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PRP基因抑制胃癌SGC-7901细胞生长的实验研究

作　者: 王丽敏
导　师: 黎刚
学　校: 重庆医科大学
专　业: 遗传学
关键词: proliferin related protein 胃癌细胞细胞增殖
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：课题组前期研究发现PRP基因具有潜在抑制细胞生长增殖的作用，本文立足于探究PRP基因在胃癌SGC-7901细胞内过表达对肿瘤细胞生长的影响，通过体内外实验确证PRP对人类肿瘤细胞增殖抑制作用。方法：运用脂质体介导转染技术外源性导入PRP真核表达质粒pEGFP-C1-PRP和空质粒pEGFP-C1到人胃癌SGC-7901细胞，通过免疫荧光的方法分析PRP基因在SGC-7901细胞中的表达情况；采用流式细胞术、细胞计数绘制生长曲线等实验方法分析PRP基因过表达对SGC-7901细胞增殖和周期分布的影响；采用细胞划痕实验与Transwell等实验方法分析PRP基因过表达对SGC-7901细胞迁移能力和侵袭能力的影响；选用BALB-C裸鼠在其右前肢腋窝部位皮下接种细胞，构建裸鼠移植瘤模型。接种细胞分为转染pEGFP-C1-PRP质粒的PRP-7901组和转染pEGFP-C1空质粒C1-7901阴性对照组和正常SGC-7901细胞空白对照组。接种细胞数为3×10~6，每只裸鼠注射0.2ml。隔天测量瘤体体积，观察4周后收集标本，采用免疫组化法分析PRP蛋白以及PCNA蛋白的表达。结果：细胞生长和细胞周期的研究结果显示PRP基因过表达可以抑制细胞生长，引起SGC-7901细胞周期进程阻滞。Transwell实验与细胞划痕实验结果表明PRP基因过表达能够抑制SGC-7901细胞的侵袭力和迁移力。裸鼠体内成瘤实验结果显示PRP组瘤重明显低于空白对照组和阴性对照组，抑瘤率为59.76%。免疫荧光与免疫组化染色的结果提示pEGFP-C1-PRP组PRP、PCNA蛋白表达均低于空白对照组和阴性对照组，差异有统计学意义（p<0.05）。结论：综上所述，PRP基因在胃癌SGC-7901细胞中的过表达可以抑制SGC-7901细胞的生长和增殖，对SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力也具有抑制作用。BALB-c裸鼠移植瘤的体内实验进一步验证了PRP基因在肿瘤细胞中的过表达可以明显抑制移植瘤的生长和增殖。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-10
第一部分 PRP基因抑制SGC-7901细胞生长的体外研究  10-23
  前言  10
  1 实验材料  10-12
  2 实验方法  12-17
  3 结果  17-22
  4 讨论  22
  5 小结  22-23
第二部分 PRP基因抑制SGC-7901细胞生长的体内研究  23-34
  1 实验材料  23-24
  2 实验方法  24-27
  3 结果  27-32
  4 讨论  32-34
全文总结  34-35
参考文献  35-37
文献综述  37-40
  参考文献  38-40
致谢  40-41
攻读学位期间撰写的论文  41-42

PRP基因抑制胃癌SGC-7901细胞生长的实验研究

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