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鼻咽癌转移的线粒体蛋白质组研究

作　者: 刘健平
导　师: 陈主初
学　校: 中南大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 鼻咽癌肿瘤转移线粒体氧化应激蛋白质组差异表达蛋白质功能富集分析数据挖掘 PRDX3
分类号: R739.63
类　型: 博士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：分析和鉴定鼻咽癌转移中线粒体蛋白质组的改变,筛选与鼻咽癌转移相关的线粒体蛋白质,为进一步揭示它们参与鼻咽癌转移的分子机制和找寻与鼻咽癌转移相关的特异性分子标志物提供基础。方法：分别从鼻咽癌5-8F和6-10B细胞中分离线粒体,鉴定其纯度,提取线粒体蛋白质。经2D-DIGE技术找出两种细胞的线粒体差异蛋白质,进行MALDI-TOF和ESI-Q-TOF质谱分析,查询数据库鉴定。同时采用生物信息学方法对线粒体差异蛋白质进行GO功能富集分析和蛋白质相互作用网络构建。并对鼻咽癌5-8F细胞中表达上调的部分线粒体差异蛋白质进行siRNA瞬时干扰,Transwell迁移实验观察细胞运动能力的变化。结果：包括PRDX3和SOD2在内的16种线粒体差异蛋白质得到鉴定。在鼻咽癌5-8F细胞中抑制PRDX3的表达能够提高细胞的运动能力。GO功能富集分析显示生物学过程主要表现在细胞对活性氧应答反应、过氧化氢代谢过程、线粒体膜电势调控、细胞氧化还原动态平衡和氧化还原作用等5个方面；分子功能主要表现在氧化还原酶活性、半胱氨酸蛋白酶抑制剂活性、过氧化物酶活性、质膜通道蛋白活性和抗氧化剂活性等5个方面。经过数据挖掘,构建了一个线粒体差异蛋白质相互作用的网络。结合肿瘤-间质共演变假说的观点进行分析,初步揭示了PRDX3、PRDX6、SOD2、ECH1、SERPINB5、COX5A、 PDIA5、EIF5A、IDH3B和PSMC4等10种线粒体差异蛋白质参与鼻咽癌转移的可能分子机制,为氧化应激直接促进肿瘤转移的观点提供了实验证据。结论：共鉴定了16种线粒体差异表达蛋白质,初步揭示了其中10种参与肿瘤转移的可能分子机制。在鼻咽癌5-8F细胞中抑制PRDX3的表达能够提高细胞的运动能力。它们有可能成为鼻咽癌转移的分子标志,在线粒体氧化应激诱导的鼻咽癌转移过程中发挥重要作用。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-11
縮略词表  11-14
第一章鼻咽癌转移的线粒体差异蛋白质组研究  14-40
  1.1 前言  14-17
  1.2 材料与方法  17-26
  1.3 实验结果  26-34
  1.4 讨论  34-39
  小结  39-40
第二章鼻咽癌线粒体差异表达蛋白质的生物信息学研究  40-54
  2.1 前言  40-41
  2.2 材料与方法  41-42
  2.3 实验结果  42-51
  2.4 讨论  51-53
  小结  53-54
第三章鼻咽癌线粒体差异表达蛋白质PRDX3与鼻咽癌转移关系的初步研究  54-67
  3.1 前言  54-55
  3.2 材料与方法  55-60
  3.3 实验结果  60-63
  3.4 讨论  63-66
  小结  66-67
结论  67-68
参考文献  68-73
综述  73-87
  参考文献  83-87
附表  87-106
攻读学位期间主要的研究成果  106-107
致谢  107

鼻咽癌转移的线粒体蛋白质组研究

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