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2010年河北省哨点监测医院5岁以下住院病例病毒性腹泻病原学研究

作　者: 李晓毅
导　师: 齐顺祥
学　校: 河北医科大学
专　业: 病原生物学
关键词: 腹泻病毒病原轮状病毒杯状病毒星状病毒肠道腺病毒测序
分类号: R725.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

世界范围内腹泻是婴幼儿发病和死亡的主要疾病之一，发病率仅次于呼吸系统疾病。全世界每年都有上百万的儿童死于与腹泻相关的疾病或是并发症，并由此给全球带来巨大的疾病负担。病毒是引起婴幼儿急性腹泻的主要病原之一，常见的有轮状病毒(HRV)、杯状病毒(HuCV)、腺病毒(EAdV)和星状病毒(AstV)。因此，长期系统的监测非常必要，对预防和控制病毒性腹泻有重大作用。目的：了解导致儿童腹泻的主要的四种病毒流行特点和规律，掌握儿童病毒性腹泻的流行强度和病原构成，为制订病毒性腹泻防治策略提供参考依据。方法：1采用哨点医院监测方法采集59月龄以下住院腹泻病例粪便标本。2用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测轮状病毒抗原和用Real-timePCR法对杯状病毒、星状病毒和肠道腺病毒进行核酸检测。3再采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对轮状病毒分型。4分别随机选择A组G9型轮状病毒和诺如II型病毒各10株PCR产物进行基因序列测定，分析其序列特征并绘制进化树。5用SPSS软件包统计处理实验结果。结果：在414例标本中，有235例至少有一种病毒感染，阳性率为56.8%；混合感染为18例，阳性率为4.3%。按单一病原统计，轮状病毒阳性标本190例，感染率为45.9%；杯状病毒阳性标本52例，感染率为12.6%；腺病毒和星状病毒较少，阳性标本均为6例，感染率为1.4%。混合感染分别为两种或三种病毒感染，共18例。两种病毒感染中，HRV和HuCV混合感染最多64.3%(9/14)，其次是HuCV和Ast为3例；三种病毒感染仅有1例，为HRV、SV和Adv感染。190例轮状病毒阳性者中，G血清分型结果为：G3型最多，99例(52.1%)；G9型37例(19.5%)；G2型12例(6.3%)；G1型11例(5.8%)；G8型1例(0.5%)；不同型混合感染18例(9.5%)，其中G3+G9型6例，G1+G9型5例，G1+G3型4例，G2+G9型、G8+G9型、G2+G3+G9型各1例；未分型12例(6.3%)。P基因型分型结果为：P[8]型最多，为100例(52.6%)；P[6]型19例(10%)；P[4]型5份(2.6%)；P[10]型1例；不同型混合感染12例(6.3%)，其中P[6]+P[8]型7例(3.7%)；P[8]+P[10]型2例(1.1%)；P[6]+P[10]型、P[8]+P[9]型、P[4]+P[6]+P[10]型各1例；未能分型53例(27.9%)。G血清型和P基因型组合以G3P[8]型居多，为55例，占28.9%(55/190)；其次为G9P[8]型26例，占13.7%(26/190)；G1+G3P[8]+P[9]为1例；G1+G9P[6]+P[8]为1例；G8+G9P[6]+P[8]为1例。在杯状病毒阳性的52例中，诺如II型最多，为37例，占71.15%；其次为札如病毒，为11例；诺如Ⅰ型最少，为4例。轮状病毒以12月检出率较高，11月、12月和1月份为HRV腹泻的高峰期，主要感染18月龄以下儿童。杯状病毒、星状病毒、腺病毒未表现出明显的季节性。对10例A组G9型轮状病毒阳性标本VP7编码基因进行了序列测定，与G1、G2、G3、G4、G9参考株序列进行比对并绘制进化树。10例标本的组内核苷酸同源性为98.9%~100.0%，氨基酸同源性为99.2%~100.0%，且均与G9型参考株在同一分支上，核苷酸序列同源性亦较高，为97.6%~99.4%，与其他4个血清型G1、G2、G3、G4型的参考株同源性较低，为71.6%~79.2%，说明10例感染的HRV毒株均为G9血清型。对10例诺如II型阳性标本衣壳蛋白区核苷酸序列进行了测定，与GII1、GII2、GII3、GII4、GII5、GII7、GI1、GI2、GI4、GI6参考株序列进行比对和分析并绘制进化树。5株标本(编号为LL10070、LL10101、LL10108、10131133、LL10279)的组内核苷酸同源性为95.9%~99.7%，氨基酸同源性为96.0%~100.0%，与GII4型参考株在同一分支上，并且核苷酸序列同源性较高，为97.0%~98.2%；另外5株标本(编号为LL10100、LL10141、 LL10166、 LL10187、 LL10189)的组内核苷酸同源性为95.6%~99.1%，氨基酸同源性为96.0%~100.0%，并且与GII3型参考株在同一分支上，核苷酸序列同源性较高，为92.3%~94.4%。结论：1河北省稍点监测医院2010年度从5岁以下住院腹泻儿童检测出轮状病毒、杯状病毒、星状病毒和腺病毒，总阳性率为56.8%，轮状病毒是本地区婴幼儿病毒性腹泻的最主要病原，其次为杯状病毒。2婴幼儿腹泻发病高峰在11、12、1月份，主要感染2岁以下婴幼儿。3河北省稍点监测医院2010年度轮状病毒流行优势型别为G3血清型、P[8]基因型，G/P组合以G3P[8]为主。4河北省稍点监测医院杯状病毒以诺如II型为主，基因分析表明诺如II型存在GII-3和GII-4两个亚型。

全文目录

摘要  4-7
ABSTRACT  7-10
前言  10-11
材料与方法  11-19
结果  19-23
附图  23-32
附表  32-38
讨论  38-41
结论  41-42
参考文献  42-46
综述  46-54
  参考文献  49-54
致谢  54-55
个人简历  55

2010年河北省哨点监测医院5岁以下住院病例病毒性腹泻病原学研究

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