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真姬菇液体培养条件的优化及多糖提取与分析

作　者: 王耕
导　师: 胡开辉；叶瑞洪
学　校: 福建农林大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 真姬菇 培养条件优化 多糖提取 工艺优化 抑菌作用
分类号: S646
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 140次
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内容摘要


真姬菇(Hypsizigus marmoreus)是一种具有良好保健功能的食用菌。我国从80年代起对真姬菇开展生物学特性和栽培条件的研究。真姬菇营养丰富,包括8种人体必需氨基酸,其中赖氨酸、精氨酸含量高于一般菇类,真姬菇多糖中含有许多有重要生物活性物质,如真姬菇多糖,抗真菌蛋白质,胶质原结合蛋白,麦角甾醇且真姬菇多糖具有良好的抗肿瘤活性。基于真姬菇良好保健功能及广阔的市场前景,本文采用摇瓶培养方法对真姬菇的深层培养条件,即转速、温度、pH、接种量、瓶装量、培养时间进行了研究。结果表明,真姬菇深层培养的最佳条件是:转速120 r/min ,温度25℃,pH值4.0-7.0 (一般不需调pH值) ,接种量为10%左右(250 mL锥形瓶,100 mL瓶装量),瓶装量为80 mL(250 ml锥形瓶) ,培养时间为7 d。同时通过实验验证了该结果是可信的。针对目前真姬菇多糖提取通常采用热水浸提、溶剂提取和酶法浸提的现状,本文对热水浸提进行创新性的改进。热水浸提法虽然得率较酶法低,但是工艺简单,操作方便且经济。所以本文采用热水浸提法来提取真姬菇多糖。为了得到提取真姬菇多糖的最佳工艺条件,采用单因素试验研究了浸提温度,浸提时间,液固比,醇析作用和提取次数这五个因素对多糖提取的影响,接着又进行了多糖提取正交试验,根据试验结果通过运用spss统计软件得出真姬菇多糖的最佳工艺组合。结果表明当浸提温度为90℃,浸提时间为3h,液固比为30:1,乙醇的用量为2倍,提取次数为2次时,真姬菇多糖的提取率最高。同时对真姬菇菌丝体和子实体多糖进行了抑菌活性的初探,以枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酿酒酵母菌、黑曲霉和根霉为供试菌,采用纸片琼脂法来测定真姬菇菌丝体和子实体多糖对供试菌的抑菌强度。结果表明,真姬菇菌丝体和子实体多糖对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酿酒酵母均有一定的抑制作用,最小抑制浓度在10～5mg/mL之间,对根霉和黑曲霉无抑制作用。虽然真姬菇有较好的营养和药用价值,但对其开发深度还很少,而且真姬菇多糖的提取率普遍不高,所以在真姬菇多糖的提取工艺上还有很多改进的空间,如走在前面的香菇多糖的提取方法多并且提取率高,可以考虑适用于真姬菇多糖的提取,以提高多糖的提取率。

全文目录


摘要  7-8
Abstract  8-10
第一章 绪论  10-20
  1.1 真姬菇简介  10
  1.2 真姬菇形态特征  10-11
  1.3 真姬菇的生物活性物质  11-15
    1.3.1 核糖体抑制蛋白（Hypsin）  11-12
    1.3.2 多糖  12-15
    1.3.3 血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)  15
    1.3.4 麦角甾醇  15
  1.4 真姬菇的培养现状  15-17
    1.4.1 光照对菌丝生长的影响  16-17
    1.4.2 空气对真姬菇生长的影响  17
  1.5 真姬菇多糖提取方法  17-18
  1.6 其他多糖提取方法  18-19
    1.6.1 苹果多糖的提取  18
    1.6.2 香菇多糖的提取  18-19
  1.7 讨论及展望  19-20
第二章 真姬菇培养条件的优化  20-32
  2.1 材料与设备  20-21
    2.1.1 材料  20
    2.1.2 仪器设备与试剂  20-21
  2.2 方法  21-23
    2.2.1 菌种活化及一级摇瓶种子制备  21
    2.2.2 测定方法  21-22
    2.2.3 摇瓶培养条件的优化  22
    2.2.4 验证试验  22-23
  2.3 结果与分析  23-30
    2.3.1 不同转速对真姬菇深层培养的影响  23-24
    2.3.2 培养温度对真姬菇深层培养的影响  24-25
    2.3.3 pH 对真姬菇深层培养的影响  25-26
    2.3.4 接种量对真姬菇深层培养的影响  26-27
    2.3.5 瓶装量对真姬菇深层培养的影响  27-28
    2.3.6 培养时间对真姬菇深层培养的影响  28-30
  2.4 讨论与小结  30-32
第三章 真姬菇多糖提取工艺的优化  32-41
  3.1 材料  33
    3.1.1 材料及药品  33
    3.1.2 仪器和设备  33
  3.2 方法  33-35
    3.2.1 制作葡萄糖标准曲线  33
    3.2.2 真姬菇子实体多糖提取单因素试验  33-34
    3.2.3 多糖提取的正交试验  34-35
  3.3 结果和分析  35-40
    3.3.1 葡萄糖标准曲线  35-36
    3.3.2 真姬菇多糖提取得率计算公式  36
    3.3.3 单因素试验结果和分析  36-39
    3.3.4 多糖提取正交试验  39-40
  3.4 讨论与小结  40-41
第四章 真姬菇多糖的抑菌试验  41-45
  4.1 材料与设备  41-42
    4.1.1 材料  41
    4.1.2 仪器设备与试剂  41-42
  4.2 方法  42-43
    4.2.1 菌种的活化及菌悬液的制备  42
    4.2.2 真姬菇多糖对供试菌的抑菌试验  42
    4.2.3 真姬菇多糖对供试菌的最小抑制浓度(MIC)的测定  42-43
  4.3 试验结果  43-44
    4.3.1 真姬菇多糖对供试菌的抑制作用结果  43
    4.3.2 真姬菇多糖的最小抑制浓度(MIC)  43-44
  4.4 小结与讨论  44-45
第五章 结论与展望  45-48
  5.1 研究的结论  45-46
    5.1.1 真姬菇培养条件的优化  45
    5.1.2 真姬菇多糖提取工艺的优化  45-46
    5.1.3 真姬菇多糖的抑菌性的研究  46
  5.2 本研究的创新点  46-47
  5.3 研究的展望  47-48
参考文献  48-50
致谢  50

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 蔬菜园艺 > 菌类（食用菌）
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