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生殖细胞核因子和OCT-4在宫颈癌中的表达研究

作　者: 王苗
导　师: 周宗瑶
学　校: 石河子大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 宫颈癌 GCNF OCT-4 免疫组化 RT-PCR
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：明确GCNF及OCT-4基因在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织（CIN）及宫颈鳞癌组织中是否表达以及其表达关系，以期为临床宫颈癌的诊断和治疗提供新的靶点或参考。方法：（1）收集石河子大学一附院病理科20例正常宫颈组织、70例宫颈上皮内瘤变(cervicalintraepithelial neoplasia,CIN）组织及29例宫颈鳞癌组织，运用免疫组化SP法观察GCNF及OCT-4蛋白的表达；（2）运用RT-PCR的方法分别检测9例正常宫颈组织、10例CINⅠ、9例CINⅡ、10例CINⅢ和9例宫颈鳞癌组织中GCNF及OCT-4mRNA的表达水平，所得数据在Excel中建立数据库，利用spss13.0软件进行统计学处理。结果:（1）GCNF蛋白在阳性对照成人睾丸组织中强阳性表达，主要定位于圆形精子细胞或粗线期精母细胞胞核中，呈棕褐色；在正常宫颈组织呈中等阳性表达，阳性着色为棕黄色定位于细胞核，表达率为90.0%（18/20）；在宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中呈中等阳性或弱阳性表达，表达率在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中分别为78.3%（18/23）、45.0%（9/20）和33.3%（9/27）；在宫颈鳞癌组织中大部分呈阴性表达，个别组织呈弱阳性表达，表达率为13.8%（4/29）。（2）GCNF RT-PCR凝胶电泳结果显示，GCNF目的条带为200bp，在正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和和宫颈鳞癌组织中均可观察到，但其亮度从正常宫颈组织到宫颈鳞癌组织逐渐变暗。各组织电泳条带经凝胶系统扫描分析后，GCNF/GAPDH灰度比值在正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈鳞癌组织分别为0.827±0.013、0.687±0.016、0.621±0.038、0.606±0.023和0.464±0.036，每一例组织均重复三次取其平均值作为最后的灰度比值。经统计学分析正常宫颈组织与CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈鳞癌组织相比差异均具有统计学意义，但CINⅡ与CINⅢ相比差异无统计学意义。（3）OCT-4蛋白在阳性对照精原细胞瘤中呈强阳性表达，阳性染色主要定位于细胞核，呈片状或块状棕黄色颗粒。但其在正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ以及宫颈鳞癌组织中均不表达。（4）OCT-4RT-PCR凝胶电泳结果显示，OCT-4目的条带为218bp，仅在阳性对照精原细胞瘤组织中观察到，在正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈鳞癌组织中均未观察到。结论：（1）GCNF基因在正常宫颈组织中主要表达于基底层和棘层细胞中，表明该基因可能与上皮细胞的正常分化有关；（2）GCNF基因在宫颈鳞癌组织中表达下调或表达缺失，表明该基因可能与肿瘤细胞的异常分化有关；（3）GCNF和OCT-4的表达在宫颈鳞癌中没有关系。

生殖细胞核因子和OCT-4在宫颈癌中的表达研究

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