时间为2h、pH为7.5。将小球藻多糖提取液进行除蛋白，乙醇分级沉淀后，进行Sepharose DEAE-52进行分离纯化，得到小球藻多糖，最终收率为3.75‰。对小球藻多糖进行了抑制肿瘤细胞培养液诱导的脐静脉内皮细胞的迁移活性测定，其浓度为50、100μg/mL时对肿瘤细胞培养液诱导的内皮细胞迁移具有较为明显的抑制作用。利用多种色谱技术对芦苇石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物进行了系统分离纯化，共分离得到13种化合物，通过理化常数测定，光谱数据分析，鉴定了其中7种化合物，分别为β-谷甾醇（β-sitosterol，L-1），对羟基苯甲醛（4-Hydroxybenzaldehyde，L-2），麦黄酮（Tricin；5,7,4’-trihydroxy-3’,5’-dimethoxy flavone，L-3），麦黄酮7-O-β-吡喃葡萄糖苷（Tricin7-O-β-glucopyranoside，L-4），单棕榈酸甘油酯（Glycerol alpha-monopalmitate，L-5），正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷（n-butyl-O-β-D-fructopuranoside，L-6），胡萝卜苷（daucosterol，L-7）。其中L-3，L-4，L-5，L-6为首次从芦苇中分离得到。测定了芦苇的醇提物、不同溶剂萃取物部分对血管紧张素I转换酶的抑制活性，各部分对ACE的抑制活性均随着代测样品浓度增大而增大，其中，正丁醇层萃取物的抑制活性整体较好，在浓度为100mg/mL时，抑制率可以达到71.6%。石油醚层萃取物亦有一定的抑制活性。考察了闪式辅助萃取-热回流法提取制备芦苇总黄酮的工艺条件，热回流提取过程采用溶剂为95%乙醇，在此条件下的最佳工艺为料液比0.7:100，闪式提取5分钟，热回流2小时。结合5种大孔吸附树脂进一步富集总黄酮类物质，发现AB-8、HPD100型大孔吸附树脂的吸附率和解吸率都比较高，可进一步纯化总黄酮。考察了HPD100大孔吸附树脂对总黄酮的静态吸附，确定了上样浓度为0.053mg/mL、pH为6时，吸附率分别可达21.1%、32.6%。论文为充分利用海洋小球藻和芦苇资源提供了一定的理论依据。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-6
目录  6-8
第一章 前言  8-16
  1.1 海洋微藻  8-11
    1.1.1 微藻多糖  8-10
    1.1.2 小球藻多糖生物活性  10-11
    1.1.3 小球藻多糖提取、分离和纯化  11
  1.2 芦苇  11-14
    1.2.1 芦苇的活性物质  11-13
    1.2.2 芦苇的生物活性  13-14
  1.3 本论文研究内容  14
  1.4 本论文研究意义  14-16
第二章 小球藻多糖的制备  16-27
  2.1 实验材料与方法  16-19
    2.1.1 实验材料与仪器  16
    2.1.2 小球藻多糖的含量测定  16-17
    2.1.3 小球藻多糖的提取方法  17-18
    2.1.4 小球藻多糖的除蛋白、醇沉  18
    2.1.5 DEAE-Cellulose 52 离子交换柱分离纯化多糖  18
    2.1.6 小球藻多糖对肿瘤细胞培养液诱导的内皮细胞迁移的影响  18-19
  2.2 实验结果与讨论  19-26
    2.2.1 葡萄糖标准曲线的绘制  19
    2.2.2 小球藻多糖提取方法的确定  19-20
    2.2.3 酶法提取小球藻多糖酶种类的确定  20-21
    2.2.4 酶法提取小球藻多糖工艺优化  21-23
    2.2.5 胰蛋白酶法提取小球藻多糖的正交实验  23-24
    2.2.6 小球藻多糖的除蛋白  24
    2.2.7 乙醇分级沉淀多糖  24-25
    2.2.8 DEAE-52 离子交换柱分离纯化多糖  25
    2.2.9 小球藻多糖对肿瘤细胞培养液诱导的内皮细胞迁移的影响  25-26
  2.3 小结  26-27
第三章 芦苇地上部分活性成分的研究  27-37
  3.1 芦苇化学成分的提取、分离和结构鉴定  27-34
    3.1.1 实验材料和仪器  27-28
    3.1.2 化学成分的提取分离  28-30
    3.1.3 化合物的结构鉴定  30-34
  3.2 芦苇生物活性的研究-对血管紧张素 I 转换酶（ACE）的抑制活性  34-36
    3.2.1 实验试剂与仪器  34-35
    3.2.2 实验方法与原理  35
    3.2.3 实验结果与讨论  35-36
  3.3 小结  36-37
第四章 芦苇地上部分总黄酮的提取与大孔吸附树脂对黄酮的分离纯化  37-48
  4.1 实验材料与仪器  37
    4.1.1 实验材料  37
    4.1.2 实验试剂与仪器  37
  4.2 实验方法  37-38
    4.2.1 样品的预处理  37
    4.2.2 芦苇中总黄酮含量的测定  37-38
    4.2.3 热回流提取法工艺优化  38
  4.3 实验结果与讨论  38-44
    4.3.1 总黄酮含量的测定方法  38-39
    4.3.2 热回流提取法工艺优化  39-44
  4.4 大孔吸附树脂分离纯化芦苇总黄酮  44-47
    4.4.1 实验材料与仪器  44
    4.4.2 实验方法  44-45
    4.4.3 实验结果与讨论  45-47
  4.5 小结  47-48
第五章 结构数据与谱图  48-55
  5.1 结构数据  48-50
  5.2 谱图  50-55
第六章 结论和创新点  55-56
参考文献  56-60
攻读学位期间发表的论文及申请专利目录  60-63
致谢  63

相似论文

  1. 曲拉精制干酪素褐变因素及工艺优化研究,TS252.5
  2. 山野菜石参营养成分与品质分析,S647
  3. 氢氧化镁结晶过程研究,TQ132.2
  4. 真姬菇液体培养条件的优化及多糖提取与分析,S646
  5. 大米淀粉转化生产葡萄糖的研究,TS231
  6. 用于无掩膜刻蚀的微小等离子体反应器的工艺制备和性能测试,TN305.7
  7. 羊奶牛奶混合干酪加工技术的研究,TS252.53
  8. 自动化过程控制系统在双乙烯酮工艺生产中的应用研究,TQ224.25
  9. 脲硫酸复肥工艺优化及工业化的基础研究,TQ444
  10. 一种四氮唑类化合物的合成与工艺研究,TQ252
  11. 成形电火花加工智能工艺优化技术的研究,TG661
  12. Inconel 718高速铣削工艺参数优化,TG54
  13. 天然色素低温真空干燥及其数学模型,TS202.3
  14. 优质腐竹生产的工艺优化,TS214.2
  15. 大豆分离蛋白生产废水处理工艺优化,X703
  16. 山东某化纤废水处理工艺优化的研究,X703
  17. 天津港北疆散货码头作业系统优化策略研究,U691.1
  18. 度洛西汀及其衍生物的合成研究,TQ463.53
  19. TIR-R聚光器的注塑成型过程仿真及优化,TQ320.662
  20. 纳他霉素高产菌株的选育,TQ465.5
  21. 阿里红多糖液体发酵及提取工艺的研究,TQ461

中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 基本有机化学工业 > 天然有机化合物的生产 > 碳水化合物、糖
© 2012 www.xueweilunwen.com