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紫杉醇白蛋白片段纳米粒的制备和理化评价

作　者: 高原
导　师: 于洪儒
学　校: 辽宁医学院
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 紫杉醇纳米粒载体白蛋白片段
分类号: R94
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 95次
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内容摘要

目的通过酶解牛血清白蛋白得到蛋白片段，从蛋白片段中筛选出紫杉醇纳米粒的新型载体，并在理化性质和体外释药性方面考察新载体的可行性。以期通过这种方法制备成本更低廉的紫杉醇纳米粒剂型。方法以牛血清白蛋白（BSA）为原料，限制性胃蛋白酶为工具酶，进行白蛋白酶解实验，通过柱层析去掉未反应的BSA并根据分子量大小对蛋白片段分组，确定分离方法和条件。选择合适大小的蛋白片段作载体，以完整的BSA作为阳性对照，分散乳化-悬蒸去溶剂法制备紫杉醇。透射电子显微镜观察纳米粒外观，激光粒度仪测量粒径分布。考马斯亮蓝法测量纳米粒收率，HPLC法测量包封率和载药量，动态透析法考查体外释药性。对比样品和对照品的数据，并与文献中的相关参数比对，考查BSA片段用作紫杉醇纳米载体的可能性。结果BSA经过酶解后得到大量的片段，通过柱层析分离得到四个吸收峰，分别对应四个片段组。经浓缩后对收集样做SDS-PAGE电泳检测，根据电泳图谱对比蛋白MARKER,估算出各组蛋白的分子量分别为：40kD、40kD-31kD、17kD-20kD、17kD。经过过敏性实验验证，第一组、第二组出现不同程度的过敏反应，第三组、第四组安全，其中第四组仅有一条条带。选择第四组为候选载体，以完整BSA作阳性对照，制备紫杉醇纳米粒，经TEM观察，样品组和对照组的外观均圆整、均匀，符合纳米粒的要求。激光粒度仪检测平均粒径分别为对照组180.3nm、样品组150.2nm。经过测量、运算得到对照组的平均收率为（65.100±0.792）%，样品组的平均收率为(45.132±0.903)%，对照组的平均包封率为（62.069±0.752）%、平均载药量为（4.243±0.090）%，样品组的平均包封率为（50.246±0.712）%、平均载药量为（4.804±0.101）%。动态透析法考查体外释药性并绘制释药性曲线，由图可看出紫杉醇在缓冲液中1h内全部释放，而样品组和对照组的释药曲线相似，在6h后稳定释放维持较高浓度，48h处的累计释药率分别为样品组90.2%、对照组82.4%，具有缓释的效果。结论本实验证明用BSA片段制备紫杉醇纳米颗粒是可行的，并且其相关理化性质同使用完整HSA制备得到的纳米粒相似，对将BSA片段作为载体用于人体给药有积极的意义，在理论上为扩大紫杉醇纳米粒载体来源提供了一定依据。

全文目录

中文论著摘要  4-6
英文论著摘要  6-8
英文缩略语表  8-9
前言  9-12
实验材料与方法  12-20
实验结果  20-30
讨论  30-33
结论  33-34
本研究创新性的自我评价  34-35
参考文献  35-38
附录  38-49
  综述  38-46
    参考文献  43-46
  在学期间科研成绩  46-47
  致谢  47-48
  个人简介  48-49

紫杉醇白蛋白片段纳米粒的制备和理化评价

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